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白籽仁粗多糖的提取优化及其免疫活性研究

发布时间:2020-05-10 08:31
【摘要】:白籽仁是皂荚的内胚乳,主要产地为云南腾冲,白籽仁有着很高的营养价值,具有养心通脉,清肝明目,健脾滋肾,祛痰开窍等功效,是调和人体脏腑功能的珍贵纯天然绿色滋补食品。目前对白籽仁中的一些营养成分的开发利用还不是很深入,有待进一步的研究。本课题利用单因素和响应面的方法优化白籽仁粗多糖的最佳提取工艺,并以小鼠为实验动物模型对白籽仁粗多糖的免疫活性进行评价,为白籽仁产品的开发提供基础理论依据。通过单因素实验考察温度、时间、液料比对白籽仁复水的影响,确定复水条件为:温度80℃、时间75 min、液料比40mL/g。通过单因素实验考察各影响参数的合理范围,利用响应面实验筛选最终得到白籽仁粗多糖的最佳提取条件为:提取温度93 ℃、提取时间1.7 h,提取液料比180 mL/g,提取次数为2次,以该优化条件提取白籽仁中粗多糖的提取得率为57.54%,经真空旋转蒸发溶剂,浓缩到原来体积的1/2,加入2.8倍体积的95%的乙醇并迅速搅拌,4℃静置过夜,4500r/min离心20min后,60℃烘干,得到粗多糖含量为86.88%。选用小鼠为实验动物模型研究白籽仁粗多糖的免疫活性。通过给环磷酰胺造模的免疫低下小鼠灌胃不同剂量的白籽仁粗多糖,低、中、高剂量组分别灌胃50、100、150mg/(Kg·bw)的白籽仁粗多糖,正常对照组灌胃等量的蒸馏水,阳性对照组灌胃黄芪精口服液。两周后,测定小鼠的体重、脏器指数、自然杀伤细胞(NK细胞)杀伤活性、淋巴细胞增殖能力和巨噬细胞吞噬能力。结果表明,与模型对照组相比,白籽仁粗多糖能够显著提高免疫低下小鼠的体重和脏器指数,对小鼠NK细胞的杀伤活性和淋巴细胞增殖能力有极显著的恢复作用,且呈一定的剂量依赖性,对腹腔巨噬细胞吞噬能力有一定的提高作用;对肝脏和血清中GSH-PX、SOD、CAT、AKP等酶的活性有不同程度的提高作用;通过RT-PCR的方法,发现白籽仁粗多糖对IL-2、IL-6、IFN-γ、Mcl-1以及Bcl-xL等与免疫相关的基因的表达具有增加的趋势。因此,白籽仁粗多糖可改善环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫功能。
【图文】:

标准曲线,甘露糖,标准曲线


3.1苯酚-硫酸法甘露糖标准曲线的绘制逡逑采用苯酚-硫酸法测定粗多糖提取液中总糖含量,得回归方程为y=0.0128X-0.0002,逡逑R2=0.9992,,根据苯酸-硫酸法测定的甘露糖标准曲线如图3-1所示的N归方程可以计逡逑算出提取液中总糖含量。逡逑0.6逡逑y邋=邋0.0128x-0.0002逡逑0.5邋-逦R2邋=邋0.9992逡逑0.4邋-逡逑O嗗澹埃冲澹危掊义希埃卞澹澹掊义希ǎ╁澹慑濉觥鲥危慑危慑危慑危慑危慑义希板危保板危玻板危常板危矗板危担板义吓ǘ龋欤椋纾恚獭卞义贤迹常备事短潜曜记咤义希疲椋纾澹常卞澹裕瑁邋澹螅簦幔睿洌幔颍溴澹悖酰颍觯邋澹铮驽澹恚幔睿睿铮螅邋义希常插澹模危臃ǜ事短潜曜记叩幕嬷棋义喜捎茫模危臃ú舛ù侄嗵翘崛∪芤哄乖菍浚秘⒐谭匠涛截矗敦埃埃保罚常义希遥玻剑埃梗梗福罚荩模危臃ú舛ǖ母事短潜曜记呷缤迹常菜镜幕毓榉匠炭梢约扑愠鲥义咸崛∫夯乖呛俊e义希卞澹у义希ǎ瑰澹危澹澹桑保矗叮眨埃埃保罚冲义希耄澹澹埃梗梗福峰义希埃峰澹义希垮

本文编号:2657035

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