基于miRNA组学的加味七方胃痛颗粒干预胃癌AGS细胞机制研究

发布时间：2020-06-04 21:53

【摘要】：目的:1.研究加味七方胃痛颗粒含药血清对胃癌AGS细胞增殖的影响。2.探讨加味七方胃痛颗粒含药血清干预胃癌AGS细胞后miRNA表达及初步作用分析。方法:1.体外培养胃癌AGS细胞。2.将加味七方胃痛颗粒对大鼠进行灌胃5天,提取含药血清,以及健康大鼠血清。3.实验设空白对照组、阴性对照组(动物血清组)及药物血清干预组:空白对照组不加任何处理;阴性对照组加动物血清;药物血清干预组分成5个浓度梯度,分别加入终浓度为2.5%、5%、10%、15%、20%的药物血清。在培养箱里分别培养24h、48h、72h。采用cck8法检测不同浓度的含药血清对胃癌细胞的增殖影响。4.空白组:胃癌AGS细胞常规培养。阴性对照组:胃癌AGS细胞,加入与药物观察组相同剂量的正常大鼠血清进行细胞培养。实验组:胃癌AGS细胞,加味七方胃痛颗粒含药血清进行干预,干预72小时后,提取总RNA并进行质量监控,然后构建文库,进行高通量测序,对miRNA表达差异谱进行分析。结果:1.加味七方胃痛颗粒含药血清干预AGS细胞24h、48h、72h后,各浓度组对AGS的增殖均有抑制作用,与阴性对照组对比差异具有统计学意义(P0.05),并呈时间及浓度依赖性。2.经加味七方胃痛颗粒干预后胃癌AGS细胞后,22个miRNA出现上调,23个miRNA出现下调;22个上调的miRNA为:miR-14-5p、miR-3145-5p、miR-509-3p、let-7c-5p、miR-411-5p、miR-99a-5p、miR-1286、miR-135a-5p、miR-3620-3p、miR-1-3p、miR-513a-5p、miR-378f、miR-3138、miR-3180、miR-3180-3p、miR-379-5p、miR-654-5p、miR-6747-3p、miR-1185-1-3p、miR-4640-3p、miR-144-3p、miR-3688-3p;23个下调miRNA为:miR-1261、miR-497-5p、miR-512-3p、miR-525-5p、miR-548az-5p、miR-6735-5p、miR-675-3p、miR-219b-3p、miR-2277-3p、miR-1180-5p、miR-125b-1-3p、miR-4449、miR-4523、miR-675-5p、miR-4466、miR-515-5p、miR-1323、miR-569、miR-1283、miR-4802-3p、miR-510-5p、miR-3158-5p、miR-7114-5p。结论:1.加味七方胃痛颗粒含药血清对胃癌AGS细胞的增殖有抑制作用,与时间和浓度具有依赖性。2.经加味七方胃痛颗粒干预胃癌AGS细胞后miRNA出现了差异性的表达,可能通过引起miR-144-3p、miR-99a-5p等差异性表达,抑制胃癌细胞的增殖。
【学位授予单位】：广西中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285

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本文编号：2697028