鬼针草对雄激素缺乏性干眼大鼠眼表和泪腺的作用机制

发布时间：2020-05-19 10:00

【摘要】：目的:研究鬼针草水提物对雄激素缺乏性干眼大鼠眼表和泪腺的保护机制。方法:健康雌性Wistar大鼠24只,实验分为四组:正常对照组、生理盐水组、模型组、鬼针草治疗组,每组各6只。正常对照组:不做任何处理。生理盐水组:每100g体重0.5ml生理盐水灌胃,每日给药一次,连续4周。模型组:非那雄胺(1.16mg/kg/天)灌胃,每天一次,连续4周。鬼针草治疗组:除非那雄胺组灌胃外,另以每100g体重0.5ml的鬼针草水提取物(浓度0.1g/mL)灌胃,每天一次,连续4周。实验数据收集和标本采集时间为:各实验组分别于实验前、实验后7天、14天、21天及28天行酚红棉线、泪膜破裂时间、角膜荧光素染色评分检查,并在实验第28天取大鼠泪腺及角膜组织行细胞因子抗体芯片技术检测,根据细胞因子抗体芯片检测结果进一步行泪腺Westernblot分析,并于光学显微镜下观察泪腺及角膜组织形态。结果:①非那雄胺组大鼠较对照组泪液分泌减少、泪膜破裂时间缩短、高荧光素染色评分,泪腺有显著的炎细胞浸润。鬼针草治疗组大鼠与非那雄胺组对比,泪液分泌增加、泪膜破裂时间延长、角膜荧光素染色评分降低,并且泪腺结构较完整、几乎未见明显的淋巴细胞浸润。②利用细胞因子抗体芯片技术检测结果显示,非那雄胺组较对照组泪腺中22种细胞因子的表达水平显著改变,其中大多数细胞因子是炎症因子和趋化因子。15种细胞因子(IL-1β,IL-6,IFN-γ,FasL,GM-CSF,TNF-α,IL-4,IL-10,CNTF,B7-2/Cd86,Leptin,MMP-8,TIMP-1,L-selection及ICAM-1)的表达明显增加。在高表达的细胞因子中,IL-1β,IL-6,GM-CSF及TNF-α为促炎因子,IL-4和IL-10为抗炎因子。上述细胞因子在鬼针草组表达明显低于非那雄胺组。鬼针草组与对照组相比,细胞因子在泪腺中的表达无显著差异。非那雄胺组大鼠角膜中6种细胞因子的表达水平显著高于对照组,包括FsaL,IL-13,PDGF-AA,B7-2/Cd86,TIMP-1及ProlactinR。鬼针草组角膜中细胞因子的表达与对照组相比均无显著差异。③用Western blot分析泪腺中的高表达细胞因子(B7-2/Cd86,MMP-8,TIMP-1,IL-1β,IL-4,IL-6,IL-10,FasL及TNF-α)结果显示,非那雄胺组中MMP-8,IL-1β,IL-4,IL-6,IL-10,FasL及TNF-α表达水平均显著高于对照组(P0.05或P0.01)。B7-2/CD86和TIMP-1两组差异无统计学意义。与非那雄胺组对比,鬼针草组中IL-1β,FasL及TNF-α的表达显著降低(P0.05)。其它细胞因子也呈现降低趋势,但无统计学意义。结论:非那雄胺给药14天后可有效诱导大鼠干眼。通过鬼针草治疗能有效缓解雄激素缺乏性干眼眼表症状,改善泪液分泌、稳定泪膜,抑制泪腺组织炎症反应。鬼针草在雄激素缺乏性干眼的治疗上具有很好的应用前景。
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【参考文献】