加味六安煎对咳嗽变异性哮喘大鼠气道重塑及MMP-9、TIMP-1表达影响的研究

发布时间：2020-05-17 07:05

【摘要】：目的:通过成功复制咳嗽变异性哮喘大鼠模型,观察加味六安煎对咳嗽变异性哮喘大鼠气道重塑和MMP-9、TIMP-1基因表达的影响,验证加味六安煎可以通过下调MMP-9、TIMP-1基因表达,调节MMP-9与TIMP-1之间的平衡,减轻气道重塑,达到治疗CVA的假说,进而探讨加味六安煎治疗CVA的作用环节和机制。方法:将60只Wistar大鼠随机分为6组,空白组、CVA模型组、孟鲁司特钠组、加味六安煎低剂量组、加味六安煎中剂量组、加味六安煎高剂量组,每组10只。除空白组外,其余各组均在第1、8天向每只大鼠腹腔注射10%卵蛋白和AL(OH)3混合溶液1ml致敏。第15天起,每日给予含1%OVA溶液的生理盐水超声雾化激发2分钟1次,共10天,激发前30分钟,各给药组分别灌胃给药治疗,其余两组分别给予同等剂量生理盐水。第26天,进行咳嗽次数测定,留取肺组织标本进行HE、Masson染色,观察肺组织炎性细胞浸润、组织结构变化,测量胶原容积率,及运用实时荧光定量PCR方法检测肺组织MMP-9和TIMP-1表达。结果:1.加味六安煎对大鼠咳嗽次数影响的结果:模型组较空白组咳嗽次数明显升高(P0.05),与模型组相比,加味六安煎各剂量组与孟鲁司特钠组咳嗽次数均明显减少,且组间无统计学差异(P0.05),其中加味六安煎中剂量组咳嗽次数最少。2.加味六安煎对大鼠肺组织大体变化影响的结果:模型组与空白组相比,肺组织呈暗红色,充血、水肿明显,表面可见散在斑片状新鲜及陈旧出血点,体积明显增大,边缘钝,弹性差。加味六安煎各剂量组、孟鲁司特钠组与模型组相比,颜色鲜红,充血、水肿明显减轻,偶见陈旧出血点,体积无明显增大,弹性可。3.肺组织HE染色病理读片结果:模型组可见气管及周围有大量炎性细胞浸润,以嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、中性粒细胞多见,支气管管壁增厚、水肿,肺泡塌陷,间隔增宽,部分肺泡扩张,肺泡腔内可见脱落的上皮细胞,气管腔内可见黏液栓。与模型组比较,孟鲁司特钠组、加味六安煎各剂量组上述病理情况明显改善。4.肺组织Masson染色病理读片结果:模型组气道上皮下胶原沉积明显增加,可见较厚的致密层,与空白组相比,胶原沉积明显增加,差异有统计学意义(P0.05);孟鲁司特钠组、加味六安煎各剂量组气管周围胶原沉积较模型组减少,差异具有统计学意义(P0.05),其中加味六安煎中剂量组胶原容积分数降低最明显。加味六安煎各剂量组、孟鲁司特钠组组间差异无统计学意义(P0.05)。5.加味六安煎对大鼠肺组织中MMP-9基因相对表达量影响的结果:模型组较空白组MMP-9基因表达明显升高,差异有统计学意义(P0.05);与模型组相比,加味六安煎各剂量组、孟鲁司特钠组,MMP-9基因表达均有下降,差异具有统计学意义(P0.05),其中加味六安煎低剂量组较模型组MMP-9表达降低最显著,孟鲁司特钠组、加味六安煎各剂量组组间差异无统计学意义(P0.05)6.加味六安煎对肺组织中TIMP-1基因相对表达量的影响:模型组较空白TIMP-1表达明显升高,有统计学差异(P0.05);孟鲁司特钠组、加味六安煎各剂量组较模型组TIMP-1表达降低,差异有统计学意义(P0.05),其中加味六安煎中剂量组较模型组TIMP-1表达降低最显著。孟鲁司特钠组、加味六安煎各剂量组组间差异无统计学意义(P0.05)7.加味六安煎对肺组织中MMP-9/TIMP-1比值的影响:模型组较空白组MMP-9/TIMP-1比值明显升高,差异具有统计学意义(P0.05);与模型组相比,加味六安煎中、高剂量组MMP-9/TIMP-1比值降低,差异无统计学意义(P0.05);与模型组相比,孟鲁司特钠组、加味六安煎低剂量组,MMP-9/TIMP-1比值降低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:1.咳嗽变异性哮喘大鼠存在气道重塑,其MMP-9、TIMP-1基因表达水平及MMP-9/TIMP-1比值相较于正常大鼠均有升高。2.加味六安煎可以减轻气道炎症、降低气道高反应性、减少胶原沉积,并可能通过下调CVA大鼠肺组织中的MMP-9、TIMP-1基因表达,调节MMP-9/TIMP-1比值的平衡,从而抑制气道重塑。3.加味六安煎各剂量组对于降低MMP-9、TIMP-1基因相对表达量及MMP-9/TIMP-1比值与孟鲁司特钠组之间无明显差异。对于抑制MMP-9基因的表达中,加味六安煎低剂量组最优。对于抑制TIMP-1基因的表达中,加味六安煎中剂量组最优。对于调整MMP-9/TIMP-1比值失衡,加味六安煎低剂量组最优。
【图文】：

加味六安煎对cVA大鼠胶原容积分数的影响

－ｓＮ逦均值逦‘Ｐ值邋Ｔ值邋ＡＰ值逡逑Ａ：空白组逦６逦１．３４±１．０２逦——逦0＿邋0３６＝逦０．邋７４１逡逑Ｂ：孟鲁司特钠组逦６逦２．３４士２．邋１７逦０．７４１逦０．０７０逦——逡逑Ｃ：加味六安煎低剂量组逦６逦０．８９土０．６２逦０．６３３逦０．０２７＂逦０．６３３逡逑Ｄ：加味六安煎中剂量组逦６逦０．８６±０．６４逦０．６２６逦０．０２６＝逦０．６２６逡逑Ｅ：加味六安煎高剂虽组逦６逦１．１６±１．５５逦０．９５６逦０．０４0ｃ逦０．７１１逡逑Ｆ：模型组逦６逦８＿２８±３＿２９逦0．邋0３６＊逦——０．０７０逡逑注：＊与空白组相比Ｐ＜0．0５，邋＃与模哦组相比Ｐ＜０．邋０５，，邋△与孟鲁司特钠组相比Ｐ＜０．０５。逡逑
【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

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1 赵艺亭,任德新;加味六安煎治疗慢性支气管炎急性发作[J];辽宁中医杂志;2003年05期

2 刘晖;;山虎六安煎治疗高脂血症(痰瘀证)60例临床观察[J];中医药导报;2008年12期

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本文编号：2668131