茯苓三环三萜酸载药凝胶的构建及其抗乳腺癌作用研究

发布时间：2020-04-14 14:38

【摘要】：低分子量凝胶(LMWG)是低分子量凝胶因子与溶剂通过复杂的非共价键作用包括氢键,疏水相互作用和π-π相互作用等形成的一种超分子体系。LMWG作为药物传输体系具有良好的生物相容性,可降解性以及低毒副作用等优势引起了研究人员的广泛关注。本课题组前期研究发现一系列未经修饰的天然低分子量凝胶因子,其自身具有良好的生物活性和生物相容性,并且未经任何改性修饰即可形成天然产物凝胶。基于以上研究基础,本课题从天然产物茯苓中分离得到具有抗氧化、抗肿瘤活性的三萜酸类化合物,通过自组装形成凝胶并用于化疗药物盐酸多柔比星的装载,构建成茯苓三环三萜酸凝胶载药体系,并对其抗乳腺癌活性进行研究。主要研究内容如下:首先从茯苓中分离提取出凝胶因子,使用高效液相色谱测定其纯度为98%,经核磁共振谱分析确定为三环三萜酸Poricoic acid A(PAA)。通过掺入法制备凝胶,测试其临界胶凝浓度、相转变温度、流变学性能等凝胶基本性质。结果显示PAA能够在乙醇水体系中快速形成凝胶(PAA-Gel),并且凝胶性能优异,具有剪切稀化及自愈合能力,是可注射的凝胶载体。通过SEM观察发现凝胶形貌为纤维交织的网络结构。紫外可见光谱、红外光谱和接触角测试对其自组装驱动力进行研究,证实PAA-Gel是由π-π相互作用、氢键作用形成的凝胶。其次构建了以盐酸多柔比星(DOX·HCL)为模型药物的凝胶载药体系(PAA-DOX Gel),并对其流变学性能及体外抗肿瘤活性进行了评价。结果表明PAA-DOX Gel依旧具有良好的刚性及可注射性。体外细胞毒性实验表明PAA-DOX Gel对小鼠乳腺癌细胞4T1和人源乳腺癌细胞MCF-7的抑制效果明显优于游离DOX组。最后建立4T1荷瘤小鼠模型研究PAA-DOX Gel的体内释放及抗肿瘤活性。结果表明PAA-DOX Gel组对肿瘤抑制作用明显优于游离药物组,肿瘤HE病理学分析及TUNEL免疫组化分析结果表明PAA-DOX Gel可明显诱导肿瘤细胞产生凋亡和坏死。降低药物毒副作用评价包括小鼠体重变化分析、脏器指数分析、心脏HE病理学研究以及对白细胞数的影响。结果表明PAA-DOX Gel可以有效的降低药物的全身毒性,维持小鼠体重稳定;有效的抑制脾脏肿大,减少免疫系统损伤;有效保护心肌细胞,降低DOX·HCL对心脏的毒性;此外PAA-DOX Gel还能抑制炎症和充血情况的发生。最后对小鼠抗氧化能力进行分析,结果表明,原位注射的PAA-DOX Gel释放药物在治疗肿瘤的同时,显著增加小鼠血清中SOD活力,表明天然产物也发挥了其优异的抗氧化能力。综上,天然产物茯苓三萜酸凝胶载药系统的成功构建为药物递送提供了新的可行方式,也为天然产物凝胶的研究提供了新思路。
【学位授予单位】：哈尔滨工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285;TQ427.26;TQ460.4

【参考文献】