基于数据挖掘分析探讨中药单体联合BMSCs移植修复软骨缺损的研究

发布时间：2020-06-14 04:31

【摘要】：目的:1、通过数据挖掘分析,探讨中医药治疗膝骨关节炎处方的用药规律。2、数据挖掘筛选临床治疗膝骨关节炎常用的中药,并选择其有效成分,联合BMSCs观察其膝骨关节炎软骨缺损的影响。方法:1、筛选截止日期至2017年12月相关期刊论文(Chinese National Knowledge Infrastructure,CNKI)、万方数据库及维普资讯数据库中有关中医药治疗膝骨关节炎的处方,基于SPSS软件运用数据挖掘方法,总结出高频率药物、药对、核心组合等,探讨治疗膝骨关节炎的组方规律。2、根据筛选出的的药物,采用其主要有效成分,运用CCK-8实验筛选出最佳浓度及最佳作用时间。构建膝关节软骨缺损模型,将健康新西兰大白兔随机分为模型组、中药单体组、BMSCs组、中药单体+BMSCs组,关节腔内注射4周后取材并进行ICRS组织学评分,HE及甲苯胺蓝染色观察修复效果。成果:1、文献研究最终筛选符合纳入标准的文献共140篇,对录入的140个方剂,一共有217味药物进行分析,其中出现频率较高的10味中药分别为牛膝、淫羊藿、当归、熟地、白芍、杜仲、鸡血藤、骨碎补、黄芪和川芎,并结合现代基础研究,筛选并运用淫羊藿的有效成分淫羊藿甙干预BMSCs。通过对频率前20位中药进行因子分析,挖掘中医药治疗膝痹用药的配伍规律,其中包括:桑寄生、独活;桂枝、白芍;补骨脂、鸡血藤;黄芪、当归;白术、茯苓;熟地、杜仲;木瓜、骨碎补;药物关联规则分析结果提示治疗膝痹处方的常用核心药物组合,包括牛膝、杜仲、熟地;当归、杜仲、白芍;淫羊藿、鸡血藤、熟地;牛膝、杜仲、白芍、当归等。2、CCK-8实验表明淫羊藿甙能够增强BMSCs活性,以luM的浓度最佳,最佳干预时间是72h;造模4周后,我们发现淫羊藿甙+BMSCs组软骨缺损面积较其他组明显减少,ICRS组织学评分明显优于较其他组(P0.05);HE染色剂甲苯胺蓝染色提示淫羊蕾甙+BMSCs组的修复组织和周围正常软骨组织更加接近。结论:1、通过数据挖掘分析,中医药治疗膝骨关节炎中常用的药物是牛膝与淫羊藿;常用药对以桑寄生、独活为主。通过数据挖掘方法有助于总结中医药处方的用药规律,对临床用药具有借鉴意义。2、淫羊蕾甙能够提高BMSCs活性,增强BMSCs的软骨修复作用。 【学位授予单位】：广州中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285

【图文】：

设置最低支持度１０％，最小置信度５０％，最大前项为１０，，对药物分别进行二阶、三阶、逡逑四阶关联规则分析，一共计算得到规则２１９条，其中，最低支持度为１０．邋０００％，最大逡逑支持度为２３．邋５７１％，关联规则图见图１，图中牛膝、熟地、淫羊蕾、杜仲、当归、白芍逡逑是关联度最大的药物组合。由此可知，牛膝、桑寄生组合出现的频率最高，白芍、桂逡逑枝次之。３味药核心组合当中，以牛膝、桑寄生、熟地出现频率最高。综合关联规则逡逑分析，桑寄生、牛膝、熟地、淫羊藿、杜仲、当归、白芍是治疗膝痹名方独活寄生汤逡逑的核心药物

３．２结果与分析逡逑３．邋２．邋１邋ＢＭＳＣｓ的培养及鉴定逡逑如图２所示，全骨髓贴壁培养３天后可见少许梭形细胞贴壁生长，培养７天后可逡逑见克隆球形成；第３代细胞培养４８天小时后，可长满９０％以上；第３代经分化１４天，逡逑茜素红染色和ＡＬＰ染色可见大部分细胞分化为成骨细胞；阿利新蓝染色可见大部分细逡逑胞可分化为成软骨细胞。以上说明经全骨髓贴壁培养获得的细胞为ＢＭＳＣｓ。逡逑■■■逡逑Ｐ（）３ｄ逦ＰＯ邋７ｄ逦Ｐ３邋４８ｈ逡逑Ａｌｉｚａｒｉｎ邋ｒｅｄ逦Ａｌｋａｌｉｎｅ邋ｐｈｏｓｐｈａｔｃａｓｃ逦Ａｌｃｉａｎ邋ｂｌｕｓｃ逡逑图２：ＢＭＳＣｓ的初代培养及成骨、成软骨分化（Ｘ１００）逡逑３．邋２．邋２淫羊藿甙对ＢＭＳＣｓ活性的影响。逡逑如图３所示，在干预７２ｈ内，０．邋ＯｌｕＭ、０．邋ｌｕＭ、１０ｕＭ淫羊藿甙对ＢＭＳＣｓ活性均具逡逑有增强作用，而１００ｕＭ的淫羊藿甙对ＢＭＳＣｓ无明显促进作用。干预７２ｈ时，ｌｕＭ淫羊逡逑１６逡逑

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本文编号：2712279