中药复方W抗小瓜虫病研究

发布时间：2020-06-12 20:09

【摘要】：目的:筛选出抗小瓜虫病的有效中药复方W,制备中药复方W最佳提取物,为中药复方W在防治小瓜虫病的运用提供依据。方法:(1)以感染小瓜虫的动物为实验动物,建立药效学评价方法,对13个中药复方进行杀虫试验筛选。(2)建立复方W的紫外分析方法,对提取方法、粉碎度、溶媒用量、提取时间和提取次数等单因素进行考察,优选出各单因素水平,采用L_9(3~4)正交设计实验优选出复方W的最佳提取工艺。(3)制备1g/ml的中药复方W最佳提取物。(4)根据不同浓度的复方W提取物对试验动物的进行安全性试验,把试验动物的平均死亡率转换成概率单位,采用Bliss法计算分析试验动物24、48、96 h的的半致死浓度LC50,采用spss20.0软件中的Probit概率单位分析法进行统计。(5)以丁醇—醋酸—水(4:2:1)为展开剂,碘化铋钾试液为显色剂,采用薄层色谱法对中药复方W最佳提取物进行定性鉴别。(6)选用流动相:乙腈—水(28:72);检测波长205nm,采用高效液相法测定复方W最佳提取物中指标成分H的含量。(7)对1g/ml的中药复方W最佳提取物进行药效学实验评价。结果:筛选出杀小瓜虫的有效中药复方W,建立了复方W的紫外评价方法,最大吸收波长是475nm,方法学考察的各项RSD值均小于2%;优化出复方W最佳提取物制备工艺为:粉碎过60目筛网,选用溶媒75%乙醇,回流法提取2次,每次60min,溶媒用量每次为10倍;制备了中药复方W最佳提取物,以丁醇—醋酸—水(4:2:1)为展开剂,对提取物进行薄层色谱鉴别,对照品和对照品药材、供试品溶液的指示斑点一致,Rf值为0.55;药效学实验中药复方W最佳提取物在40mg/L,53小时对小瓜虫的杀灭率为100%,观察96h期间实验动物无异常情况。结论:中药复方W最佳提取物抗小瓜虫病安全有效,为开发新药提供了实验依据。
【图文】：

杀虫率,提取物,中药,小瓜虫

图 3-1 中药各方提取物 72h 杀虫率由上图表结果可知，药物浓度设计在 10、20、30、40、60、80、100、200mg/L时，该浓度范围内对小瓜虫没有明显杀灭作用的方有 ED、FD、GD、LD、MD、CK、HK、LK、HZ、MZ、QZ，最高杀虫率小于 20％；根据前面建立的抗小瓜虫药效评价方法，W 方提取物杀虫剂量为 60mg/L,杀虫率可达 100%，且未出现鱼死亡。因而，W 方是有效地杀灭小瓜虫的中药复方。显微镜观察比较使用复方 W 提取物前后小瓜虫病鱼，结果见下图 3-2、3-3所示：

镜检,给药,小瓜虫,杀虫率

图 3-1 中药各方提取物 72h 杀虫率由上图表结果可知，药物浓度设计在 10、20、30、40、60、80、100、200m时，该浓度范围内对小瓜虫没有明显杀灭作用的方有 ED、FD、GD、LD、MCK、HK、LK、HZ、MZ、QZ，最高杀虫率小于 20％；根据前面建立的抗小瓜虫效评价方法，，W 方提取物杀虫剂量为 60mg/L,杀虫率可达 100%，且未出现鱼亡。因而，W 方是有效地杀灭小瓜虫的中药复方。显微镜观察比较使用复方 W 提取物前后小瓜虫病鱼，结果见下图 3-2、所示：
【学位授予单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5

【参考文献】