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大花旋覆花素调控ROS水平诱导人肝癌HepG2细胞凋亡研究

发布时间:2020-06-15 14:52
【摘要】:目的:本次研究的主要目的主要包括:①观察大花旋覆花素对于人肝癌HepG2细胞株增殖的影响;②观察大花旋覆花素对于人肝癌HepG2细胞株的凋亡的影响;③探讨大花旋覆花素诱导人肝癌HepG2细胞株凋亡的可能机制。方法:①MTT法,观察大花旋覆花素作用于人肝癌HepG2细胞株后对其增殖产生的影响;②Hoechst33342染色,观察大花旋覆花素对人肝癌HepG2细胞株凋亡的影响;③DCFH-DA探针法,观察大花旋覆花素对人肝癌细胞株ROS水平的改变;通过测定丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,以评估细胞的氧化应激状态;④Western blot免疫印迹法,检测大花旋覆花素对人肝癌HepG2细胞株中凋亡相关蛋白表达的影响。结果:①浓度为5 μmol/L、10 μmol/L和20 μmol/L的大花旋覆花素作用于人肝癌HepG2细胞株24 h后能够明显抑制细胞的增殖;②Hoechst 33342染色表明,大花旋覆花素作用人肝癌HepG2细胞株后,凋亡细胞明显增多;③大花旋覆花素作用于人肝癌HepG2细胞株24h后,细胞内活性氧(ROS)浓度升高;细胞内丙二醛(MDA)含量显著升高,超氧化物歧化酶(SOD)活性下降;④大花旋覆花素作用于人肝癌HepG2细胞株后,bcl-2表达明显下降,bax表达明显升高;用N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)处理后,bcl-2表达上升,bax表达下降。结论:①大花旋覆花素有抑制肝癌细胞株HepG2体外增殖的作用;②大花旋覆花素促进肝癌细胞凋亡;③大花旋覆花素通过诱导HepG2氧化应激状态,上调ROS水平来诱导人肝癌HepG2细胞株发生凋亡。
【学位授予单位】:延边大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:R285.5
【图文】:

细胞株,肝癌,凋亡


2(Huriol/L)作用于HepG2细胞株24h,测定大花旋覆花素对HepG2的增殖抑制逡逑率。结果显示,与对照组比较,大花旋覆花素对细胞的抑制率显著升高(尸<0_05),逡逑结果如图1所示。逡逑150-.逡逑本逡逑I邋loo-逦逦逡逑匕逦丁逡逑?-逦|逦|邋丨丁逡逑S邋50-逡逑O逡逑Control邋2.5逦5逦10逦20逡逑Britanin((.iM)逡逑图1.大花旋覆花素对肝癌HepG2细胞株增殖的影响逡逑*P<0.05邋与邋Control邋组相比逡逑3.2大花旋覆花素对人肝癌HePG2细胞株凋亡的影响逡逑本次实验中采用5pmol/L、10pmol/L、20pmol/L浓度的大花旋覆花素分别逡逑作为小剂量、中剂量和大剂量组作用于人肝癌HepG2细胞株24h后,细胞核变逡逑圆,染色质边聚,表明细胞发生了凋亡,实验结果如图2所示。逡逑22逡逑

细胞株,凋亡,肝癌,凋亡细胞


本次实验中采用5pmol/L、10pmol/L、20pmol/L浓度的大花旋覆花素分别逡逑作为小剂量、中剂量和大剂量组作用于人肝癌HepG2细胞株24h后,细胞核变逡逑圆,染色质边聚,表明细胞发生了凋亡,实验结果如图2所示。逡逑22逡逑

【参考文献】

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1 张金坤;王燕燕;;原发性肝癌发生机制及其治疗的研究进展[J];中国药房;2015年29期

2 魏海青;李军霞;王永利;;旋覆花素体外抗肿瘤作用研究[J];河北医药;2011年13期

3 张亚宏;甘莹;郭子华;谢松强;;紫草素通过ROS/p38信号通路诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡[J];中国药理学通报;2011年06期

4 潘永惠;赵节绪;;氧化应激与神经系统变性疾病[J];中风与神经疾病杂志;2008年06期

5 郝志敏;赵洁;巨名飞;;氧化应激在心血管疾病中的作用[J];中西医结合心脑血管病杂志;2008年08期

6 谢弋,庄志雄;Gr~(3+)、Gr~(6+)对鼠肺细胞线粒体膜电位改变及活性氧生成的研究[J];动物医学进展;2002年04期



本文编号:2714575

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