大麻素、大麻素受体2与实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎模型疼痛的相关研究

发布时间：2020-05-26 02:11

【摘要】：[目的]研究大麻素及大麻素受体2在实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎,前列腺组织中的表达,及表达的影响因素及其所伴随的骨盆疼痛的改变。探讨大麻素及大麻素受体2与实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎慢性骨盆疼痛的关系。为Ⅲ型前列腺炎疼痛的治疗提供研究思路。[方法]选取性成熟雄性SD大鼠25只,分为对照组5只(0.9%氯化钠盆腔区域皮下、双侧肩胛皮下、腹腔多点注射)、Ⅲ型前列腺炎模型/EAP组20只(完全弗氏佐剂与前列腺组织混合悬液盆腔区域皮下、双侧肩胛皮下及腹腔内多点注射),建模完成后取5只EAP大鼠的前列腺进行HE染色检测建模成功率;将剩下的EAP组大鼠再分为三组:干预组(Ⅰ)5只(EAP模型组基础上加入大麻二酚干预),干预组(11)5只(EAP模型组基础上加入大麻素受体激动剂GW405833干预),干预组(Ⅲ)5只(EAP模型组基础上加入曲马多干预)。建模成功后,干预组(Ⅰ)予大麻素连续腹腔内注射7 d,干预组(Ⅱ)予大麻素受体激动剂GW405833连续腹腔内注射7d,干预组(Ⅲ)予盐酸曲马多注射液腹腔内注射7d,每2d对干预组(Ⅰ)、干预组(Ⅱ),干预组(Ⅲ)及空白对照组进行痛觉测试。选取4组大鼠的前列腺,进行HE染色病理学检查,并通过免疫组化和Western blot、RT-PCR方法从蛋白及基因水平检测CB2受体的表达。建立EAP模型过程中,予Von-Frey测痛纤维于第0 d、5 d、10 d、20 d、30 d、40 d于对照组、EAP组进行骨盆区域痛觉测试。[结果]1.HE染色显示:模型组(EAP组)大鼠前列腺呈不规则改变,腺体间质内淋巴细胞和中性粒细胞浸润,腺体周围充血;空白对照组大鼠前列腺未见明显炎症细胞浸润及充血。2.免疫组化结果:各组大鼠前列腺细胞中均检测到CB2的表达,大鼠前列腺细胞包浆中可见棕色的物质即为CB2受体,建模成功的大鼠中检测到表达CB2的细胞多于空白对照组大鼠。3.Western blot结果:各个干预组及空白组中均检测到CB2的表达,且干预组与空白对照组相比较CB2的表达差异具有统计学意义(P0.01),三个干预组之间CB2表达关系如下:干预组(Ⅲ)干预组(Ⅱ)干预组(Ⅰ)空白对照组。4.RT-PCR结果:各个干预组及空白组均检测到表达CB2的基因,其中空白组与各干预组比较干预组表达CB2的基因远高于空白组,差异具有统计学意义(P0.01);干预组(Ⅲ)干预组(Ⅱ)干预组(Ⅰ)空白对照组。5.Von-Frey测痛结果显示干预组大鼠对疼痛刺激的反应率较对照组明显升高(P0.01);Von-Frey痛觉测试结果显示三个干预组大鼠对疼痛刺激反应均有所减轻,干预组(Ⅰ,Ⅱ)大鼠骨盆疼痛反应较干预组Ⅲ减轻明显,且差异具有统计学意义(P0.05)。[结论]1.采用多点多次皮下注射完全弗氏佐剂与前列腺蛋白提纯液,辅以双重免疫佐剂百白破疫苗的方法可以成功构建实验性Ⅲ型前列腺炎大鼠模型。2.Von-Frey测痛纤维可以用于对对照组、EAP组、干预组(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ)大鼠进行骨盆区域痛觉测试;测试结果与各组前列腺的病理改变相吻合。3.正常大鼠前列腺组织中及EAP大鼠前列腺组织中均存在CB2受体,且EAP模型组中CB2受体数量较对照组大鼠前列腺组织中的CB2受体数量明显增加,差异具有统计学意义(P0.05),CB2的这种数量变化表明CB2受体可能参与了慢性骨盆疼痛综合征的发生。4.大麻素及大麻素受体2激动剂能够减轻慢性Ⅲ型前列腺炎大鼠模型的疼痛,与传统镇痛剂曲马多相比有其有效性,其镇痛机制可能与大麻素受体2有关,且各个干预组在病理学上的改变与Von-Frey纤维测痛结果相一致。
【图文】：

图１．１逦图１．２逡逑

大麻素、大麻素受体2与实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎模型疼痛的相关研究

图１＿３逡逑－
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5

【参考文献】