五味子醇甲对糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响

发布时间：2020-05-16 12:32

【摘要】：目的:建立SD大鼠糖尿病性勃起功能障碍(Diabetes-induced erectile dysfunction,DIED)模型,检测DIED大鼠阴茎海绵体细胞凋亡情况,明确DIED大鼠阴茎海绵体细胞是否存在凋亡增加;应用药物干预后,研究五味子醇甲对DIED大鼠阴茎海绵体细胞凋亡及相关凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响,探索五味子醇甲对DIED大鼠勃起功能的作用及可能机制。方法:1.建立SD大鼠DIED模型:80只健康的8周龄雄性SD大鼠(体质量200±50g),适应性喂养1周,随机选取68只大鼠,给予腹腔注射链脲佐菌素(STZ)溶液60mg/kg;余12只大鼠视为正常对照组(NC组)。3天后尾静脉取血测定随机血糖,选出血糖≥16.7mmol/L的大鼠,视为糖尿病(DM)大鼠;继续饲养8周,DM大鼠皮下注射阿扑吗啡(APO),于30min内观察大鼠阴茎勃起情况,未诱导出阴茎勃起的视为糖尿病性勃起功能障碍(DIED)大鼠。2.分组及药物干预:将DIED模型大鼠随机分为:DIED组、五味子醇甲低剂量组(5mg/kg/d)、五味子醇甲高剂量组(20mg/kg/d),外加NC组,共4组。NC组、DIED组大鼠分别给予每日1次的生理盐水(2ml)灌胃处理,药物干预组每日予以相应剂量五味子醇甲灌胃处理,持续8周。3.灌胃8周后麻醉大鼠,电刺激大鼠阴茎海绵体神经检测阴茎海绵体内压(ICP)、颈动脉内压(MAP)。4.处死大鼠,获取阴茎海绵体组织。TUNEL法检测阴茎海绵体细胞凋亡,Western Blot法测定阴茎海绵体内Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达水平。结果:1.灌胃前后各组大鼠血糖及体质量变化:灌胃前,与NC组相比,DIED组、五味子醇甲低剂量组、五味子醇甲高剂量组大鼠血糖均明显升高,体质量均明显降低(P0.05),且三组间两两比较血糖、体质量差异均无统计学意义(P0.05);灌胃8周,与NC组相比,其余三组大鼠血糖均明显升高,体质量均明显降低(P0.05),且三组间两两比较血糖及体质量差异均无统计学意义(P0.05)。2.电刺激初,各组大鼠基础ICP值无明显差异(P0.05)。电刺激时,各组MAP值无明显差异(P0.05),与NC组相比,DIED组、五味子醇甲低剂量组、五味子醇甲高剂量组ICP、ICP/MAP均明显降低(P0.05);与DIED组相比,五味子醇甲低剂量组ICP及ICP/MAP无明显变化(P0.05),五味子醇甲高剂量组ICP及ICP/MAP明显升高(P0.05)。3.TUNEL检测结果:与NC组相比,DIED组、五味子醇甲低剂量组、五味子醇甲高剂量组阴茎海绵体细胞凋亡率均显著升高(P0.05);与DIED组相比,五味子醇甲低、高剂量组阴茎海绵体细胞凋亡率均低于DIED组(P0.05),其中高剂量组阴茎海绵体细胞凋亡率最低(P0.05)。4.Western Blot结果:Bcl-2蛋白的表达:与NC组相比,DIED组、五味子醇甲低剂量组、五味子醇甲高剂量组阴茎海绵体中Bcl-2蛋白表达均减少(P0.05);与DIED组相比,五味子醇甲低、高剂量组Bcl-2蛋白表达均高于DIED组(P0.05);两药物干预组Bcl-2蛋白表达差异无统计学意义(P0.05)。Bax、Caspase-3蛋白的表达:与NC组相比,DIED组、五味子醇甲低剂量组、五味子醇甲高剂量组阴茎海绵体中Bax、Caspase-3蛋白表达均高于NC组(P0.05);与DIED组相比,五味子醇甲低、高剂量组Bax、Caspase-3蛋白均低于DIED组(P0.05),其中高剂量组表达最低(P0.05)。结论:1.阴茎海绵体细胞凋亡及相关凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达可能参与了DIED的发病,随凋亡程度的增加,可能引起勃起功能障碍。2.高剂量的五味子醇甲干预可明显改善DIED大鼠勃起功能。3.五味子醇甲可能通过增加Bcl-2蛋白的表达,减少Bax、Caspase-3蛋白的表达,减少了阴茎海绵体细胞的凋亡,从而起到改善DIED的作用。
【图文】：

阴茎海绵体,电刺激,大鼠

图 1 电刺激阴茎海绵体时各组大鼠 ICP/MAP 的值CP/MAP by electrical stimulation of cavernous nerve in earmal control group;DIED:Diabetes-induced erectile L-S:Low-dose Schisandrin group;H-S:High-dose Schisand.05,Versus group NC;▲P<0.05,Versus group DIED;◇P<L-S. There were no significant differences in the levels on DIED group and L-S group (P>0.05).

海绵体

研究论文20图2 各组大鼠阴茎海绵体凋亡率（%）Fig.2 Apoptosis rate of penis in each group (%)NC:Normal control group;DIED: Diabetes-induced erectile dysfunctiongroup;L-S:Low-dose Schisandrin group;H-S:High-dose Schisandrin group.△P<0.05,Versus group NC;▲P<0.05,Versus group DIED;◇P<0.05,Versusgroup L-S
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5

【参考文献】