【摘要】：目的1探讨坤泰胶囊对卵巢早衰大鼠卵巢组织脂肪酸合成酶(Fas)及凋亡相关因子配体(FasL)的作用机制;2探讨坤泰胶囊对卵巢早衰大鼠卵巢功能病理性损伤的修复作用及生殖功能的影响。方法将84只12周龄SD雌性大鼠随机分卵巢功能组和生殖功能组两个大组,分别观察卵巢功能和生殖功能,每个大组分为空白组、模型组、坤泰胶囊高、中、低剂量组及结合雌激素片组,每组各7只。除空白组正常(自由食水)喂养外,其余各组大鼠均用雷公藤多苷片灌胃法(75mg/kg,给药14天)建立大鼠卵巢早衰模型。造模结束后,模型组给予2mL/kg生理盐水灌胃;坤泰胶囊组及结合雌激素片组分别予坤泰胶囊高、中、低剂量(1.2g、0.6g、0.3g/kg,给药36天)及结合雌激素片(0.075mg/kg,给药36天)灌胃治疗。卵巢功能组观察所有大鼠的行为学改变、动情周期变化、酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清性激素卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E_2)、抗苗勒管激素(AMH)水平变化、光镜下观察大鼠卵巢组织形态学变化、免疫组化法及实时荧光定量PCR法检测大鼠卵巢脂肪酸合成酶(Fas)、凋亡相关因子配体(FasL)蛋白及基因含量。生殖功能组所有雌性大鼠与12只SD雄性大鼠进行合笼试验,观察记录孕鼠及子鼠的一般情况,观察各组雌性大鼠的产仔数、受孕率、妊娠率及子代小鼠畸形率。结果1对大鼠行为学的影响:空白组所有大鼠在整个实验过程中并未出现行为学异常表现;模型组大鼠造模期间可出现精神不振,活动减少,喜蜷缩,脱毛,弓背等表现;所有治疗组大鼠在造模期间均出现模型组大鼠的行为学表现,但经药物治疗后,坤泰胶囊高、中剂量组及结合雌激素片组大鼠行为学改变逐渐趋于正常;坤泰胶囊低剂量组大鼠治疗效果欠佳,表现为精神欠佳,脱毛及弓背稍有好转等。2空白组大鼠在整个实验过程中均可出现规律的动情周期,约为4~5天;模型组大鼠的动情周期延长,为6~8天;与空白组结合雌激素片组相比,模型组和坤泰胶囊低剂量组大鼠动情周期出现延长或紊乱,紊乱率分别为100%和85.71%,动情周期差异均具有统计学意义(P0.05)。3对大鼠血清激素水平的影响:与空白组和结合雌激素片组相比,坤泰胶囊低剂量组大鼠血清FSH、LH、E_2、AMH浓度差异均具有统计学意义(P0.05);与模型组相比,其余各组大鼠血清FSH、LH、E_2、AMH浓度差异具有统计学意义(P0.05)。4对大鼠卵巢组织形态学的影响:空白组大鼠镜下可见各级卵泡均比较活跃、丰富,卵泡发育良好,卵泡结构清晰,还可见到丰富的血管;模型组大鼠卵泡发育较差,卵泡结构紊乱,可见闭锁卵泡及病理性纤维化增生;与空白组和结合雌激素片组相比,坤泰胶囊低剂量组大鼠卵泡发育欠佳,卵泡结构欠清晰;与模型组相比,其余各组大鼠可见卵泡发育较好,卵泡结构较清晰,闭锁卵泡数量较少。5对大鼠卵巢Fas、FasL蛋白及基因表达影响:与空白组和结合雌激素片相比,坤泰胶囊低剂量组大鼠卵巢Fas蛋白及基因表达均明显降低,FasL蛋白及基因表达均明显升高,差异具有统计学意义(P0.05);与模型组相比,其余各组大鼠卵巢Fas蛋白及基因表达均明显升高,FasL蛋白及基因表达均明显降低(P0.05)。6对孕鼠及子鼠的一般情况的影响:本试验除模型组大鼠未受孕外,其余各组大鼠均为受孕鼠。空白组孕鼠各方面机能良好;坤泰胶囊低剂量组孕鼠精神欠佳,活动稍显迟缓,摄食量增长稍慢,于孕0天显著低于空白组和结合雌激素片组,差异具有统计学意义(P0.05),体质量增长稍慢,于孕6天起显著低于空白组和结合雌激素片组,差异具有统计学意义(P0.05),子鼠体肤红润有光泽,生长快,发育正常。7对雌鼠生殖功能情况的影响:本试验除模型组大鼠未受孕外,其余各组大鼠均为受孕鼠。与空白组和结合雌激素片组比较,坤泰胶囊低剂量组大鼠产仔总数、受孕率、妊娠率均较低,差异具有统计学意义(P0.05);与模型组比较,除坤泰胶囊低剂量组大鼠外,其余各组大鼠的产仔总数均较多,受孕率及妊娠率均较高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论1用雷公藤多苷片(75mg/kg,14天)灌胃雌性大鼠,能使大鼠出现异常的行为学改变,动情周期延长或紊乱,血清性激素水平严重紊乱,卵巢组织形态学异常,提示卵巢早衰大鼠造模成功。实验研究证实雷公藤多苷片可抑制雌性大鼠的卵巢功能和生殖功能,使大鼠卵巢功能和生殖功能均受到不同程度损伤。2坤泰胶囊可修复育龄期大鼠卵巢功能病理性损伤,保护和改善卵巢功能,机制可能与坤泰胶囊调节大鼠血清性激素水平,对激素水平有双向调节作用,下调FSH、LH水平,上调E_2、AMH水平,使Fas蛋白及基因表达升高,FasL蛋白及基因表达降低有关。此外坤泰胶囊亦可改善大鼠的生殖功能,提高卵巢早衰大鼠的受孕率及妊娠率,对子代小鼠无明显致畸性。3坤泰胶囊高、中剂量组与结合雌激素片组治疗效果相似,具有等效性,坤泰胶囊低剂量组治疗效果欠佳,可能与低剂量组坤泰胶囊用药剂量少,浓度低有关。图28幅;表10个;参84篇。
【图文】：
动情后期 动情间期图 1 大鼠动情周期阴道涂片 HE 染色（HE 染色×100）Fig.1 HE staining in the vaginal smear of female rats（HE staining×100）表 3 所示，空白组大鼠在整个实验过程中均可出现规律的动情周期，；模型组大鼠的动情周期延长，为 6~8 天，所有大鼠动情周期均出现紊组大鼠动情周期稍有延长，坤泰胶囊低剂量组的大鼠动情周期为 6~7囊中剂量组的大鼠动情周期为 5~7 天；坤泰胶囊高剂量组大鼠动情周；结合雌激素片组大鼠动情周期为 4~5 天。空白组相比，模型组和坤泰胶囊低剂量组大鼠动情周期出现延长或紊乱别为 100%和 85.71%，动情周期差异均具有统计学意义(P<0.05)；泰胶囊高、中剂量组和结合雌激素片组大鼠的紊乱率分别为 28.5和 14.29%，与空白组相比，动情周期差异均无统计学意义(P>0.05)；结合雌激素片组相比，模型组和坤泰胶囊低剂量组大鼠动情周期差异均意义(P<0.05)，坤泰胶囊高、中剂量组大鼠动情周期差异均无统计学
体积较小并稍有萎缩，卵泡结构欠清晰；坤泰胶囊高、中剂量组和结合雌激素片组大鼠卵泡发育、卵泡结构等无显著性差异；与模型组相比，其余各组大鼠可见卵泡发育较好，卵泡数量较多，体积稍大，卵泡结构较清晰，闭锁卵泡数量较少；与结合雌激素片组相比，，坤泰胶囊低剂量组大鼠卵泡发育欠佳，卵泡结构欠清晰；坤泰胶囊高、中剂量组大鼠卵巢发育、卵泡结构等未见明显差异。空白组 模型组 坤泰胶囊高剂量组坤泰胶囊中剂量组 坤泰胶囊低剂量组 结合雌激素片组
【学位授予单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5
【参考文献】
相关期刊论文 前10条
1 钟瑞华;周娴颖;谢淑武;李国停;马阿影;李钊;桂幼伦;朱健平;朱焰;;坤泰胶囊对大鼠实验性子宫异位内膜生长及其妊娠结局的影响[J];生殖与避孕;2015年08期
2 吴翠杰;;坤泰胶囊对排卵障碍性不孕症患者卵泡发育、子宫内膜及排卵的影响[J];中国实用医药;2015年18期
3 程喜建;;耳穴位贴服配合双柏散热敷治疗22例腹腔镜卵巢囊肿剥除术后卵巢早衰的临床研究[J];中国医学创新;2015年18期
4 王影;薛霁;;卵巢早衰的中西医研究进展[J];中国妇幼保健;2015年17期
5 朱玲;罗颂平;;卵巢早衰病因病机再认识[J];新中医;2015年04期
6 罗晶婧;李花;刘丹卓;;电针配合补肾活血方治疗肾虚血瘀型卵巢早衰30例临床观察[J];中医药导报;2015年06期
7 陈建玲;;坤泰胶囊联合雌孕激素周期疗法治疗卵巢功能低下71例疗效观察[J];中国实用医药;2015年08期
8 张建芝;赵少敏;杨欢;李英娟;王增霞;;坤泰胶囊对PCOS不孕症患者应用克罗米芬促排卵子宫内膜的影响[J];河北医药;2014年24期
9 李茜西;吕德欣;;卵巢早衰的病因及治疗研究进展[J];中国医药导报;2014年30期
10 王艳萍;齐力;田娜娜;;中药保留灌肠治疗卵巢早衰的临床研究[J];世界中西医结合杂志;2014年07期
相关博士学位论文 前1条
1 唐怡;中药坤泰胶囊防治女性更年期综合征的药效物质基础及部分作用机理研究[D];成都中医药大学;2003年
相关硕士学位论文 前1条
1 刘梅云;坤泰胶囊治疗卵巢储备功能下降及卵巢早衰的临床研究[D];河北大学;2014年
本文编号：
2660495
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/2660495.html
