基于“肠道菌群—宿主”交互的助脾散精法对DGP大鼠胰岛损伤修复影响的研究

发布时间：2020-04-15 05:14

【摘要】：【目的】基于“肠道菌群-宿主”交互作用,通过大鼠肠道菌群,肠黏膜屏障功能,观察半夏泻心汤对DGP大鼠胰岛伤修复的影响,拓宽半夏泻心汤使用范围及中药复方调节肠道菌群改善糖代谢提供实验依据。【方法】研究采用动物实验,120只体重200±20g的SPF级SD雄性大鼠,饲养于22℃±3℃,湿度60%±10%的动物房中,随机分为正常对照组(NG)10只,DGP造模组110只,以高脂高糖饲料喂养15天后,禁食12h后,腹腔快速注射40mg/kg STZ,大鼠造模后给与普通颗粒饲料,72小时后采用剪尾法选择空腹血糖在16.7~30.0mmol/L,且伴有明显饮食及大便性状改变,腹部有胀满表现的50只大鼠作为DGP模型大鼠,按血糖值分层随机分为:模型组(DGP);二甲双胍组(DGP-Met,1.80g/kg);半夏泻心汤高剂量组(DGP-HD,10.2g/kg);E:半夏泻心汤中剂量组(DGP-MD,5.1g/kg);F:半夏泻心汤低剂量组(DGP-LD,2.55g/kg),其余组分别灌服同等体积的生理盐水,连续灌胃四周。取材前一天,逼迫法取大鼠粪便样本,采用16sDNA方法检测肠道菌群结构,液相色谱法检测SCFAs,取材后,测定胃残留肠动力,D-木糖含量,肠道屏障,胰岛损伤修复相关蛋白基因表达。【结果】(1)与NG相比,STZ诱导的DGP大鼠体重、肠推进显著降低,空腹血糖、胃残留、血清D-木糖水平明显升高(P0.01);与DGP相比,半夏泻心汤能上调体重、肠推进,降低空腹血糖、胃残留、血清D-木糖水平(P0.01)。(2)16sDNA结果显示,与NG相比,DGP在门水平上厚壁菌门(Firmicutes)比例减少,拟杆菌(Bacteroidetes)升高,纲水平上拟杆菌纲(Bacteroidia)比例增多,杆菌纲(Bacilli)、梭菌纲(Clostridia)比例减少,目水平上拟杆菌目(Bacteroidale)比例增多,乳杆菌目(Lactobacillales)和梭菌属(Closteidiales)比例减少,科水平上拟杆菌目(Bacteroidales)比例增多,乳杆菌目(Lactobacillales)和梭菌目(Clostridiales)比例比例减少,与DGP相比,一定剂量的半夏泻心汤能改善肠道菌群状态,降低拟杆菌比例、增加厚壁菌比例,调节拟杆菌/厚壁菌比值,提高肠道菌群多样性;(3)与NG相比,DGP菌群代谢产物SCFAs水平明显降低,半夏泻心汤明显促进SCFAs的生成(P0.01)。(4)与NG相比,DGP大鼠肠道形态结构明显损伤,致病菌明显增多,益生菌明显减少((P0.01)),pH值、MUC3、α-defensin、内毒素、IgG、IL-6、IL-8、TNF-α、CD8a水平明显升高,MUC2、SlgA、IL-10下降(P0.01);与DGP比较,半夏泻心汤能改善肠道微生态坏境,降低pH值,保护黏膜组织的完整性,促进益生菌的增殖,减少致病菌水平,调节肠道MUC-2、MUC-3、α-defensin水平,显著减少内毒素生成(P0.01),调节节免疫蛋白IgG,slgA及CD8a表达,降低致炎因子,上调抗炎因子水平(P0.01)(5)与NG相比,DGP大鼠肝脏抗炎因子IL-10水平下调,LPS增多,下调p-AKT,上调ERK-1基因蛋白表达,与DGP比较,抑制明显抑制NGF生成,上调PSP/reg基因蛋白表达,促进IGF-1的表达水平;与DGP比较,半夏泻心汤可明显上调抗炎因子水平,上调p-AKT,下调ERK-1基因蛋白表达,减少LPS的生成(P0.01),对胰腺NGF无明显影响,可调控PSP/reg基因及蛋白表达、降低胰岛细胞增殖分化相关生长因子IGF-1的表达(P0.01)。【结论】(1)DGP可导致高血糖、胃肠动力障碍,引起肠道菌群紊乱,增加血清内毒素,降低肠道菌群多样性损伤肠黏膜机械屏障、化学屏障、生物屏障、免疫屏障。(3)半夏泻心汤能改善DGP大鼠胃肠动力障碍,降低肠黏膜通透性;(4)半夏泻心汤可上调抗炎因子水平,降低LPS对肝脏的损伤,对胰腺NGF无明显影响,可调控REG-1基因及蛋白表达、调节参与胰岛细胞增殖分化相关生长因子IGF-1的表达,促进胰岛损伤的修复,保护胰岛功能(5)半夏泻心汤可提高肠道菌群多样性,调节拟杆菌门/厚壁菌门比值,增加SCFAs,促进益生菌生成,抑制有害菌群,减少血清内毒素生成,可能与半夏泻心汤对DGP大鼠胰岛损伤修复有关;(6)半夏泻心汤能促进DGP大鼠肠道组织损伤修复,保护黏膜组织的完整性;改善肠道微生态环境,对DGP导致的肠道微生态紊乱具有调节作用;减少肠道菌群对肠黏膜屏障损伤,调控肠道黏膜免疫应答。
【图文】：

图 4-1 半夏泻心汤对 DGP 大鼠肝脏 ERK-1、Pan-AKT 通路的影Figure 4-1 The effects of Banxiaxiexin decoction on ERK-1 and Pan-Aliver of DGP rats.注：NG 表示正常组；DGP 表示模型组；DGP-Met 表示二甲双胍组；DGP-HD 表示组；DGP-MD 表示半夏泻心汤中剂量组；DGP-LD 表示半夏泻心汤低剂量组。DGP 与 N#表示（P＜0.05），##（P＜0.05）；与 DGP 相比，，其他各组组间差异，*表示（P＜0.05）(Note：A：半夏泻心汤对 DGP 大鼠肝脏 ERK-1、Pan-AKT 的影B：半夏泻心汤对 DGP 大鼠肝脏 ERK-1 蛋白表达影响；C：半夏泻大鼠肝脏 Pan-AKT 蛋白表达影响。)与 NG 相比，DGP 肝脏 p-AKT 表达明显下降，ERK-1 水平明统计学意义（P<0.01）；与 DGP 比较，DGP-Met、DGP-HD、DGP-M表达均有上升趋势，仅 DGP-Met、DGP-HD 有统计学意义，DGP-MDGP-MD、DGP-LD 肝脏 ERK-1 均有下调趋势，且具有统计学意义

图 4-2 半夏泻心汤对 DGP 大鼠胰腺 REG-1 蛋白表达的影响Figure 4-2. The effects of Banxiaxiexin decoction on the expression of pancreatic REG-1注：NG 表示正常组；DGP 表示模型组；DGP-Met 表示二甲双胍组；DGP-HD 表示组；DGP-MD 表示半夏泻心汤中剂量组；DGP-LD 表示半夏泻心汤低剂量组。DGP 与 N#表示（P＜0.05），##（P＜0.05）；与 DGP 相比，其他各组组间差异，*表示（P＜0.05）(Note：D：半夏泻心汤对 DGP 大鼠胰腺 REG-1 的影响免疫印泻心汤对 DGP 大鼠胰腺 REG-1 蛋白相对表达量影响。)与 NG 相比，DGP 胰腺 REG-1 蛋白表达水平明显上调，具（P<0.01）；与 DGP 比较，DGP-Met、DGP-HD、DGP-MD、DGP-L蛋白表达水平均有下调趋势，以 DGP-Met、DGP-HD 下调较为明显4.5.5.半夏泻心汤对 DGP 大鼠肝脏组织形态的影响图 4-3 半夏泻心汤对 DGP 大鼠肝脏组织形态的影响
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 张芮铭;徐瑞荣;;徐瑞荣应用半夏泻心汤治疗血液肿瘤疾病经验举隅[J];湖北中医杂志;2017年11期

2 李杰;贾壮壮;;半夏泻心汤临床应用研究进展[J];湖南中医杂志;2018年02期

3 王德民;;半夏泻心汤的临床应用体会[J];中国社区医师;2018年18期

4 邱泉根;;半夏泻心汤加味治疗急性胃肠炎32例[J];光明中医;2016年23期

5 徐国斌;;中药半夏泻心汤治疗消化性溃疡的疗效评定[J];中国处方药;2017年07期

6 洪雪峰;;中药半夏泻心汤对胃溃疡的治疗效果研究[J];基层医学论坛;2017年29期

7 付欣荣;;半夏泻心汤加味治疗胃食管反流相关性支气管哮喘41例临床观察[J];中国民族民间医药;2016年04期

8 李才菊;;半夏泻心汤加味治疗慢性萎缩性胃炎的临床观察[J];中国处方药;2016年09期

9 郭凤翔;;半夏泻心汤加味治疗肝胃郁热型反流性食管炎的疗效观察[J];中国医药指南;2014年32期

10 吴钟汉;;半夏泻心汤加味治疗胃炎的临床效果分析[J];海峡药学;2015年05期

相关会议论文 前10条

1 秦书杰;;半夏泻心汤临床应用[A];全国张仲景学术思想及医方应用研讨会论文集[C];2001年

2 王天秋;;浅淡半夏泻心汤的临床应用[A];全国张仲景学术思想及医方应用研讨会论文集[C];2001年

3 张诏;;半夏泻心汤新解[A];仲景医学求真（续三）[C];2009年

4 张东鹏;;浅谈半夏泻心汤的临床运用[A];甘肃省中医药学会2010年会员代表大会暨学术年会论文汇编[C];2010年

5 宋恩峰;孙文连;梅莎莎;;半夏泻心汤的研究进展[A];中华中医药学会脾胃病分会第二十四次全国脾胃病学术交流会论文汇编[C];2012年

6 ;半夏泻心汤治疗胃食道反流所致失眠[A];第三届全国睡眠学术会议论文汇编[C];2004年

7 赵峻;;半夏泻心汤加味治疗慢性胃炎的疗效观察[A];中华中医药学会脾胃病分会第二十四次全国脾胃病学术交流会论文汇编[C];2012年

8 王新佩;李明;丁艳亭;;半夏泻心汤病机为胃寒心热论[A];全国第二十一次仲景学说学术年会论文集[C];2013年

9 孟婷婷;路广晁;;半夏泻心汤在消化系统疾病中的应用[A];中华中医药学会脾胃病分会第二十三次全国脾胃病学术交流会论文汇编[C];2011年

10 孙永生;邱照娟;王得文;;半夏泻心汤类方在脾胃病中应用价值研究[A];甘肃省中医药学会2017年学术年会论文集[C];2017年

相关重要报纸文章 前10条

1 毛德西 河南省中医院;半夏泻心汤及其类方析义[N];中国中医药报;2017年

2 马纯阳;甘草[N];中国中医药报;2017年

3 刘博文 山西中医药大学;贾跃进用桂枝经验[N];中国中医药报;2017年

4 河南省中医院 毛德西名医工作室 张海杰 理萍 王新鲜;毛德西应用半夏泻心汤18法[N];中国中医药报;2014年

5 北京中医药大学 陈明;半夏泻心汤[N];中国中医药报;2014年

6 浙江省绍兴县中医院 傅金缄;半夏泻心汤应用体会[N];中国中医药报;2013年

7 河南中医学院第三附属医院 周立华 郭敬志;多角度解读半夏泻心汤[N];中国中医药报;2013年

8 河北省石家庄市和平医学门诊部 刘卫红;解读半夏泻心汤[N];中国中医药报;2013年

9 山东省荣成市斥山卫生院 王昭垣;半夏泻心汤治呃逆[N];中国中医药报;2012年

10 ;谈谈半夏泻心汤[N];中国中医药报;2012年

相关博士学位论文 前10条

1 徐萌;基于“肠道菌群—宿主”交互的助脾散精法对DGP大鼠胰岛损伤修复影响的研究[D];成都中医药大学;2018年

2 孙晔;基于酶联免疫分析技术解析半夏泻心汤及葛根芩连汤不同配伍的药代动力学特征[D];北京中医药大学;2015年

3 李凯;辛开苦降法及半夏泻心汤治疗结肠癌的临床和基础研究[D];中国中医科学院;2015年

4 赖彦桦;半夏泻心汤治疗Hp相关性慢性胃炎的临床观察及实验研究[D];广州中医药大学;2016年

5 童荣生;半夏泻心汤配伍原理研究[D];成都中医药大学;2010年

6 王江;基于半夏泻心汤及其拆方治疗胃溃疡的实验研究探讨寒热并用配伍规律[D];成都中医药大学;2013年

7 陈萌;半夏泻心汤调节胃电节律的拆方研究[D];北京中医药大学;2003年

8 姜惟;半夏泻心汤治疗幽门螺杆菌相关性胃炎脾虚湿热证的研究[D];南京中医药大学;2001年

9 何瑛琨;基于脑能量代谢研究半夏泻心汤的神经保护作用[D];北京中医药大学;2016年

10 廖礼国(Liew LayKok);半夏泻心汤加味方配合针灸治疗寒热错杂型胃食管反流病的临床研究[D];南京中医药大学;2015年

相关硕士学位论文 前10条

1 杨金蓉;半夏泻心汤对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗和IL-6、TNF-a、FFA、NO表达的影响研究[D];成都中医药大学;2017年

2 陈株生;仲景止呕方干预化疗性恶心呕吐研究[D];成都中医药大学;2017年

3 黄鹏;半夏泻心汤联合膈肌生物反馈训练治寒热错杂型GERD临床疗效观察[D];广州中医药大学;2017年

4 薛珂;半夏泻心汤古今运用考探[D];北京中医药大学;2010年

5 王丹;半夏泻心汤“辛开苦降”调节胃动力的研究[D];北京中医药大学;2004年

6 王光铭;加减半夏泻心汤治疗慢性萎缩性胃炎脾胃湿热证的临床研究[D];南京中医药大学;2012年

7 陆婷婷;半夏泻心汤活性成分对实验性胃溃疡粘膜下修复机制研究[D];暨南大学;2009年

8 谭全肖;半夏泻心汤治疗慢性胃炎临床观察回顾研究[D];广西中医药大学;2017年

9 金中义;半夏泻心汤加味治疗腹型过敏性紫癜的临床观察[D];黑龙江中医药大学;2009年

10 刘德才;四逆散半夏泻心汤合方治疗慢性浅表性胃炎的理论探讨和临床疗效观察[D];北京中医药大学;2002年

本文编号：2628178