槐杞黄清膏对小鼠肾脏系膜细胞增殖及细胞周期影响的研究

发布时间：2020-05-17 10:34

【摘要】：探讨在体外环境下槐杞黄清膏(Huaiqihuang cream,HQH)对小鼠肾脏系膜细胞(Mouse mesangial cells,MMC)增殖、细胞周期分布及细胞周期相关蛋白p21、Cyclin A的影响。方法:1.在体外环境下培养小鼠肾脏系膜细胞(MMC),实验共分为4组:正常对照组、槐杞黄清膏处理组(浓度分别为8mg/ml、16mg/ml、24mg/ml)。2.使用CCK-8实验方法检测槐杞黄清膏处理24h、48h、72h后小鼠系膜细胞的增殖情况,计算各组的抑制率,分别与正常对照组比较。3.使用流式细胞仪检测各浓度槐杞黄清膏处理48h后小鼠系膜细胞的细胞周期分布情况,并与对照组对比。4.槐杞黄清膏处理48h后,采用Western Blotting方法检测各组细胞周期相关蛋白Cyclin A及p21蛋白的表达情况。结果:1.通过倒置显微镜可观察槐杞黄清膏处理后细胞形态与正常对照组不同。2.不同浓度(8mg/ml-24mg/ml)的槐杞黄清膏处理24、48、72h后,各HQH处理组的吸光度均显著低于对照组(P0.01),提示上述浓度的槐杞黄清膏均对小鼠肾脏系膜细胞的增殖有阻滞作用。3.各HQH处理组作用48h后,流式细胞仪检测结果显示:S期细胞比例明显增高(P0.05),说明槐杞黄清膏阻滞小鼠系膜细胞增殖可能是通过将细胞周期阻滞于S期来实现的。4.槐杞黄清膏处理48h后,检测细胞周期相关蛋白CyclinA、p21的表达,结果显示:CyclinA的表达明显下调,而p21的表达明显上调(P0.01)。结论:一定浓度的槐杞黄清膏对小鼠肾脏系膜细胞的增殖具有抑制作用,而这种抑制增殖的作用可能与其影响细胞周期相关蛋白的表达,进而将细胞周期阻滞于S期有关。
【图文】：

形态图,系膜细胞,小鼠,形态

山西医科大学硕士学位论文2 结果与加药处理后的小鼠系膜细胞形态的小鼠系膜细胞复苏后呈圆形，透亮度较高，贴壁后逐渐伸展开胞体周围伸出多条触角，繁殖速度很快，大约 24-36 小时即可长满，，随后生长速度减慢，呈现接触抑制。入槐杞黄清膏处理的小鼠系膜细胞，可以观察到细胞从贴壁到完全，培养相同时间，细胞密度明显少于正常组，且细胞形态较正常组。形态见图 2-1。

培养条件,抑制率,对照组,时间依赖性

制率也在逐渐增加，呈现出一定的剂量依赖性，并且随着时间的延长，抑制率也定的增加，呈现一定的时间依赖性。（见表 2-1 及图 2-2）表 2-1 不同培养条件下各组吸光度值的比较（ x±s）（n=3）组别吸光度抑制率（%）24h48h 72h 24h 48h 7对照组 0.75±0.081.38±0.14 1.53±0.118mg/ml 组 0.38±0.03*0.37±0.05*0.40±0.04*49.33 73.19 736mg/ml 组 0.28±0.01*0.32±0.01*0.33±0.02*62.67 76.81 784mg/ml 组 0.21±0.01* 0.27±0.01*0.29±0.02*62.67 80.43 81注：与对照组相比，P*<0.01
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5

【参考文献】