斑蝥经光合细菌生物转化后化学成分研究

发布时间：2020-06-17 22:39

【摘要】：斑蝥是芜菁科南方大斑蝥Mylabris phalerata Pallas或黄黑小斑蝥Mylabris cichorii Linnaeus的干燥虫体,临床上常用于治疗肿瘤及肝炎等疾病,尤其对原发性肝癌疗效显著。其体内分泌物斑蝥素是斑蝥抗肿瘤的有效成分,但斑蝥素对肾功能损伤很大,这在一定程度上限制了它的临床应用。本课题组前期通过药理实验证明斑蝥(Mylabris phalerata Pallas)经光合细菌(Photosynthetic Bacteria)生物转化后的毒性明显降低,且斑蝥转化液的乙酸乙酯和正丁醇萃取部位均对人肝癌细胞株HepG-2有抑制作用。本论文以体外抗肿瘤药理活性为向导,通过色谱法追踪、分离,波谱法鉴定及指纹图谱等方法,研究代谢后乙酸乙酯部位的活性物质,比较斑蝥经光合细菌代谢前后乙酸乙酯部位化学成分的异同,旨在阐明斑蝥经光合细菌代谢增效减毒的物质基础。主要的研究内容如下:1、斑蝥经光合细菌生物转化后乙酸乙酯部位化学成分研究。为探讨斑蝥经光合细菌生物转化后乙酸乙酯萃取部位的活性成分,以人肝癌细胞株Hep G-2体外抗肿瘤活性为向导,追踪活性部位,综合运用凝胶柱色谱法、高压半制备色谱法等多种分离纯化技术对乙酸乙酯部位中的化学成分进行研究,最终得到13个化合物,通过波谱特征和文献报道鉴定其结构,它们分别是N-羟乙基斑蝥胺(1),N-羟乙基-4a-甲基-7a-羟甲基-4,7-氧杂二环[2.2.1]-庚烷-1,3-二甲酰亚胺(2),N-[亚甲基-4'-(2'-羟基吡啶)]-斑蝥胺(3),N-[2'-(3',4'-二羟基苯基)乙酮基]-斑蝥胺(4),斑蝥胺(5),7a-羟甲基斑蝥胺(6),N-乙酰基酪胺(7),N-乙酰多巴胺(8),2-(3',4'-二羟基苯基)-3-乙酰氨基-6-(N-乙酰基-2''-氨基乙基)-1,4-苯并二恶烷(9),3-羟基-3-甲基二氢吲哚-2-酮(10),4-羟基异吲哚啉-1-酮(11),2-羟乙基-4-羟基异吲哚啉-1-酮(12),胸腺嘧啶(13)。13个化合物中,结构类型涉及斑蝥素衍生物(1-6),简单的酚性化合物(7-9),简单的吲哚生物碱(10-12)和碱基(13)。其中化合物2,3和4为新化合物,其它8个化合物(除化合物5和6外)为首次从斑蝥中分离得到。2、比较斑蝥经光合细菌生物转化前后HPLC色谱图峰形变化。在同一色谱条件下通过分析化合物与斑蝥经光合细菌代谢前后HPLC色谱峰变化来初步阐述斑蝥在生物转化前后内在化学成分的变化。HPLC结果显示,斑蝥经过光合细菌生物转化后,其内在化学成分发生了变化。3、化合物的抗肿瘤活性初步测试。利用CCK-8法,对分离得到的12个化合物(除化合物13外),在人肝癌细胞株HepG-2上进行了体外抗肿瘤活性测试。结果表明:化合物8和9对HepG-2细胞有一定的抑制生长趋势。
【学位授予单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R284
【图文】：

化合物

化合物2的1H-NMR谱

化合物,IR谱

化合物2的IR谱

【参考文献】