GP17对皮肤光老化小鼠血清中PGE2、COX2以及皮肤组织中MMP-1表达影响的研究

发布时间：2020-06-04 22:48

【摘要】：目的:本实验研究目的在于探讨绞股蓝七叶胆苷XVII(GypenosideXVII,GP-17)对皮肤光老化小鼠抗衰老作用,通过检测GP-17对皮肤光老化小鼠血清中前列腺素2(PGE2)、环氧合酶2(COX-2)以及皮肤组织中MMP-1含量表达的影响,研究探析GP-17在紫外线照射导致光老化的小鼠中的抗衰老作用及氧化应激相关机制。材料与方法:选取60只7周龄雄性昆明小鼠,随机分为6组,每组10只,分别为空白对照组,UV模型组,GP-17高剂量组,GP-17中剂量组,GP-17低剂量组和阳性对照组即维生素E(VE)对照组。剔除小鼠背部大约为2×2cm~2左右面积的毛发将皮肤充分暴露。除空白对照组外的五组小鼠置于40W紫外线灯管(UVA+UVB)下进行照射,第13周后小鼠出现慵懒、倦怠、蜷缩、皮肤粗糙并伴有猪毛征出现、纹理加粗加深变大、皮肤颜色开始暗红等表现,说明皮肤病理的改变已经符合文献记载的光老化模型的标准,代表造模成功。照射时间结束,终止照射,UV累计强度为224.427J/cm~2。第14周开始,给予空白对照组的小鼠以及UV模型组的小鼠一定量的盐水灌胃。GP-17高、中、低剂量组以及VE对照组采用灌胃的方式给予高中低三组剂量的绞股蓝七叶胆苷,VE橄榄油。每天一次持续两周。第16周将小鼠处死,经腹主动脉取血,并取小鼠背部裸露部分的皮肤组织,Elisa方法检测小鼠血清中的PGE2、COX-2含量,采用Western-Blot方法检测小鼠皮肤组织中的MMP-1含量。结果:1.小鼠血清中PGE-2含量的表达各组血清中PGE2含量检测显示,与空白对照组相比,UV模型组血清中PGE2含量明显升高,差异具有统计学意义(P0.01);GP-17高、中、低剂量组以及VE对照组中PGE2含量与空白对照组相比有所升高,差异具有统计学意义(P0.01)(P0.05)。与UV模型组相比较,GP-17高、中、低剂量组以及VE对照组PGE2含量较低,差异具有显著性(P0.01)。与GP-17高剂量组相比,GP-17中、低剂量组以及VE对照组PGE2含量偏高,其差异具有统计学意义(P0.01)(P0.05);结果具有统计学意义。2.小鼠血清中COX-2含量的表达各组血清中COX-2含量检测显示,与空白对照组相比,UV模型组血清中COX-2含量明显升高,差异具有统计学意义(P0.01);与空白对照组相比较,GP-17高、中、低剂量组以及VE对照组中COX-2含量与空白对照组相比有所升高,差异具有统计学意义(P0.01)。与UV模型组相比较,GP-17高、中、低剂量组以及VE对照组COX-2含量较低,差异具有显著性(P0.01)。与GP-17高剂量组相比,GP-17中、低剂量组以及VE对照组COX-2含量偏高,其差异具有统计学意义(P0.01)(P0.05);结果具有统计学意义。3.各组小鼠皮肤组织中MMP-1含量结果显示,与空白对照组相比,UV模型组MMP-1含量有所升高,差异具有统计学意义(P0.01);GP-17高、中、低剂量组以及VE对照组中MMP-1含量与空白对照组相比有所升高,差异具有统计学意义(P0.01)。与UV模型组相比较,GP-17高、中剂量组以及VE对照组中MMP-1含量含量较低,差异具有显著性(P0.01)。与GP-17高剂量组相比,中、低剂量组以及VE对照组MMP-1含量偏高,其差异具有统计学意义(P0.01)(P0.05)。结论:1.UV照射下的小鼠体内发生氧化应激时,可诱导PGE2和COX-2炎症介质表达增加,活化MMP-1生成,降解细胞外基质从而引起皮肤光老化产生;2.皮肤光老化的小鼠体内PGE2和以及MMP-1含量较高,GP-17通过有效降低PGE2、COX-2炎症因子过度表达从而抑制MMP-1分泌,减轻小鼠皮肤光老化的损伤。
【图文】：

测定安装好以后，倒入转移缓冲液，并将电泳仪的参数设压状态下转移。后取出PVDF膜，并在膜的右上角剪角作为标记，用TBS百分之五浓度的 BSA 溶液中，放置在水平摇床上，室浓度的 BSA 封闭液进行稀释，稀释度的比例为 1:100铺平放在干净的塑料薄膜上，之后再在 PVDF 膜上层再机围绕着 PVDF 膜封闭三条边，，随后将一抗的工作液从后，把最后一侧也封闭上，平放在 4℃的冰箱里，孵育浓度的 BSA 封闭液进行稀释，稀释度的比例为 1:100

注：1.空白对照组 2.UV 模型组 3.GP-17 高剂量组4.GP-17 中剂量组 5.GP-17 低剂量组 6.VE 对照组图 3 各组小鼠皮肤组织中 MMP-1 的含量比较示意图
【学位授予单位】：辽宁中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

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本文编号：2697084