甘肃马先蒿与小孢拟盘多毛孢化学成分研究

发布时间：2020-05-31 04:51

【摘要】：列当科(Orobanchaceae)马先蒿属(Pedicularis L.)植物马先蒿,主要分布于亚洲、欧洲和北美国家。该属植物目前约有600多种,其中约300种分布在我国寒冷地区和高山地区,特别是西南和西北地区。该属部分植物长期被用作传统药材,特别是藏药,广泛用于治疗发烧、风湿病、肝胆疾病、食物中毒、改善消化和保持活力。前期研究表明,苯丙素类、单萜环烯醚、木脂素和黄酮类等化合物广泛存在于马先蒿属植物中。其中单萜环烯醚,已被证明具有多种生物活性,如抗氧化、抑制DNA突变、抗肿瘤和保护肝脏等。拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis),是根据其形态特征划分的半知菌类的一种无性型内生真菌属。其分生孢子为梭形,由5个细胞组成,中间3细胞为有色胞,两端细胞无色,顶胞含一至多根附属丝。该属真菌的营养方式主要包含寄生、腐生和内生,广泛地分布于全球各地,尤以热带和亚热带地区较为丰富。拟盘多毛孢属真菌的次生代谢产物也十分丰富,主要包括萜类化合物(倍半萜烯、二萜、三萜)、含氮化合物(胺类和酰胺类、吲哚类)、苯醌以及半醌类、香豆素类、内酯类和酚类化合物等。其中,部分化合物呈现出较好的抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗氧化等生物活性。为了进一步对马先蒿和拟盘多毛孢属真菌进行深入的研究,本文以甘肃马先蒿(Pedicularis kansuensis)和真菌小孢拟盘多毛孢(Pestalotiopsis microspora)为研究对象,对甘肃马先蒿95%乙醇提取物中的乙酸乙酯萃取相和小孢拟盘多毛孢发酵物的乙酸乙酯萃取相的次生代谢产物进行系统地分离与鉴定。利用MCI柱层析、反相C_(18)硅胶柱层析、正相硅胶柱层析、葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)色谱以及高效液相色谱仪(HPLC)等分离手段,共分离得到33个化合物。再利用核磁共振等波谱学技术以及与相关文献对照,对甘肃马先蒿以及真菌小孢拟盘多毛孢次生代谢产物的结构进行了解析和鉴定,从甘肃马先蒿中鉴定得到20个化合物,主要包括单萜环烯醚、木脂素、苯环衍生物等。从小孢拟盘多毛孢中鉴定了13个化合物的结构,其中2个新化合物,主要包括苯环衍生物、醌类等。此外,为了契合本论文的选题依据,以及更好地为实验设计提供正确的指导方向,对马先蒿属植物的次生代谢产物及其生理活性进行了较为系统的综述。该综述在一定程度上,对于后续马先蒿属植物的开发利用有一定的参考价值。
【图文】：

甘肃马先蒿（Pediculariskansuensis）植物图片：1、植株；2、花；3、花萼；4、下唇（陶明琴绘）

2.3.3 化合物 2.5 的细胞毒性测试2.3.3.1 细胞培养本实验选取人早幼粒白血病细胞 HL-60、人肝癌细胞 HepG2、人乳腺癌细胞MDA-MB-231和人肝癌细胞 SMMC-7721 四组癌细胞系测定化合物 2.5的体外毒性测试。所述细胞系源自兰州大学功能有机分子化学国家重点实验室房建国课题组，，细胞培养和细胞毒性测试工作完成于该室。2.3.3.2 实验结果以二甲亚砜为空白对照，以 MTT 法对化合物 2.5 测试了 LH-60、HepG2 和MDA-MB-231 三种癌细胞的细胞毒活性，结果显示该化合物对这三种癌细胞有较好的细胞毒性作用，尤其是对人早幼粒白血病细胞 HL-60，如图 2-1 所示；该化合物对硫氧还原蛋白酶抑制活性较差，如图 2-2 所示，即表明该化合物的作用靶点不是硫氧还原蛋白酶，作用机制有待进一步研究。
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R284.1

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本文编号：2689320