海带多糖对阿霉素诱导的肾损伤干预作用

发布时间：2020-05-27 10:20

【摘要】：海带是一种盛产在低温海水中的大型海生褐藻类植物,呈扁平带状,最长可达到20 m左右,因其多产及独特的口感已经被广泛用于烹饪食材。海带多糖也称昆布多糖,前人的研究表明海带多糖LJP61A能够通过减缓主动脉血管钙化从而干预肾衰竭的进程。本文主要以阿霉素诱导的肾损伤模型为出发点,探讨海带多糖LJP61A对小鼠急性肾损伤的干预效果,并在体外实验研究LJP61A对足细胞损伤形成的干预机制,现取得的研究结果如下:(1)海带多糖LJP61A对阿霉素诱导的Balb/c小鼠肾损伤的干预研究:通过检测小鼠的体重、肾脏病理切片观察及血清各项生化指标,探究海带多糖是否干预了肾损伤疾病进程。组织切片病理学结果显示LJP61A对肾小球损伤和肾脏纤维化有一定的保护作用,且呈现量效关系。血清的生化检测结果显示LJP61A能降低总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及尿素氮(BUN)、肌酐(Crea)水平,并且改善Ca2+、Mg2+、P3+等电解质及蛋白质的代谢紊乱状态,说明LJP61A能显著延缓阿霉素诱导的肾损伤疾病的发展进程。进一步利用HE、Masson、PAS染色显示LJP61A能够显著保护肾小球结构的稳定,减少炎性细胞浸润造成的损害,减缓肾小球足突融合,并通过Nephrin免疫组织化学分析,表明LJP61A能够稳定阿霉素对肾小球上皮细胞足突的毒性作用,保护肾小球过滤功能;qReal Time-PCR和Western blotting结果表明,LJP61A能显著降低炎性因子IL-1β、TNF-α的基因表达,抑制促炎蛋白MCP-1的蛋白表达,并且显著降低肾小球硬化信号通路相关蛋白TGF-β1/Smads的表达。以上结果显示LJP61A对阿霉素诱导的肾损伤有明显的干预作用。(2)探究LJP61A对TGF-β1诱导的肾小球上皮细胞损伤的干预机制:采用TGF-β1诱导肾小球上皮细胞转分化模型,设置不同浓度组分观察LJP61A对肾小球上皮细胞生长状态影响,结果显示当LJP61A在浓度为5~25μg/m L时对细胞的生长有促进作用。细胞形态学观察LJP61A能够显著缓解肾小球上皮细胞足突的损伤,维持细胞功能的完整。通过Western blotting结果找出16 h时为TGF-β1诱导Nephrin表达最低点,qRT-PCR结果表明,LJP61A通过Smad3/p38途径调节Nephrin及抑制纤维化蛋白α-SMA的表达从而阻断肾小球上皮细胞转分化为间充质细胞。
【图文】：

后使用截留 3500Da 分子量的透析袋流水透析 48h，再空冷冻干燥器后得到海带粗多糖（LJP6）。的分离纯化海带粗多糖（LJP6）150mg 并加超纯水 10ml 轻轻摇晃 8000 rpm，去除杂质，将上清加入到 DEAE-CellμLose吸附分离，用超纯水洗脱，，用自动部分收集器收集不酚-硫酸比色法[62]进行跟踪多糖分布及吸光值测定，后透析后冷冻干燥处理最终得到海带水洗糖(LJP61)。谱柱（1.0 × 80 cm）对其纯化，超纯水作为洗脱液，数 2 mL/10min 进行收集，跟踪检测多糖分布及含量，将缩后透析、冷冻干燥处理得到纯化的均一组分多糖 L根据出峰时间及峰值数量确定 LJP61A 的均一性。LJ具体化学结构如图 2.1 所示。

图 2. 7 实验小鼠肾脏组织的总体形态学观察Fig 2.7 General morphological character of the kidneys of the treated mouses注：A：Control；B：Model；C：ADR+LJP61A50；D：ADR+LJP61A100；E：ADR+LJP61A200F：LJP61A50；G：LJP61A100；H：LJP61A2002.4.7 各剂量 LJP61A 对小鼠脏器的影响脏器指数可在一定程度上反映出阿霉素肾损伤小鼠与正常小鼠的脏器之间的差异，因此对于检测脏器损伤程度具有一定的指导意义。肝、肾组织是药物在血液里代谢的主要场所，在阿霉素尾静脉注射后，其造成的损伤不仅限于肾脏组织，对肝组织也表现出一定的病变。图 2.8A 显示阿霉素诱导肾损伤能够造成肾脏明显的病理萎缩（P<0.01），而各剂量的 LJP61A 能够减缓这种损伤，并随着剂量的升高而加强（P<0.05 或 P<0.01）。而图 2.8B 显示阿霉素也会造成肝脏的肿胀，且对比正常组小鼠肝脏有显著差异（P<0.01），LJP61A 能够降低肝脏肿胀的程度从而保护肝脏（P<0.05 或 P<0.01）。提示海带多糖 LJP61A 能够缓解阿霉素所致肝、肾
【学位授予单位】：合肥工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 程晓芳;袁丹丹;张余慧;王t$椺;;海带多糖在水产动物中的应用研究[J];饲料广角;2018年04期

2 邓槐春;谈竞光;谢姣娥;林耀宗;;海带多糖对高脂血症的临床疗效初步观察[J];中草药;1987年08期

3 邓槐春;谈竞光;谢姣娥;林耀宗;何浩川;;海带多糖的药理作用[J];中草药;1987年02期

4 吴晓青;吴水华;钟碧萍;王倩文;;复方海带多糖袋泡茶的研制[J];食品研究与开发;2017年17期

5 刘敏;彭臻菲;方哲翔;张其清;许小平;;海带多糖硫酸酯对bFGF诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响[J];食品科学;2013年03期

6 刘宝亮;曹桂萍;张金涛;张梅;;超声波-双水相协同提取海带多糖工艺的研究[J];安徽农业科学;2010年31期

7 牛文;赵云峰;徐承水;;海带多糖生物活性的研究进展[J];科技信息(科学教研);2008年22期

8 刘会娟;;海带多糖的生物学活性研究新进展[J];甘肃畜牧兽医;2010年05期

9 贾彦明;闵伟红;;海带多糖的分离纯化及体外抗氧化作用的研究[J];农产品加工(学刊);2010年08期

10 鲁波;刘爱群;黎静;谢露;;海带多糖对内皮细胞损伤大鼠模型的保护作用[J];中国老年学杂志;2006年09期

相关会议论文 前10条

1 黎静;杨晓梅;谢露;;海带多糖在心理应激状态下的血管内皮保护作用[A];中南地区第八届生理学学术大会论文摘要汇编[C];2012年

2 邝荔;柳一鸣;谢瑜珊;王凤新;邓穗平;欧阳健明;;降解海带多糖对草酸钙晶体生长的调控[A];中国化学会2008年中西部地区无机化学、化工学术交流会会议论文集[C];2008年

3 黎静;谢露;杨晓梅;;海带多糖对内皮细胞保护作用的研究综述[A];中国生理学会第十一届张锡钧基金全国青年优秀生理学学术论文交流及评奖会议综合摘要[C];2011年

4 石振艳;毛小红;倪倍倍;王园园;岳旺;;海带多糖对铅中毒雄性小鼠生殖的影响[A];全国第十二届生化与分子药理学学术会议论文集[C];2011年

5 赵雪;李八方;董诗竹;李芳;;海带多糖抗氧化活性及机理的研究[A];2010年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年

6 王庭欣;赵文;蒋东升;秦淑贞;马晓彤;边庆荣;张俊刚;;海带多糖对大鼠血糖的调节作用[A];营养与保健食品研究及科学进展学术资料汇编[C];2002年

7 黎静;谢露;;海带多糖L01对血管内皮细胞表达血管性假血友病因子的影响[A];第九届广西生理科学会会员代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2008年

8 高金洪;黎静;陈锋;刘家存;莫振华;魏茜敏;;海带多糖保护微血管内皮细胞的作用对光老化皮肤胶原蛋白代谢的影响研究[A];中南地区第八届生理学学术大会论文摘要汇编[C];2012年

9 谢露;陈蒙华;刘爱群;黎静;;海带多糖L01对实验性血管内皮损伤老龄大鼠血小板活性的影响[A];中国生理学会第五届全国心血管、呼吸和肾脏生理学学术会议论文摘要汇编[C];2005年

10 夏爽;阮林;韦力;;海带多糖对放射性脑损伤的记忆功能障碍和内皮细胞损伤的影响[A];中国解剖学会2015年年会论文文摘汇编[C];2015年

相关重要报纸文章 前3条

1 本报记者 刘艳芳 整理;电离辐射损伤男性生殖健康 海带多糖提供有效保护[N];中国食品报;2010年

2 河南巩义市第二人民医院 白淑贤;海带[N];大众卫生报;2005年

3 张正修;以食攻毒不妨一试[N];中国医药报;2006年

相关博士学位论文 前7条

1 耿丽华;海带多糖酸解产物的分离分析及免疫调节作用研究[D];中国科学院大学(中国科学院海洋研究所);2018年

2 李

本文编号：2683382