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玉液汤对2型糖尿病肾病大鼠足细胞及相关蛋白表达影响的实验研究

发布时间:2020-06-18 11:43
【摘要】:目的:通过检测糖尿病肾病模型大鼠24小时尿蛋白排泄量、肾指数、血清生化指标、大鼠肾足细胞Nephrin和Podocin蛋白表达水平及电镜下观察肾足细胞形态改变,评估玉液汤对糖尿病肾病大鼠足细胞的保护作用,探讨其中可能存在的机制,为临床玉液汤防治糖尿病肾病提供部分的理论和实验依据。方法:选用SD雄性大鼠48只,随机分为6组,分别为正常组、模型组、玉液汤低剂量组、玉液汤中剂量组、玉液汤高剂量组、二甲双胍组,每组8只。通过高脂高糖饲料喂养联合低剂量链脲佐菌素左下腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。各组每日定时灌胃1次,玉液汤低剂量组予以生药含量为2g/3ml的药液、中剂量组予以生药含量为4g/3ml的药液、高剂量组予以生药含量为5g/3ml的药液,二甲双胍组予以二甲双胍90mg/3ml的混悬液,正常组、模型组予以生理盐水3ml灌胃,药物干预治疗8周。检测各组大鼠24小时尿蛋白排泄量、肾指数、血清生化指标(尿素氮、血糖、肌酐)、电镜观察肾足细胞形态改变,采用免疫荧光及半定量方法分析足细胞裂孔蛋白Nephrin、Podocin的表达。结果:1.24h尿蛋白排泄量:模型组大鼠24h尿蛋白排泄量明显高于正常组,其差异具有统计学意义(P0.05);玉液汤高剂量组、二甲双胍组大鼠24h尿蛋白排泄量明显低于模型组大鼠,其差异具有统计学意义(P0.05);低剂量组、中剂量组24h尿蛋白排泄量低于模型组大鼠,其差异无统计学意义。2.DN大鼠肾指数:模型组大鼠肾指数明显高于正常组大鼠,其差异具有统计学意义(P0.05);高剂量组、二甲双胍组大鼠肾指数明显低于模型组大鼠,其差异具有统计学意义(P0.05);低剂量组、中剂量组大鼠肾指数低于模型组大鼠,差异无统计学意义。3.大鼠血清生化指标:与正常组大鼠相比,模型组大鼠血糖、血肌酐、尿素氮明显增高,其差异均具有统计学意义(P0.05)。玉液汤高剂量组、二甲双胍组与模型组大鼠比较血糖、血肌酐、尿素氮明显降低,其差异具有统计学意义(P0.05)。4.光镜下观察肾组织病理变化:正常组大鼠肾组织未见明显病理改变;模型组大鼠肾小球肥大、肾小管变形;玉液汤高剂量组、二甲双胍组大鼠肾组织病理改变较模型组明显减轻。5.透射电镜下观察肾的超微结构了解足细胞病变的影响:正常组大鼠足突细胞未见明显病理改变,模型组大鼠足突细胞足突融合、足突裂孔数减少、裂孔隔膜消失;玉液汤高剂量组、二甲双胍组大鼠足突细胞损伤较模型组大鼠损伤轻。6.大鼠足细胞nephrin和podocin蛋白表达:免疫荧光下足细胞裂孔蛋白nephrin和podocin在正常组大鼠的表达明显高于其他各组,其差异具有统计学意义(P0.05),玉液汤高剂量组、二甲双胍组nephrin和podocin蛋白的表达明显高于模型组大鼠,其差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:1.高脂高糖饲料喂养联合低剂量链脲佐菌素的方法可以有效建立糖尿病肾病大鼠模型。2.玉液汤、二甲双胍均能改善糖尿病肾病大鼠足细胞的病理变化,玉液汤高剂量组较低剂量组、中剂量组效果更为显著。3.玉液汤可能通过提高模型大鼠肾脏nephrin和podocin的表达达到对肾足细胞的保护作用。
【学位授予单位】:湖北中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:R285.5
【图文】:

大鼠,排泄量,低剂量,二甲双胍


玉液汤低剂量组大鼠死亡1只,剩余7只;玉液汤高剂量组大鼠死亡1只,剩余7只;玉液汤中剂量组、二甲双胍组均无大鼠死亡。4.2 玉液汤对DN大鼠尿蛋白影响的比较(见图1)由图1实验结果显示,治疗8周后模型组和治疗组大鼠24h尿蛋白排泄量明显高于正常组,模型组、低剂量组、中剂量组与正常组相比有非常显著性差异(P<0.01);玉液汤中剂量组、高剂量组、二甲双胍组24h尿蛋白排泄量低于模型组大鼠,其差异具有统计学意义(P<0.05);玉液汤低剂量组24h尿蛋白排泄量虽低于模型组大鼠,但差异不具有统计学意义。图 1 各组大鼠 24h 尿蛋白比较注:与正常组比较:*P<0.05,**P<0.01;与模型组比较:#P<0.05。4.3 玉液汤对DN大鼠肾重指数影响的比较(见图2)由图2实验结果显示:治疗组、模型组大鼠肾重指数明显高于正常组大鼠,有非常显著性差异(P<0.01);玉液汤高剂量组、二甲

体重,大鼠,尿蛋白,显著性差异


图 1 各组大鼠 24h 尿蛋白比较注:与正常组比较:*P<0.05,**P<0.01;与模型组比较:#P<0.05。4.3 玉液汤对DN大鼠肾重指数影响的比较(见图2)由图2实验结果显示:治疗组、模型组大鼠肾重指数明显高于正常组大鼠,有非常显著性差异(P<0.01);玉液汤高剂量组、二甲

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