唐古特大黄蒽醌提取工艺、水提部位化学成分离及抑菌活性的研究

发布时间：2020-04-19 00:31

【摘要】：唐古特大黄(Rheu tamnguticm Maxim Ex Balf)是蓼科(Polygonaceae)大黄属(Rheum)多年生草本植物,主要分布于我国青海、甘肃、四川北部等地,是我国传统常用的大宗中药材之一。药理研究表明大黄不但具有泻热通肠、凉血解毒,而且具有泻下、抗炎、降血压、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、降脂、减肥、改善胰岛素抵抗等功能。(1)采用响应面法对大黄蒽醌提取条件进行优化,确定大黄游离蒽醌最适宜的提取工艺条件,最适宜的提取条件为:乙醇浓度70%,提取时间79 min、提取温度79℃、料液比1:12(g/mL)。大黄游离蒽醌得率为0.09%。(2)再采用柱层析法,从唐古特大黄水提部位分离出9种化合物分别为:大黄酸-8-O-β-D吡喃葡萄糖苷(Ⅰ),大黄素-8-O-β-D吡喃葡萄糖苷(Ⅱ),大黄素-1-O-β-D吡喃葡萄糖苷(Ⅲ),芦荟大黄素(Ⅳ),大黄酸(Ⅴ),儿茶素(Ⅵ),大黄素(Ⅶ),大黄素甲醚(Ⅷ),大黄酚(Ⅸ)。(3)本文选取唐古特大黄水提部位的4种单体化合物(大黄酸-8-O-β-D吡喃葡萄糖苷、大黄素-8-O-β-D吡喃葡萄糖苷、大黄素-1-O-β-D吡喃葡萄糖苷、大黄酸)对10种胆囊炎致病菌抑菌作用研究,结果表明:化合物Ⅰ对胆囊炎10种致病菌与阴性对照组比较抑菌效果极显著(P0.01),与阳性对照组比较化合物Ⅰ对金黄色葡萄球菌和屎肠杆菌抑菌效果不显著(P0.05)对其他菌抑菌效果均极显著,尤其对阴沟肠杆菌阴沟亚种抑菌作用较强,对肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种抑菌作用较弱。化合物Ⅱ对10中胆囊炎致病菌与阴性对照组比较抑菌效果极显著(P0.01),与阳性对照组比较抑菌效果也极显著(P0.01),尤其对金黄色葡萄球菌抑菌作用较强,肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种抑菌作用较弱。化合物Ⅲ对10种胆囊炎致病菌与阴性对照组比较抑菌效果极显著(P0.01)、与阳性对照组比较,对阴沟肠杆菌阴沟亚种抑菌效果显著(P0.05)对其他菌抑菌效果极显著,尤其对金黄色葡萄球菌抑菌作用较强,对肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种抑菌作用较弱。化合物Ⅴ对10种胆囊炎致病菌与阴性对照组比较抑菌效果极显著(P0.01),与阳性对照组比较抑菌效果也极显著(P0.01),尤其对金黄色葡萄球菌抑菌作用较强,对屎肠球菌抑菌作用较弱。对于金黄色葡萄球菌而言,化合物Ⅴ对其抑菌作用较强;对粪链球菌而言,化合物Ⅰ对其抑菌作用较强;对于大肠杆菌而言,化合物Ⅲ对其抑菌作用较强;对于肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种而言,化合物Ⅴ对其抑菌作用较强;对于产气肠杆菌而言,化合物Ⅱ对其抑菌作用较强;对于阴沟肠杆菌阴沟亚种而言,化合物Ⅴ对其抑菌作用较强;对于变形杆菌而言,化合物Ⅴ对其抑菌作用较强;对于产酸克雷伯氏菌而言,化合物Ⅰ对其抑菌作用较强;对于铜绿假单胞菌,化合物Ⅴ对其抑菌作用较强;对于屎肠球菌而言,化合物Ⅲ对其抑菌作用较强。
【图文】：

光谱图,芦荟大黄素,大黄素甲醚,大黄酸

图 2-6 样品 HPLC 图谱 a 大黄酸、b 大黄素、c 大黄酚 d 芦荟大黄素 e 大黄素甲醚Fig2-6 the sample of Rhein、emodin、Chrysophano 、aloeemodin、physcion ，HPLC atlas用高效液相测定大黄素、大黄酸、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚的含量分别为 0.065 mg/g、0.095 mg/g、0.082 mg/g、0.063mg/g、0.028mg/g。由紫外二极管矩阵检测器可得游离蒽醌的光谱图（图 2-1、图 2-2、图 2-3、图 2-4、图 2-5）。由表 2-2 中试验结果可以看出，仪器的稳定性和精密度良好，大黄酸、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚的回收率分别为 97.2%、93.4%、99.3%、93.7%、95.2%，表明试验所选的测定方法准确度较高，这一方法稳定可行，可以用于蒽醌类物质的测定。2.3 单因素实验2.3.1 提取次数的选择称取大黄粉末 25.00 g，提取温度 80℃，料液比 1:12，乙醇浓度 80%，提取

蒽醌,大黄粉,蒽醌类,提取溶剂

图 2-7 提取次数对蒽醌得率的影响Fig2-7 Effect of the ratio times on extraction.2 乙醇浓度的选择称取大黄粉末 25.00g，，提取温度 80 ℃，料液比 1：12，乙醇浓度（5、70%、80%、90%）热回流提取 2 次，每次 1 h，以乙醇浓度为横坐标率为纵坐标制图（图 2-8），由图 2-8 可以看出乙醇浓度在 70%时蒽醌高于 50%和 60%，而 70%以后蒽醌得率呈下降趋势。因为蒽醌类化合基，用乙醇水溶液作为提取溶剂，水的存在有利于分子间氢键的形成，的存在能够促使氢键断裂。实验结果表明，乙醇浓度为 70%时，蒽醌得
【学位授予单位】：青海师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R284

【参考文献】