黄芩苷—白及胶—钛酸银复合多孔材料的制备及其对烧伤创面愈合作用的初步研究

发布时间：2020-04-29 13:09

【摘要】：研究背景:烧伤是日常生活中常见损伤,而在战时烧伤的发生率亦不断增加。因此,对烧伤治疗的研究具有重要的社会和军事意义。烧伤创面治疗的关键在于抗感染和促进愈合。中医对于烧伤的认识有着悠久的历史和丰富的治疗经验,在缓解创面疼痛、抗感染、促进创面愈合、减少瘢痕形成及增强免疫调理等方面,中药展示出良好的治疗作用。但传统的中药煎汤外洗或膏散外敷,已经不能适应现代临床及战场环境的应用需求。因此,构建一种传统中药与现代制剂技术相结合的、兼具抗感染和促进创面组织再生双重效应的新型烧伤创面治疗材料具有重要意义。研究目的:选用临床常用于烧伤治疗的中药黄芩和白及中的主要有效成分黄芩苷、白及胶,制备和筛选具有抑菌作用的钛酸纳米银材料,使用水溶性高分子成膜材料羧甲基壳聚糖为载体,构建一种兼具抗感染和促进创面修复双重作用的具有多孔海绵状结构的新型烧伤创面治疗材料。并进行初步的药效学研究,为其用于烧伤创面临床治疗奠定实验基础。研究方法:1.分别以不同比例的白及胶与羧甲基壳聚糖制备海绵状结构的烧伤创面治疗材料,通过观察质地、弹性、柔韧性、多孔结构等情况,确认最优比例。使用纸片扩散法抑菌实验筛选对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌有最强抑菌能力的黄芩苷浓度和钛酸银种类。冷冻干燥法制备包含黄芩苷、白及胶、钛酸银的新型烧伤创面多孔材料,用扫描电镜观察微观结构,并测定其孔隙率、吸水率、透气率等物理性质。皮肤刺激性实验进行安全性评价。2.纸片扩散法抑菌实验验证该多孔材料的抑菌性能。利用自制铜质烙铁制作SD大鼠深Ⅱ度烧伤模型,使用自身随机对照方法,将创面分为黄芩苷-白及胶-钛酸银复合多孔材料(BBSPM)组、黄芩苷-白及胶复合多孔材料(BBPM)组、磺胺嘧啶银(SSD)组及生理盐水(NS)组,通过观察创面愈合率、创面愈合时间、IL-1β、VEGF等指标并做组织切片观察组织学改变,研究黄芩苷-白及胶-钛酸银复合多孔材料对于烧伤创面愈合的影响。结果:1.白及胶与羧甲基壳聚糖最佳的配比为5%白及胶胶液:4%羧甲基壳聚糖胶液=1:3。黄芩苷对金黄色葡萄球菌有良好的抑菌性能,最低有效抑菌浓度为20mg/mL。100mg/mL的钛酸纳米银悬液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌都有良好的抑菌性。冷冻干燥法制备的黄芩苷-白及胶-钛酸银复合多孔材料,海绵状多孔结构明显,孔隙分布致密均匀,相互交联贯通,钛酸银颗粒在其表面及孔隙中均匀分布。平均孔隙率90.43%,平均吸水率为746%,平均透气率为66.67%,体现出多孔材料的诸多优良性质。BBSPM无皮肤刺激性。2.体外抑菌实验证明黄芩苷-白及胶-钛酸银复合多孔材料对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌都有良好的抑菌性。用药后3天、7天,BBSPM组、BBPM组的愈合率均明显优于同时间点NS组和SSD组(P0.05)。组织学观察示:BBSPM组、BBPM组于干预3天后即开始出现损伤皮肤结痂剥脱,先于NS组及SSD组。创面愈合质量上,BBSPM组、BBPM组、SSD组表皮修复完整,并可见小血管增生,而NS组创面凹凸不平,胶原纤维增生明显,并有溃疡出现。干预1天、3天时,BBSPM组IL-1β浓度明显低于其它三组(P0.05)。干预3天时,BBPM组、BBSPM组VEGF含量明显高于对照组(P0.05)。干预7天时,SSD组和BBPM组VEGF含量明显高于NS组和BBSPM组(P0.05)。BBSPM组VEGF的峰值在干预后3天出现,其余三组在干预后7天才达到高峰,而NS组VEGF含量随时间关系的波动不明显。表明黄芩苷-白及胶-钛酸银复合多孔材料在烧伤早期可以减轻炎症反应,控制感染,促进创面愈合。结论:黄芩苷-白及胶-钛酸银复合多孔材料是一种兼具抗感染和促进创面修复功效的新型烧伤外用治疗材料。其海绵状多孔结构具有良好的吸湿性和透气性,具有良好的应用价值。
【图文】：

白及胶,皮肤,黄芩苷,大鼠

图 1-1 新西兰兔皮肤刺激性试验2、大鼠皮肤刺激性试验SD 大鼠 20 只，雌雄各半，体质量 180±20g，由长海医院动物实验中心提供物使用许可证：SYXK（沪）2015-0017。将大鼠随机分为 2 组，每组 10 只，分别为破损皮肤组和正常皮肤组。用脱鼠背部脱毛 24h 后，破损皮肤组用无菌针头于脱毛区划“#”字（只损伤角及皮下组织），以表皮渗血为度。以黄芩苷-白及胶-钛酸银复合多孔材料贴肤，用无菌纱布覆盖固定。正常皮肤组大鼠以黄芩苷-白及胶-钛酸银复合多敷皮肤，用无菌纱布覆盖固定。于 1h、24h、48h、72h 四个时间点，对皮肤进行观察，有无红斑、水肿等皮肤刺激征象。

白及胶,黄芩苷,正常皮肤,皮肤

图 1-1 新西兰兔皮肤刺激性试验鼠皮肤刺激性试验鼠 20 只，雌雄各半，体质量 180±20g，由长海医院动物实验中许可证：SYXK（沪）2015-0017。随机分为 2 组，每组 10 只，分别为破损皮肤组和正常皮肤组脱毛 24h 后，，破损皮肤组用无菌针头于脱毛区划“#”字（只组织），以表皮渗血为度。以黄芩苷-白及胶-钛酸银复合多孔无菌纱布覆盖固定。正常皮肤组大鼠以黄芩苷-白及胶-钛酸银，用无菌纱布覆盖固定。于 1h、24h、48h、72h 四个时间点，察，有无红斑、水肿等皮肤刺激征象。
【学位授予单位】：中国人民解放军海军军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R283.6;R285

【参考文献】