丹酚酸A对糖尿病周围神经病变的保护作用及机制研究

发布时间：2020-06-18 04:14

【摘要】：研究丹酚酸A对糖尿病周围神经病变的保护作用,并深入研究其作用机制。采用自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠给予丹酚酸A(0.3、lmg·kg-1)灌胃给药8周,观察小鼠体重、24h进食进水量、血糖、血脂、热痛阈、机械痛阈及坐骨神经传导速度的变化,扫描电镜检测坐骨神经髓鞘的超微结构变化,观察坐骨神经组织结构以及神经功能相关蛋白外周髓磷脂(P0)和神经生长因子(NGF)蛋白表达的变化。采用大鼠雪旺细胞(RSC96)建立高糖损伤模型,给予丹酚酸A体外孵育,观察氧化应激及线粒体功能的变化;RT-PCR检测炎症因子mRNA的表达水平;报告基因、RT-PCR联合高内涵筛选、Western blot及计算机分子对接方法全面评价丹酚酸A对Nrf2启动子活性、转录水平、核转位、对Keap1/Nrf2信号通路的影响,以及丹酚酸A与Nrf2蛋白活性位点的相互作用。结果发现,丹酚酸A能有效改善KK-Ay小鼠糖脂代谢异常;提高KK-Ay小鼠的机械痛阈,增加坐骨神经传导速度,减轻受损的坐骨神经髓鞘的超微结构变化,上调P0和NGF蛋白的表达。丹酚酸A体外孵育可明显保护高糖损伤的雪旺细胞活力,减少活性氧(ROS)的产生,降低总抗氧化能力(ABTS),降低氧化型谷胱甘肽(GSSG)和丙二醛(MDA)含量,上调抗氧化基因Sod、Gpx1 mRNA的表达。丹酚酸A显著下调高糖损伤RSC96细胞中Mcp1、Icam1、116、Tnfα、Cox2等炎症因子mRNA表达;增加线粒体含量,促进线粒体ATP产生,恢复线粒体膜电位,减少线粒体ROS的产生从而改善线粒体功能。丹酚酸A可明显抑制Nrf2启动子活性,下调Nrf2 mRNA表达水平,却促进Nrf2核转位,同时证实丹酚酸A可与Nrf2蛋白的多个活性位点直接结合。综合上述结果,丹酚酸A具有明显改善糖尿病周围神经病变的作用,其机制可能与Nrf2介导的抗氧化应激、抗神经炎症及改善线粒体功能有关。作为保护糖尿病周围神经病变的药物,丹酚酸A具有较好的临床应用前景。
【学位授予单位】：哈尔滨商业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5
【图文】：

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酚酸Ａ对２型糖尿病ＫＫ－Ａｙ小鼠２４小时进食进水量的影响。ＫＫ－办小鼠灌胃给予丹酚酸Ａ邋８周，逡逑时进食（Ａ）进水（Ｂ）量。数据表示为ｍｅａｎ±ＳＥＭ，邋ｎ邋＝邋８－１０。＊，户＜０．０５，＊＊＊，邋Ｐ＜０．００５与ＤＭ逡逑Ｅｆｆｅｃｔ邋ｏｆ邋ＳａｌＡ邋ｏｎ邋２４邋ｈ邋ｆｏｏｄ邋ｉｎｔａｋｅ邋ａｎｄ邋ｗａｔｅｒ邋ｉｎｔａｋｅ邋ｉｎ邋ｔｙｐｅ邋２邋ＫＫ－＾Ｖ邋ｄｉａｂｅｔｉｃ邋ｍｉｃｅ．邋ＳａｌＡ邋ｗａｓ邋ｏｒａｌｌｙ逡逑ｄ邋ｔｏ邋ＫＫ－Ａｙ邋ｍｉｃｅ邋ｆｏｒ邋ｅｉｇｈｔ邋ｗｅｅｋｓ邋ａｎｄ邋２４邋ｈ邋ｆｏｏｄ邋ｉｎｔａｋｅ邋（Ａ）邋ａｓ邋ｗｅｌｌ邋ａｓ邋ｗａｔｅｒ邋ｉｎｔａｋｅ邋（Ｂ）邋ｗｅｒｅ邋ｍｅａｓｕｒｅｄ．逡逑ｓｅｎｔｅｄ邋ａｓ邋ｍｅａｎ邋土邋ＳＥＭ，邋ｎ邋＝邋８－１０？＊，尸邋＜０．０５，邋＊＊＊，尸邋＜０．００１邋ｃｏｍｐａｒｅｄ邋ｗｉｔｈ邋ＤＭ邋ｇｒｏｕｐ．逡逑酚酸Ａ降低ＫＫ－办小鼠禁食血糖逡逑结果如Ｔａｂｌｅ．邋２－４－４和Ｆｉｇ．邋２－４－３所示，在连续８周给药过程中，ＫＫ－４ｙ小鼠相较于正逡逑鼠血糖显著持续升高。在给药后第６、８周时，丹酚酸Ａ各剂量组和Ｖａｌ组均可明显逡逑办小鼠的禁食血糖，ＳａｌＡ邋１邋ｍｇ／ｋｇ与Ｖａｌ邋２０邋ｍｇ／ｋｇ的降血糖作用相近。逡逑表２－４－４丹酚酸Ａ对２型糖尿病ＫＫ－４ｙ小鼠禁食血糖的影响逡逑Ｔａｂｌｅ．邋２－４－４邋Ｅｆｆｅｃｔ邋ｏｆ邋ＳａｌＡ邋ｏｎ邋ｆａｓｔｉｎｇ邋ｂｌｏｏｄ邋ｇｌｕｃｏｓｅ邋ｏｆ邋ｔｙｐｅ邋２邋ＫＫ－Ａｙ邋ｄｉａｂｅｔｉｃ邋ｍｉｃｅ．逡逑ｅｋ）逦ＮＣ逦ＤＭ逦ＳａｌＡ０．３ｍｇ／ｋｇ逦ＳａｌＡ邋ｌｍｇ／ｋｇ逦Ｖａｌ逡逑５．００邋±０．０２＊＊＊逦１６．３０邋土邋０．

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

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本文编号：2718677