【摘要】：目的:观察蛇床子催眠活性组分(SCZ)对对氯苯丙氨酸(PCPA)失眠大鼠海马、脑干、下丘脑等不同部位氨基酸类神经递质的变化,进而通过其对PCPA失眠大鼠海马神经递质受体、生物钟基因表达的影响,探讨SCZ催眠作用机制。方法:采用腹腔注射PCPA 450mg/kg每天1次,连续2天,建立大鼠PCPA失眠模型,设立SCZ低(25mg/kg)、中(50mg/kg)、高(100mg/kg)剂量组,并设地西泮阳性对照组(1.5mg/kg),灌胃给予PCPA失眠大鼠(10ml/kg)连续3天,采用超高效液相色谱-荧光法检测海马、脑干、下丘脑γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸(GLY)和谷氨酸(GLU)、天冬氨酸(ASP)等氨基酸类神经递质含量的变化;免疫组织化学法检测大鼠海马齿状回GABA和GLU受体蛋白的表达;实时荧光定量PCR检测失眠大鼠海马Clock、Bmal1、Cry1、Cry2、Per1、Per2、Per3等钟基因的表达水平。分析SCZ对PCPA失眠大鼠海马生物钟基因与神经递质含量变化的关系。结果:1.SCZ对PCPA失眠大鼠海马、脑干、下丘脑不同脑区氨基酸类神经递质的影响(1)海马GLU含量模型对照组显著高于空白对照组(P0.01),地西泮阳性对照组、SCZ高、中剂量组显著低于模型对照组(P0.01、P0.05);ASP含量各给药组较模型对照组有降低趋势,但无显著差异;GABA、GLY含量模型对照组均显著低于空白对照组(P0.01),地西泮阳性对照组显著高于模型对照组(P0.01、P0.001),SCZ高剂量组显著高于模型对照组(P0.05)。表明SCZ能明显增加PCPA失眠大鼠海马抑制性神经递质GABA、GLY含量,降低GLU的含量。(2)脑干GLU、ASP含量模型对照组显著高于空白对照组(P0.05、P0.01),SCZ高、中剂量组GLU含量显著低于模型对照组(P0.01),地西泮阳性对照组ASP含量显著低于模型对照组(P0.01),SCZ高、中剂量组ASP含量显著低于模型对照组(P0.01、P0.05);GABA、GLY含量模型对照组显著低于空白对照组(P0.05),地西泮阳性对照组显著高于模型对照组(P0.01、P0.05),SCZ高、低剂量组GABA含量显著高于模型对照组(P0.01、P0.05),SCZ高、中剂量组GLY含量显著高于模型对照组(P0.05)。表明SCZ能明显增加PCPA失眠大鼠脑干GABA、GLY的含量,降低GLU、ASP含量。(3)下丘脑GLU、ASP含量模型对照组显著高于空白对照组(P0.01),地西泮阳性对照组显著低于模型对照组(P0.001、P0.01),SCZ高、中剂量组GLU含量显著低于模型对照组(P0.01、P0.05),SCZ高、中剂量组ASP含量显著低于模型对照组(P0.01、P0.001);GABA、GLY含量模型对照组显著低于空白对照组(P0.05),地西泮阳性对照组GABA、GLY含量显著高于模型对照组(P0.001、P0.01),SCZ高、中剂量组GABA含量显著高于模型对照组(P0.01),SCZ高剂量组GLY含量显著高于模型对照组(P0.001)。表明SCZ能明显增加PCPA失眠大鼠下丘脑GABA、GLY的含量,降低GLU、ASP含量。(4)海马GABA含量显著高于脑干(P0.01),海马GLU含量显著高于脑干、下丘脑(P0.001、P0.01),下丘脑ASP、GLY含量显著高于海马、脑干(P0.01),表明GABA、GLU含量在海马分布广泛。2.SCZ对PCPA失眠大鼠海马齿状回GABA和GLU受体蛋白表达的影响海马齿状回GLU免疫组化平均光密度模型对照组显著高于空白对照组(P0.01),各给药组显著低于模型对照组(P0.01),海马齿状回GABA免疫组化平均光密度模型对照组显著低于空白对照组(P0.05),地西泮阳性对照组GABA含量显著高于模型对照组(P0.01),各给药组显著高于模型对照组(P0.01)。说明SCZ能明显增加GABA受体表达量,降低GLU受体表达量。3.SCZ对PCPA失眠大鼠海马生物钟基因表达的影响海马Clock、Bmal1基因表达量模型对照组显著高于空白对照组(P0.05),地西泮阳性对照组Clock基因表达量显著低于模型对照组(P0.05),SCZ中剂量组Clock、Bmal1基因量表达均显著低于模型对照组(P0.01);Cry1、Per1、Per2、Per3基因量表达模型对照组显著低于空白对照组(P0.05、P0.01、P0.05、P0.05),地西泮阳性对照组Cry1、Per1、Per2、Per3基因表达量均显著高于模型对照组(P0.01,P0.01、P0.05、P0.05),SCZ高剂量组Cry1、Per1、Per2、Per3基因表达量均显著高于模型对照组(P0.05、P0.01、P0.05、P0.01),SCZ中剂量组Cry2基因表达量显著高于模型对照组(P0.05),SCZ低剂量组Per1基因表达量显著高于模型对照组(P0.01)。说明SCZ明显降低PCPA失眠大鼠Clock、Bmal1基因表达水平,升高Cry1、Cry2、Per1、Per2、Per3基因表达水平。结论:1.SCZ减少PCPA失眠大鼠海马、脑干、下丘脑GLU、ASP兴奋性氨基酸类神经递质含量,增加GLY、GABA抑制性氨基酸类神经递质的含量,使其兴奋性降低。2.SCZ明显提高PCPA失眠大鼠海马齿状回抑制性氨基酸类神经递质GABA受体表达量,降低兴奋性氨基酸类神经递质GLU受体表达量。3.SCZ通过下调海马生物钟基因正向调节子Clock、Bmal1基因的表达,上调海马生物钟基因负向调节子Cry1、Cry2、Per1、Per2、Per3基因的表达,从而调节睡眠-觉醒周期。
【学位授予单位】：山西省中医药研究院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5
【参考文献】
相关期刊论文 前10条
1 李张珂;李延辉;王凡;尹磊;牛占峰;夏鹤春;;大鼠胶质瘤细胞中生物钟基因Period2的生物节律性研究[J];宁夏医科大学学报;2013年05期
2 孙振晓;于相芬;孙波;;昼夜节律钟基因与精神障碍[J];四川精神卫生;2012年04期
3 周艳丽;高希言;王培育;任珊;;针刺不同腧穴对失眠大鼠下丘脑γ-氨基丁酸和γ-氨基丁酸A受体的影响[J];针刺研究;2012年04期
4 曹银利;石太新;唐成和;常晓;;注意缺陷多动障碍患儿Period3基因可变数目串联重复序列多态性分析[J];实用儿科临床杂志;2012年10期
5 吴林;杨进平;温惠娟;;阳虚失眠病因病机探析[J];实用中医内科杂志;2011年12期
6 赵晓东;时晶;杨益昌;龙子弋;苗迎春;;失眠的诊断与中西医治疗[J];中华中医药杂志;2011年11期
7 张丽;叶翠飞;沈芊;李林;;高效液相荧光法测定大鼠脑内氨基酸类神经递质方法的改良[J];中国实验动物学报;2011年05期
8 王道刚;张钰琴;张光荣;凌江红;;冰片对麻醉大鼠海马GABA、GLU和β-EP表达的影响[J];时珍国医国药;2010年08期
9 张瑾;李春华;尹豆;王烈成;钟明奎;赵乐章;张景行;汪凯;;大鼠海马CA1区GABA能神经元在睡眠调节中的作用[J];动物学杂志;2010年03期
10 佘东来;高妍;申刚义;黄秀兰;;氨基酸类神经递质对中枢神经系统疾病作用的探讨[J];中央民族大学学报(自然科学版);2010年02期
相关硕士学位论文 前10条
1 胡文卓;蛇床子香豆素类成分对失眠大鼠催眠作用及神经递质的影响[D];山西省中医药研究院;2017年
2 杨富友;李庭凯教授治疗失眠临证经验[D];山西省中医药研究院;2016年
3 张黎恒;针刺对抑郁模型大鼠海马GLU/GABA兴奋/抑制调节系统的作用研究[D];云南中医学院;2016年
4 任秋艳;醒脑解郁胶囊对卒中后抑郁大鼠模型海马ERK1/2表达的影响[D];陕西中医药大学;2015年
5 侯小斌;蛇床子催眠活性组分对睡眠剥夺大鼠学习记忆与神经递质的影响[D];山西中医学院;2014年
6 刘炜青;生物钟基因Per2、Bmal1在肿瘤细胞系Raji、Hut、OCI-LY8及HL-60中的昼夜表达规律[D];郑州大学;2014年
7 赵丽;生物钟基因响应外源γ-氨基丁酸调节光周期途径促进拟南芥开花的分子机制[D];中南民族大学;2013年
8 富祯祯;乌龙丹对慢性脑缺血大鼠钟基因及氨基酸类神经递质表达的影响[D];南方医科大学;2012年
9 邓香群;生物钟基因Clock/Bmal1表达与结直肠肿瘤发生发展关系的研究[D];中南大学;2009年
10 聂玉芝;沙苑子对运动训练大鼠脑组织中氨基酸类神经递质及相关基因表达影响的研究[D];陕西师范大学;2005年
，
本文编号：
2662148
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zhongyaolw/2662148.html
