【摘要】:目的:根据中医温病学理论,基于古代医药本草典籍文献信息,结合现代药理研究,研制一种安全高效、绿色环保、经济方便的空气消毒剂,以获取较好的社会效益和经济效益。以中药空气气溶胶杀菌活性为考察指标,进行配伍关系与制备工艺优化,研制出一种中药空气气溶胶消毒剂。了解其对室内空气的消毒效果,建立质量控制标准,检测其急性毒性作用,确保其临床用药安全性,探讨其消毒杀菌的作用机制。方法:1.气溶胶消毒剂杀菌效果检测方法的选择:以抑菌能力为指标,比较纸片抑菌试验与空气消毒现场试验方法,选择合适的检测方法;2.消毒剂提取工艺研究:以纸片抑菌圈直径为考察指标,以药液比、乙醇浓度、提取时间作为考察因素,通过L_9(34)正交试验优化提取工艺;3.消毒剂药物配伍关系研究:以纸片抑菌圈直径为考察指标,以四味药材作为考察因素,药材的高、中、低不同剂量作为因素水平,通过L_9(34)正交试验优化配伍比例;4.抑菌作用研究:通过纸片抑菌实验,考察中药空气气溶胶消毒剂对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌的抑制作用;采用六级筛孔撞击采样法对中药空气气溶胶消毒剂消毒前后空气中的菌落数进行采集培养,计算杀菌率,判断中药空气气溶胶消毒剂对空气中自然菌的消毒效果;比较中药空气气溶胶消毒剂与原熏蒸消毒剂消毒效果有无差异;5.质量标准研究:对消毒剂的性状、检查项进行了规定;采用TLC法与HPLC法对该消毒剂的没食子酸、熊果酸、槲皮素等成分进行定性鉴别,采用HPLC法对主要有效成分没食子酸进行含量测定研究;对该消毒剂的稳定性进行了研究;根据所得结果制定质量控制标准,拟定质量标准草案;6.急性毒性试验研究:采用小鼠急性经口毒性实验、急性吸入毒性实验、家兔急性眼刺激实验与豚鼠皮肤刺激实验,判断中药空气气溶胶消毒剂急性毒性;7.杀菌机制研究:研究消毒剂对白色葡萄球菌生长曲线、电导率、超微结构的影响,探讨中药空气气溶胶消毒剂可能的杀菌机制。结果:1.纸片抑菌试验与空气消毒现场试验的结果显示,纸片抑菌试验与空气消毒现场试验的结果趋势一致,纸片抑菌作用越好其空气消毒现场试验效果也越强,提示纸片抑菌试验可以作为考察消毒剂消毒效果的检测方法;2.气溶胶消毒剂最佳提取工艺是:药材用15倍70%乙醇浸泡2小时,提取3小时,滤过,再提取1小时,合并两次提取液,减压浓缩至密度约为1.00(55℃测);3.气溶胶消毒剂最佳配伍关系为:五倍子:山楂:C药:D白木香叶=3:2:3:1;4.按最佳提取工艺与配伍提取的消毒剂,对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌均具有一定抑制作用,抑菌强度依次为:革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌真菌;对密闭空间消毒效果尤佳,消毒前后空气中的菌落数有差异(P0.05),消亡率大于90%,符合2002版《消毒技术规范》空气消毒剂的现场消毒试验消亡率大于90%的标准;中药空气气溶胶消毒剂与原熏蒸消毒剂消毒效果比较表明:两者对春、夏、秋、冬4个季节的密闭空间中自然菌的消亡率均大于90%,但对于污染较轻的冬季空间,原大复方熏蒸消毒剂的消毒效果优于气溶胶消毒剂;5.质量标准研究规定了消毒剂的性状、检查项,检查项限定了10 mL消毒剂总固体量不少于2.40 g,PH值范围为3.0~4.0;增设了在同一薄层色谱条件下对五倍子、C药材的鉴别及消毒剂中主要有效成分没食子酸、熊果酸、槲皮素的鉴定,同时增加了对主要有效成分没食子酸的HPLC含量测定,规定了10 mL消毒剂中没食子酸含量不低于24.57 mg,该方法稳定、可靠、重现性好;稳定性检测试验表明消毒剂在一年内质量稳定,杀菌有效成分没食子酸含量下降率10%,现场消毒试验消亡率大于90%,符合2002版《消毒技术规范》空气消毒剂的现场消毒试验消亡率大于90%的标准;6.小鼠急性经口毒性实验与急性吸入毒性实验结果表明中药空气气溶胶消毒剂属实际无毒,豚鼠皮肤刺激实验结果表明中药空气气溶胶消毒剂对皮肤无刺激,家兔急性眼刺激实验结果表明中药空气气溶胶消毒剂对家兔眼有轻微刺激;7.中药空气气溶胶消毒剂对白色葡萄球菌的生长曲线实验表明,其对白色葡萄球菌有抑制作用;能增加白色葡萄球菌的电导率,说明其可能改变了细菌细胞膜的通透性,使菌体细胞内的离子渗出;透射电镜下,消毒剂作用24小时的白色葡萄球菌出现质壁分离、细胞质浓缩、分布不均甚至空腔的现象,表明消毒剂对白色葡萄球菌细胞壁与细胞膜结构具有较强的破坏作用。该消毒剂的抑菌机制可能与改变了细菌细胞膜的通透性,破坏细菌细胞壁结构有关。结论:本研究制备了一种中药空气气溶胶消毒剂,消毒效果确切,无毒性,对眼有轻微刺激,高效经济,制备工艺合理,质量稳定可控。
【图文】: 图 2-1 两种消毒剂对同一空间消毒的成本毒剂样品的空气现场消毒试验结果显示,两者与消毒前比较,消毒寓空气细菌总数均显著减少(P<0.05),对 4 个季节的空气消毒符合 2002 版《消毒技术规范》对空气中自然菌的消亡率均大于 90%两种消毒剂消毒效果均好;对春、夏、秋 3 季之间的消亡率无显著与原熏蒸消毒剂冬季的消亡率相比,气溶胶消毒剂冬季的空气消毒异(P<0.05),说明原熏蒸消毒剂对于空气污染较轻,细菌数较少空气溶胶消毒剂,这可能与原熏蒸消毒剂处方药味多有关系。两种消较结果显示,气溶胶消毒剂大大降低了生产成本。消毒前空气中细菌总数相比,夏、秋、冬 3 季均有显著性差异(P<病高发情况一致,提示春季空气中的病原菌、病毒等迅速繁殖,极发生与流行,需要经常对空气进行消毒。夏季与冬季空气中细菌总数著性差异(P<0.05),冬季天气寒冷且干燥,细菌生长与繁殖缓慢,,消毒。
广东药科大学硕士研究生学位论文分别取适量没食子酸对照品、熊果酸对照品、槲皮素对照品加甲醇制成 1 mg/m对照品溶液。3.2.2.2 薄层色谱鉴别按照 2015 版《中国药典》四部通则 0502 的薄层色谱法试验,分别吸取上述溶液各 5~10 μL,分别点于同一硅胶 G 薄层板上,以氯仿-甲酸乙酯-甲酸(体积比 2 : 1 : 0.5为展开剂,展开,取出,晾干,于紫外灯 254 nm 下观察结果,结果如图 3-1A;喷以10%硫酸-乙醇 90℃显色,在日光下检视结果,结果见图 3-1B 。
【学位授予单位】:广东药科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:R283.6
【参考文献】
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本文编号:
2705634
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