补阳还五汤对急性脊髓损伤大鼠Reg-2、mTOR、Olig-2蛋白表达的影响

发布时间：2020-04-19 18:28

【摘要】：目的:研究补阳还五汤(Buyanghuanwu Decoction,BYHWD)对急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠运动功能以及再生基因蛋白-2(regenerating gene protein-2,Reg-2)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(the mammalian target of rapamycin,mTOR)、少突胶质细胞转录因子-2(oligodendrocyte transcription factor-2,Olig-2)表达的影响,并与甲基强的松龙(Methylprednisolone,MP)进行对照,探讨补阳还五汤干预脊髓损伤的作用机制。方法:将24只大鼠随机分为正常组(CONTROL)、损伤组(SCI)、补阳还五汤组(BYHWD)和甲基强的松龙组(MP)4组,每组各6只。采用Allen’s法建立大鼠SCI模型,造模成功后1、3、5、7d采用BBB运动功能评分法(Basso Beattie Bresnahan Iocomotor rating scale)和斜板实验(Inclined plane test)评估大鼠运动功能恢复效果。正常组(CONTROL)不作处理,等量生理盐水灌胃7d;损伤组(SCI)脊髓损伤后常规饲养7d;补阳还五汤组(BYHWD)脊髓损伤后BYHWD(15g/kg·d)灌胃治疗7d;甲基强的松龙组(MP)脊髓损伤后MP(30mg/kg·d)腹腔注射7d。术后7d深度麻醉处死动物,取损伤节段脊髓组织约1.0cm,进行HE染色,并采用免疫组化、免疫荧光和Western-blot法检测大鼠脊髓组织Reg-2、mTOR、Olig-2蛋白表达变化。结果:1.SCI组BBB运动功能评分和斜板功能评分显著下降;给药1、3d后,BYHWD组和MP组BBB运动功能评分和斜板功能评分与SCI组相比无差别(P0.05);给药5d后,BYHWD组和MP组BBB运动功能评分和斜板功能评分与SCI组相比恢复效果更好,差异有统计学意义(P0.05),BYHWD组和MP组无差异(P0.05);给药7d后,BYHWD组和MP组BBB运动功能评分和斜板功能评分与SCI组相比恢复效果明显更好,差异有统计学意义(P0.01),BYHWD组和MP组无差异(P0.05)。2.HE染色结果表明,SCI组损伤节段脊髓组织结构紊乱,瘢痕形成,部分神经元结构模糊,炎性细胞浸润。给药7d后,BYHWD组和MP组脊髓组织纤维排列有一定的方向性,神经胶质细胞增殖,炎性细胞浸润减少。3.与CONTROL组比较,SCI组脊髓组织中Reg-2和mTOR蛋白表达升高(P0.05)。给药7d后,与SCI组比较,BYHWD组和MP组脊髓组织中Reg-2和Olig-2蛋白表达均升高(P0.05),mTOR蛋白表达降低(P0.05);与MP组比较BYHWD组脊髓组织中mTOR蛋白表达更低(P0.05)。结论:1.补阳还五汤可以改善脊髓损伤大鼠的运动能力,其效果与糖皮质激素甲基强的松龙相当;2.补阳还五汤可以减少脊髓损伤大鼠神经元细胞凋亡,促进神经胶质细胞增殖,抑制炎性细胞浸润;3.补阳还五汤可以升高脊髓损伤大鼠脊髓组织中Reg-2和Olig-2蛋白的表达,抑制mTOR蛋白的表达;4.补阳还五汤对脊髓损伤的治疗作用,可能与升高脊髓组织中Reg-2和Olig-2蛋白以及抑制mTOR蛋白表达有关,促进神经胶质细胞分裂增殖活性,减轻炎症反应,进而发挥保护神经元的作用。
【图文】：

脊髓损伤,运动能力,大鼠,给药

鼠 SCI 模型造模后，SCI 组、BYHWD 组和 MP 组大鼠均未出现死。在脊髓损伤前及损伤后 2h 和 1，3，5，7d 分别对各组大鼠进行力评分（图 1），以评估大鼠后肢运动功能恢复情况。常组大鼠运动功能正常，BBB 评分为 21 分。脊髓损伤前，各组大部正常。脊髓损伤后 2h，各组大鼠的 BBB 评分在 0-2 分之间，说损伤程度较一致，实验误差小。脊髓损伤后 1d 和 3d，SCI 组、P 组的 BBB 评分差异无统计学意义（P＞0.05）。经过给药 5d 后BB 评分 3.833±0.983 相比，BYHWD 组的 BBB 评分 6±1.265 和评分 6±1.414 明显更高（P<0.05），BYHWD 组和 MP 组的 BBB计学意义（P＞0.05）。给药 7d 后，与 SCI 组的 BBB 评分 5.833YHWD 组的 BBB 评分 8.833±2.639 显著提高（P<0.01），MP 组5±2.168 也更高（P<0.05），BYHWD 组和 MP 组的 BBB 评分差意义（P＞0.05）。

脊髓损伤,功能评分,斜板,大鼠

YHWD 对脊髓损伤大鼠斜板功能评分的影响。 x±s，n=6.与 SCI 模型*P<0.05，**P<0.01。WD 对脊髓损伤大鼠脊髓组织形态学的影响（图 3）显示，正常组大鼠 L12-L1 段脊髓组织结构正常，纤具有一定的连续性，无出血现象，无瘢痕组织形成。SCI 组损
【学位授予单位】：山西中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【参考文献】