生脉注射液质量控制及抗脓毒症作用机制研究

发布时间：2020-05-27 01:13

【摘要】：生脉注射液是中药经典复方现代化应用的代表性药物之一,源于《内外伤辩惑论》中记载的古方生脉饮,本论文结合化学分析、敏感生物活性测定、网络药理学及代谢组学技术对生脉注射液的质量评价及针对脓毒症诊疗的分子机制进行研究,实验结果如下:第一部分:采用指纹图谱技术分析5厂家9批次生脉注射液UPLC色谱图,确定24号色谱峰五味子醇甲为参照峰,标定44个共有峰,并确定、指认其中人参皂苷Rg1(10号峰)等11个共有峰,9批次样品的色谱图相似度均大于0.91,表明批次间差异较小,样品溶液制备工艺较为稳定,方法准确可靠。第二部分:采用多指标性成分定量分析手段,建立了稳定、快速的UPLC色谱方法;结合主成分分析建立生脉注射液综合评价模型,各批次得分从高到低:S2、S9、S5、S1、S6、S7、S8、S3。第三部分:建立了采用敏感生物活性指导的生脉注射液质量控制标准,更加客观、明确、综合地反映其质量:(一)建立了基于DPPH自由基清除能力的质量控制方法学,5厂家9批次生脉注射液清除自由基能力较稳定;(二)建立基于RAW264.7细胞模型抗炎物质(NO)清除的质量控制方法学,紧密联系其疗效,增强生物活性质控方法的专属性,5厂家9批次生脉注射液清除抗炎物质NO能力较稳定;第四部分:采用网络药理学技术对生脉注射液抗脓毒症的作用机制进行了简要分析,首先基于指纹图谱的分析结果,其中9种有效成分经Pubchem数据库确证,在STITCH数据库中获取9种成分可能作用的靶点约62个,从HPO数据库收集到符合要求的脓毒症相关人体内靶点有58个,通过STRING数据库对生脉注射液活性成分作用靶标与脓毒症人体靶标进行蛋白质间相互作用分析,删除无关靶标后,利用Cytoscape v3.5.1软件可视化展现药物靶标与疾病靶标的相互作用关系,使用Network Analyzer插件分析该网络中各个节点的网络拓扑性质,获得其中连接度、介度、紧密度中位数分别为:19、0.014、0.449,筛选均大于中位数的靶点按连接度排序取前20个,即为生脉注射液治疗脓毒症网络中的关键靶点,主要包括:ABL1、CCND1、CDK1、CDK2、CDK6、CDKN1B、RB1、HSP90AA1、SMARCA4、RBL2、CTNNB1、MDM2、SP1、LRRK1、BTK、PIK3R1、TMPRSS11D、ACTG2、CD79A、RET等。KEGG代谢通路富集分析得到20条主要的生物信号通路,推测生脉注射液主要通过对 Pathways in cancer,Cell cycle,p53 signaling pathway 等通路的调节发挥协同作用,提示生脉注射液可能通过参与调节免疫、炎症反应、细胞凋亡等过程发挥治疗脓毒症的保护作用,经GO生物学分析可知,生脉注射液有效成分在治疗脓毒症疾病过程中参与调控机体多种生物学过程,如细胞周期、能量代谢、细胞内信号转导、转录调控及免疫系统发育等,提示其可能对脓毒症引发全身性炎症反应、免疫失调进行回调,对风险极高的继发性多器官功能障碍从能量代谢等角度产生保护作用,初步揭示了该药抗脓毒症药效活性的多通路交互调控的作用特点。第五部分:利用尿液代谢组学技术探究生脉注射液抗脓毒症的作用机制,采用经典的的盲肠结扎穿孔法复制脓毒症大鼠模型,进行尿液代谢组学分析。实验结果发现,尿液代谢轮廓显示生脉注射液组大鼠代谢分布趋近于空白组大鼠,证明生脉注射液对脓毒症大鼠有良好的治疗及回调作用,其中调节牛磺酸和亚牛磺酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢等可能是其治疗脓毒症的关键机制。
【图文】：

．表１－３指纹图谱精密度考察相似度评价结果逡逑Ｔａｂｌｅ邋１－３邋Ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ邋ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ邋ｒｅｓｕｌｔｓ邋ｏｆ邋ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ邋ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ邋ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ逡逑对照指纹逡逑ＳＩ邋Ｓ２邋Ｓ３邋Ｓ４邋Ｓ５邋Ｓ６逡逑图谱逡逑５１逦１逦０．９９１逦０．９９４逦０．９９９逦０．９９３逦０．９９３逦０．９９７逡逑５２逦０．９９１逦１逦０．９９１逦０．９９３逦０．９８７逦０．９８６逦０．９９２逡逑５３逦０．９９４逦０．９９１逦１逦０．９９５逦０．９９６逦０．９９６逦０．９９８逡逑５４逦０．９９９逦０．９９３逦０．９９５逦１逦０．９９３逦０．９９３逦０．９９７逡逑５５逦０．９９３逦０．９８７逦０．９９６逦０．９９３逦１逦０．９９９逦０．９９８逡逑５６逦０．９９３逦０．９８６逦０．９９６逦０．９９３逦０．９９９逦１逦０．９９８逡逑对？昭指纹逡逑０．９９７逦０．９９２逦０．９９８逦０．９９７逦０．９９８逦０．９９８逦１逡逑图谱

逦３０邋４３逦３５．邋ＳＩ逡逑图１－２．精密度考察中生脉注射液ＵＰＬＣ指纹图谱评价逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１－２．邋ＵＰＬＣ邋ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ邋ｏｆ邋Ｓｈｅｎｇｍａｉ邋ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｓ邋ｉｎ邋ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ邋ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ逡逑１４逡逑
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285;R286.0

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 唐宗权;;生脉注射液治疗慢性肺源性心脏病的疗效观察[J];名医;2018年12期

2 黄正懿;杨立川;马行一;;生脉注射液预防透析相关性低血压的系统评价[J];世界最新医学信息文摘;2019年45期

3 廖工铁;晏玉英;杨华元;;生脉注射液制备工艺的研究[J];中草药通讯;1979年09期

4 顾维彰;邓丽嘉;;三种方法制备生脉注射液的比较[J];中草药;1983年08期

5 许金花;;生脉注射液辅助治疗慢性阻塞性肺疾病的临床疗效[J];临床医学研究与实践;2018年29期

6 陈娟;倪军;王艳艳;;生脉注射液临床不良反应总结[J];双足与保健;2017年18期

7 廖胜新;;生脉注射液治疗心血管疾病100例临床疗效分析[J];健康之路;2017年01期

8 李文霞;刘显治;钱祯;;生脉注射液在5种输液中的稳定性分析[J];家庭医药.就医选药;2016年06期

9 任菊娅;;生脉注射液在上感中的应用[J];内蒙古中医药;2014年12期

10 杨波;康小琴;赵运;田永仓;;生脉注射液对不停跳冠脉搭桥术患者氧代谢的影响[J];陕西中医;2013年10期

相关会议论文 前10条

1 李秋凤;王守富;徐毅;;生脉注射液治疗心律失常62例临床分析[A];心脑病药物临床评价专家谈[C];1998年

2 王双贵;张秀萍;霍晋;;生脉注射液治疗血液透析低血压疗效观察[A];“中华医学会肾脏病学分会2004年年会”暨“第二届全国中青年肾脏病学术会议”论文汇编[C];2004年

3 徐赛亚;张兰;;生脉注射液防治血液透析中顽固性低血压疗效观察[A];2006年浙江省肾脏病学学术年会论文汇编[C];2006年

4 王万兰;杲常善;屈晓琴;;生脉注射液急危重症治验3例[A];甘肃省中医药学会2009年学术研讨会论文专辑[C];2009年

5 邓正甫;;生脉注射液治疗心源性休克的体会[A];心脑病药物临床评价专家谈[C];1998年

6 曾晖;周刚;韩晴;;生脉注射液防治糖尿病并冠心病45例疗效观察[A];第六次全国中西医结合心血管会学术会议论文汇编[C];2002年

7 廖德祥;;生脉注射液预防抗结核药物副反应初探[A];全国抗结核治疗的不良反应及处理学术会议论文汇编[C];2001年

8 王万兰;杲常善;苏昶才;;生脉注射液急、危重症治验3例[A];甘肃省中医药学会2008年学术年会论文集[C];2008年

9 万群;张泉;;生脉注射液治疗伴低血压的心脏病疗效观察[A];贵州省医学会内科学分会2007年学术年会专题讲座及论文汇编[C];2007年

10 吴毓敏;;含镁极化液配合生脉注射液治疗病毒性心肌炎20例[A];全国中西医结合教育学术研讨会论文集[C];2000年

相关重要报纸文章 前10条

1 记者 朱国旺;总局决定修订生脉注射液说明书[N];中国医药报;2017年

2 张中桥;当心生脉注射液惹事生非[N];保健时报;2005年

3 东直门医院急诊科;危重症氧摄取缺陷的中医药治疗[N];中国医药报;2009年

4 张中桥;当心生脉注射液惹是生非[N];科技日报;2006年

5 张中桥;当心生脉注射液惹是生非[N];大众卫生报;2003年

6 张中桥;当心生脉注射液惹是生非[N];健康报;2003年

7 张中桥;警惕生脉注射液惹事生非[N];卫生与生活报;2005年

8 张中桥;生脉注射液的三种不良反应[N];中国医药报;2003年

9 陈金伟;生脉注射液不良反应3例[N];中国医药报;2005年

10 张中桥;生脉注射液不良反应举隅[N];中国中医药报;2003年

相关博士学位论文 前7条

1 刘美明;生脉注射液和胸腺肽对体外循环致机体免疫功能损害的防治研究[D];山东大学;2006年

2 吴小秋;基于代谢组学的生脉注射液干预2型糖尿病气阴两虚证的临床研究[D];广州中医药大学;2013年

3 周洪玉;生脉注射液药效物质基础研究[D];吉林大学;2011年

4 詹淑玉;生脉注射液蛋白质组学与药效物质体内过程研究[D];浙江大学;2014年

5 敖素华;慢性支气管炎研究治疗进展、导师经验总结暨生脉注射液治疗慢性支气管炎的临床观察[D];成都中医药大学;2003年

6 王东进;生脉注射液诱导心肌组织内干细胞分化与体外循环心肌保护[D];南京中医药大学;2011年

7 张东;心脏骤停PR-MODS兔动物模型的建立和生脉注射液干预治疗的实验研究[D];吉林大学;2009年

相关硕士学位论文 前10条

1 柴瑞平;生脉注射液质量控制及抗脓毒症作用机制研究[D];北京协和医学院;2019年

2 李奕萱;从线粒体—内质网结构偶联角度初探生脉注射液防治糖肾的机制[D];北京中医药大学;2018年

3 高颖;阿奇霉素合用生脉注射液潜在致心律失常的作用及其机理研究[D];南京中医药大学;2018年

4 梅高昌;生脉注射液对膝关节置换术患者下肢骨骼肌缺血再灌注损伤的影响[D];安徽医科大学;2017年

5 强薇;生脉注射液项目风险管理研究[D];南京理工大学;2015年

6 江波;生脉注射液治疗快速性心房颤动40例的临床观察[D];成都中医药大学;2006年

7 陈威;生脉注射液对血流动力学及血管因子影响作用的研究[D];军医进修学院;2001年

8 李伟;生脉注射液治疗扩张型心肌病的临床研究[D];湖北中医学院;2006年

9 吴佩华;生脉注射液对低灌注/栓子清除能力下降型脑梗死脑血流动力学的影响[D];山西中医学院;2015年

10 吕民;生脉注射液对心肌缺血与再灌注损伤保护效果的临床研究[D];吉林大学;2004年

，

本文编号：2682699