何首乌有效成分对大鼠骨癌痛的镇痛效果

发布时间：2020-05-11 08:53

【摘要】：现代研究中,何首乌的多种化学成分具有降血脂、抗动脉粥样硬化、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤等作用。何首乌中的2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷具有抗炎镇痛的作用,可能与抑制局部炎症介质如前列腺素和5-羟色胺的释放、直接抑制PGE2和COX-2合成有关。骨癌痛是一种典型的癌痛,以爆发痛(Breakthrough)、持续性背景痛(Onging pain)、痛觉超敏(Allodynia)和痛觉过敏(Hyperalgesia)为主要临床表现。临床上阿片类药物仍然是主要镇痛药,但长时间使用会引起细胞表面阿片受体减少,同时也会产生的严重不良反应如呼吸抑制、恶心呕吐等。目的为了探讨中药何首乌有效成分是否有镇痛作用、镇痛效果如何等问题,通过建立大鼠胫骨骨癌痛模型,从行为学、体重变化和大鼠机械痛阈等三方面改变来验证模型建立是否成功,选择成功的骨癌痛大鼠模型进行何首乌提取物二苯乙烯苷、大黄素和儿茶素灌胃实验,并与盐水灌胃作对照,观察何首乌提取物的镇痛效果。方法1.骨癌痛大鼠模型建立及评价36只雌性SD大鼠随机分成三组:A组为正常空白对照,6只;B组为大鼠建模注射无菌生理盐水,6只;C组为大鼠左后腿胫骨注射乳腺癌细胞(walker256)建立骨癌痛模型,共24只。大鼠机械痛阈(Paw Withdrawal Threshold,PWT)使用von-Frey纤维丝测量。在术前1天、术后第1天,术后第3、5、7、10、14天对所有大鼠进行左后腿痛阈测量,并同时观察大鼠行为学改变即行走有无跛脚、手术侧脚趾舔舐次数,记录大鼠体重变化,观察其进食情况并注意毛发颜色等情况的改变。在术后第14天测量结束后每组随机处死一只大鼠,取左后腿骨组织进行切片、HE染色,观察对比肿瘤细胞对骨组织的侵袭、破坏情况。2.观察中药何首乌不同成分灌胃对大鼠机械痛阈的影响在建模后的饲养过程中,由于C组出现8只大鼠死亡,故只选取余下的16只大鼠继续进行实验。C组16只大鼠按灌胃药物的不同随机分成C1、C2、C3、C4四组,每组4只。建模后第14、15、16天连续对C1～C4组大鼠分别灌胃生理盐水(2ml)、二苯乙烯苷(60mg/ml,2ml)、大黄素(60mg/ml,2ml)和儿茶素(60mg/ml,2ml);每次灌胃前、灌胃后0.5h、灌胃后1.0h测量大鼠左脚掌痛阈值。测量结束后对其行为学改变进行短暂的观测,观察手术侧脚趾舔舐次数、进食情况和毛发色泽。结果结果显示:(1)癌痛模型喂养自第5天起,与A、B两组比较,C组大鼠食欲减退、行为学出现明显改变,包括部分大鼠出现跛脚,舔舐撕咬手术侧大鼠情况增加,大鼠攻击性变强甚至部分大鼠出现死亡、机械痛阈值降低(P0.05);(2)第10天可见C组大鼠食欲明显减退,毛发变暗,体重维持不变甚至减轻少许,左后腿肿瘤明显可见,行走出现明显障碍;(3)第14天病理组织切片显示骨质明显破坏,癌细胞浸润严重,骨小梁等结构排列混乱;且A、B两组大鼠食欲正常、行为学未出现明显改变、机械痛阈值无明显差异及骨质结构正常(P0.05)。(4)骨癌痛大鼠后期将伴随严重的骨质破坏等现象,因此灌胃时机选择模型建立后第14天至16天进行干预。在连续三天灌胃实验中,C2二苯乙烯苷组大鼠各时点的机械性痛阈值均较C1灌胃生理盐水、C3大黄素、C4大黄素组明显增加(P0.05)。C2组大鼠模型灌胃0.5h和灌胃后1.0h后与灌胃前机械性痛阈值相比明显升高(P0.05),但灌胃0.5h和灌胃后1.0h后的机械性痛阈值无统计学意义,灌胃结束后,C2组食欲出现好转,但体重变化不明显。结论1.C组大鼠骨癌痛模型建立成功,机械痛阈、行为学、体重、食欲和外观与A、B两组大鼠出现明显不同;2.二苯乙烯苷灌胃可以有效提高骨癌痛大鼠痛阈,缓解疼痛,降低痛觉过敏,效果强于大黄素、儿茶素和生理盐水。综上所述,本研究提示:何首乌可有效降低大鼠的骨癌痛,其有效单体成分是二苯乙烯苷。
【图文】：

痛阈,大鼠,建模,肢体

C4图 1 ABC 三组大鼠病理切片Picture1 Pathological section of three groups ofABC rats阈的改变组大鼠从建模手术开始前 1d，，建模术后第建模术侧的肢体进行机械痛阈测量。结果显械痛阈差异均无明显统计学意义（均 P > 14d 机械痛阈较 A 组 B 组大鼠同期明显降 7d、10d 和 14d 机械痛阈差异无统计学意义A 组大鼠术后第 7d 机械痛阈较术后第 5d 明大鼠术后第 1d 机械痛阈较术前第 1d 明显大鼠术后第 7d 机械痛阈较术后第 5d 明显

痛阈,大鼠,时点,组间

roup 组间 X 时点的 P=0.091（F = 1.673），说明组间和时间点作用，说明时间因素的作用不随分组的不同而不同。表 2 每组大鼠机械痛阈的比较第 1d 术后第 1d 术后第 3d 术后第 5d 术后第 7d 术后第 10d 6.5 11.2±3.6 17.0±8.6 16.2±5.9 10.2±2.9 15.2±6.5 3.2 8.4±4.4 16.0±9.2 14.8±7.0 14.2±6.9 14.8±7.0 3.6 11.6±3.2 10.2±2.9 9.8±3.3 3.5±1.81234ab2.7±1.21234ab 1.078 1.217 1.795 7.367 8.175 0.371 0.330 0.208 0.008 0.006 =19.789，P组间< 0.001；F时点=2.129，P时点=0.060；F组间X时点=1.673，P组间X时点=0.0P < 0.05；b与 B 组比较，P < 0.05；1与术前第 1d 比较，P < 0.05；2与术后第 1d 后第 3d 比较，P < 0.05；4术后第 5d 比较，P < 0.05。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

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