番泻叶颗粒的研制及其促模型小鼠胃肠动力作用机制的研究

发布时间：2020-05-19 14:17

【摘要】：1番泻叶颗粒的研制1.1番泻苷A、B的提取工艺研究研究番泻叶中番泻苷A、B的最佳提取条件。以番泻苷A、B的含量为评价指标,采用经典恒温法考察其在不同溶剂中的稳定性随温度、时间的变化。利用多因素正交实验对乙醇浓度、乙醇用量、提取温度和提取时间等进行工艺路线的优化和筛选。结果:最佳提取工艺为10倍剂量50%乙醇加热浸泡2次,每次浸提20min。结论:确定的工艺合理、稳定,重现性好,有效成分提取率高,为番泻叶颗粒的研究和实际生产提供依据。1.2番泻叶颗粒的成型工艺研究通过正交试验,以颗粒的成型性、堆密度、休止角、溶化性和吸湿率为考察指标,进行归一化和综合评分(权重系数为0.20:0.20:0.20:0.20:0.20),筛选出颗粒剂的最佳辅料,辅料配比、乙醇用量及体积分数的工艺参数;结果:番泻叶颗粒采用湿法制粒筛选出的最佳辅料为蔗糖和糊精,蔗糖和糊精的配比为2:1,乙醇的体积分数为80%,乙醇用量(g)为6.7%,干燥温度50℃,干燥时间5h,环境湿度需控制在73%以下;结论:该颗粒剂所选辅料合理,成型制备工艺可行,符合2015年版《中国兽药典》二部要求。1.3番泻叶颗粒质量标准的验证验证测定番泻叶颗粒中番泻苷A和番泻苷B含量的HPLC法,用于番泻叶颗粒的质量控制。考察线性关系、精密度、稳定性、专属性、加样回收率和检测限及定量限。结果:番泻苷A、B的线性范围分别为2.42~155.04μg·mL~(-1)(r=0.9999)及2.95~189.20μg·mL~(-1)(r=0.9999)。方法平均回收率(n=6)分别为98.92%(RSD=1.03%)、98.90%(RSD=0.73%)。检测限分别为2.09、0.92μg?mL~(-1),定量限分别为5.39、1.84μg_?mL~(-1)。结论:所建立的分析方法简便、快速、稳定性好、专属性强,增加了能反映番泻叶颗粒临床疗效的质量控制指标,为现有国家标准的完善提供依据。2番泻叶颗粒治疗复方地芬诺酯便秘小鼠的实验性研究探究复方地芬诺酯致小鼠便秘的剂量和评价番泻叶颗粒治疗便秘小鼠的作用效果;(1)将77只昆明小鼠随机分成7组进行造模,分别为空白对照组和5、10、20、30、40、50 mg·kg~(-1)复方地芬诺酯剂量组(以地芬诺酯计),以小鼠首粒黑便时间、8h内排便粒数和重量、每粒粪便重量判定模型。(2)将便秘小鼠分为空白对照组、复方地芬诺酯组、莫沙必利组和番泻叶颗粒治疗组(高、中、低剂量),观察不同剂量的番泻叶颗粒对便秘小鼠首粒黑便时间、8h内排便数目、重量,小鼠体重变化和小肠推进率的影响;结果:(1)与空白对照组相比,以地芬诺酯计30 mg·kg~(-1)的复方地芬诺酯组小鼠首粒黑便时间显著延长(延长79.67min),8h内粪便数目和重量以及每粒粪便重量显著降低。(2)与便秘小鼠相比,600 mg·kg~(-1)番泻叶颗粒组小鼠首便时间显著缩短(减少37.17min),排便粒数(增加11.17粒)和重量(提高0.55g)显著增加,小肠推进率提高20.57%;结论:(1)以地芬诺酯计30 mg·kg~(-1)的复方地芬诺酯能够有效抑制肠管蠕动,成功复制稳定性好的小鼠便秘模型。(2)番泻叶颗粒能明显改善复方地芬诺酯所致的便秘症状,促进小肠蠕动,缩减肠内停留时间,为其临床有效性提供了实验依据。3番泻叶颗粒促模型小鼠胃肠动力作用机制研究探讨番泻叶颗粒对复方地芬诺酯便秘小鼠血清中的胃肠激素水平和NO的影响。将SPF级小鼠随机分为空白对照组(11只)、模型对照组(11只)、阳性药物组(11只)和番泻叶颗粒治疗组(11只)4组。复方地芬诺酯法建立便秘小鼠模型。阳性药物组给予莫沙必利混悬液(1.875mg·kg~(-1)),番泻叶颗粒治疗组给与番泻叶颗粒混悬液(600 mg·kg~(-1)),模型组和正常对照组则给予等量的生理盐水。放射免疫法和硝酸还原酶法检测各组小鼠血清中胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)及一氧化氮(NO)水平的变化。结果:模型建成后,小鼠的胃内残留率升高,小肠推进率降低,血清中MTL、GAS含量降低,NO含量升高,与正常组比较差异均有统计学意义(P0.01)。给药后治疗组小鼠胃内残留率降低,小肠推进率升高,血清MTL、GAS含量升高,NO含量降低,与模型对照组比较差异有统计学意义(P0.01);上述指标在番泻叶颗粒治疗组与阳性药物治疗组之间差异不显著。结论:番泻叶颗粒能增强小鼠的胃肠蠕动功能,其机制可能与其上调血清中MTL及GAS的表达和下调血清中NO的表达相关。
【图文】：

番泻苷A,结构式

酸-1-葡萄糖苷咖啡色或黄色针晶抗菌、免疫抑制素橙色针状结晶抑菌、天然色素大黄酸咖啡色蛋白酶抑制剂类李素黄色针晶提高微血管血流量、调节免素黄色颗粒状结晶抗肿瘤油[3]基丙酮无色或浅黄色透明液体用于香料、医药领域醇无环二萜类化合物降低胆固醇[4]烯长链三萜类化合物清除体内氧自由基，抗衰老0，14-三甲基-2-十五烷酮别名-六氢法尼基丙酮维生素 E 醋酸酯的中间体酚多糖[8]白色或微黄色有光泽的针状结晶抗炎、抗氧化、抗变态反应（最近或首次分离得到的成分）[9, 10]素-6，8-二-C-葡萄糖苷淡黄色针晶 N 无色颗粒状结晶食品添加剂、辅料醇白色片状结晶合成激素、形成胆酸酚-3-云香糖苷淡黄色针晶 NN：未作

色谱图,番泻苷A,混合对,色谱图

图 3-1-1 番泻苷 A、B 混合对照品（a），，供试品（b）的色谱图Figure 3-1-1 Chromatogram of sinosideA and B mixed control (a) and sample (b)3.1.2.4 经典恒温加速试验考察番泻苷 A、B 的稳定性精密称取 1mg 番泻苷 A 和 B，分别用 50%乙醇、50%甲醇、0.1%碳酸氢钠和水充分溶解再密封于安瓿瓶中，将每个溶剂的安瓿瓶分为 4 组，分别放入 50、60、70 和 80℃的恒温水浴锅中，即刻起记为 0h，恒温加热，于不同时间点取样，溶液过 0.45μm 滤膜，进样 20μL，记录峰面积。以 0h 为 100%，其他时间与 0h 相比，计算药物残留百分率，以残留率的自然对数对时间作图，按 lnCi=-kt/2.303+lnC0方程求得同一温度、同一溶剂中的反应常数 k，结果见表 3-1-1。表 3-1-1 番泻苷 A、B 的一级动力学方程反应常数Table 3-1-1 Reaction constants of first-order kinetic equations of sennoside Aand BT/℃番泻苷 A 反应常数（×10-3）番泻苷 B 反应常数（×10-3）50%乙醇 50%甲醇 0.1%碳酸氢钠水 50%乙醇 50%甲醇 0.1%碳酸氢钠水50 0.6 1.3 1.5 1.8 0.5 1.2 1.8 1.4
【学位授予单位】：西南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5;R-332;R284

【参考文献】