基于以方测证的类风湿关节炎风寒湿痹病证结合动物模型构建研究

发布时间：2020-04-15 00:45

【摘要】：目的:基于以方测证思路构建类风湿关节炎(RA)风寒湿痹病证结合动物模型,并探讨乌头汤治疗RA风寒湿痹方证对应的作用与机制。方法:(1)采用佐剂性关节炎(AIA)大鼠模型复合风寒湿环境制备RA风寒湿痹病证结合动物模型,选用乌头汤佐证和四妙丸反证AIA风寒湿痹证大鼠模型。从大鼠发病时间、发病率、足肿胀度、关节炎评分、组织病理学及放射学等方面验证RA风寒湿痹病证结合动物模型。(2)建立RA风寒湿痹病证模型,ELISA检测大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-17A和IL-17F含量表达;流式细胞术检测大鼠外周血中CD4~+Th17和CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞表达情况,探讨乌头汤治疗RA风寒湿痹证方证对应的可能分子机制。结果:(1)乌头汤显著延迟AIA大鼠关节炎发病时间、降低发病率,显著改善大鼠关节肿胀度及关节炎评分,明显抑制组织病理改变及骨破坏程度(P0.01或P0.001),而四妙丸效果不明显(P0.05)。(2)与正常组比较,风寒湿痹证组大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-17A和IL-17F的含量明显增高(P0.01),大鼠外周血中CD4~+Th17细胞含量表达水平增高,CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞表达水平减少(P0.01或P0.05)。乌头汤治疗后,模型大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-17A和IL-17F的含量明显降低,外周血中CD4~+Th17细胞表达减少,CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞表达增高(P0.01或P0.05)。结论:基于以方测证思路,通过选用乌头汤佐证和四妙丸反证构建AIA风寒湿痹病证结合大鼠模型,研究发现乌头汤能显著延迟AIA风寒湿痹证大鼠发病时间,降低发病率,明显改善关节肿胀及关节炎评分,抑制组织病理改变及骨破坏程度。乌头汤治疗RA风寒湿痹证的方证对应分子机制可能是通过调控Th17/Treg失衡,下调大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-17A、IL-17F含量,发挥病证治疗作用。
【图文】：

图 1 乌头汤及四妙丸对 AIA 风寒湿痹证发病时间及发病率影响（n=10， x ± s）注：与风寒湿痹证组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，，3.2 乌头汤与四妙丸对大鼠足肿胀容积及关节评分的影响AIA 造模后第 8 天开始，风寒湿痹证组和四妙丸组大鼠足趾部首先出现红

图 2 乌头汤及四妙丸对 AIA 风寒湿痹证大鼠足肿胀度和关节炎评分影响（n=10，x ± s）注：与风寒湿痹证组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.0013.3 乌头汤与四妙丸对大鼠后足踝关节病理切片的影响
【学位授予单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R-332;R285.5

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本文编号：2627921