补肾聪耳方对庆大霉素致聋大鼠耳蜗P38MAPK的影响

发布时间：2020-06-22 07:40

【摘要】：目的本实验意在评估补肾聪耳方对药物性耳聋大鼠的治疗作用,同时研究该方剂对细胞凋亡信号通路P38MAPK的影响。通过对比三组大鼠的一般状态、体重变化、听力变化、血cAMP和cGMP的改变、耳蜗病理切片以及耳蜗P38蛋白的表达从而整体的评估补肾聪耳方的治疗作用,以期为临床使用补肾聪耳方防治药物性耳聋提供实验室依据。方法将通过ABR听力筛查的SD大鼠(45只),按照随机数字表法分为3组(空白组、模型组、中药组),中药组及模型组采用肌肉注射庆大霉素(100 mg·kg~(-1)·d~(-1))连续14天的方法制造药物性耳聋大鼠模型,中药组在造模的基础上给予补肾聪耳方灌胃,空白组注射并灌胃等量生理盐水。观察三组大鼠一般情况,测量大鼠体重上升的差距,ABR测听力下降幅度。实验第15天取材,测量大鼠血浆cAMP和cGMP含量,使用HE染色法观察大鼠耳蜗病理改变,采用Western-Blot法和RT-PCR法检测大鼠耳蜗P38蛋白的含量。结果(1)一般状态评价模型组及中药组大鼠一般状态出现改变,空白组大鼠表现正常。中药组大鼠与模型组大鼠均出现了躁动不安,容易受到惊吓,怕人怕物,食量明显减少,但饮水增多,体重增长缓慢,大便干,尿量明显减少等一系列表现。但与模型组大鼠相比,中药组大鼠一般状态明显优于模型组。(2)体重增长幅度三组大鼠两周后体重评估,空白组、模型组和中药三组相比,空白组平均体重最高,增长速度最快。空白组与模型组相比,空白组体重增长快(P0.01),空白组与中药组相比,空白组体重增长快(P0.01),模型组与中药组相比,中药组体重增加较快(P0.05)。(3)血浆cAMP和cGMP值比较模型组与空白组相比cAMP/cGMP值上升(P0.05),中药组与空白组相比cAMP/cGMP值上升(P0.05),模型组与中药组相比,模型组cAMP/cGMP值较高P0.05)。(4)ABR测听比较三组大鼠ABR阈值相比空白组最低,其次是中药组,最后是模型组。空白组与模型组相比其ABR阈值最低(P0.01),空白组和中药组相比,其ABR阈值最低(P0.01);模型组与中药组相比,中药组ABR阈值较低(P0.01)。(5)耳蜗病理切片比较空白组大鼠耳蜗切片正常。模型组大鼠和中药组大鼠耳蜗病理切片均出现毛细胞数量减少,排列不规则,螺旋神经节数量减少等情况。但整体上看,中药组病理切片相对模型组较好。(6)耳蜗P38蛋白含量Western-Blot与RT-PCR结果均显示:与模型组和中药组相比,空白组P38蛋白的表达偏低(P0.05),而中药组与模型组相比,中药组P38蛋白的表达相对较低(P0.05)。结论三组大鼠ABR阈值的情况以及病理切片表明,药物性耳聋大鼠模型造模成功,结合大鼠一般状态、体重变化以及cAMP/cGMP值提示模型组与中药组两组大鼠整体状态与中医肾虚证型耳聋相似。中药组大鼠ABR阈值的改善以及耳蜗病理切片结果提示补肾聪耳方对药物性耳聋大鼠有一定的防治作用,因此采用补肾法治疗药物性耳聋方法可行。三组大鼠耳蜗P38蛋白表达提示庆大霉素所致药物性耳聋发病机制可能与开启MAPK细胞凋亡通道有关。而采用补肾聪耳方能有效抑制P38MAPK通道的开启从而对药物性耳聋起到防治作用。
【学位授予单位】：山西中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5
【图文】：

表 1-3 大鼠 ABR 阈值（dBSPL）图 1-2a 提示：给药前三组大鼠 ABR 阈值较低，且差距不明显。T 组C 组M 组T 组M 组图 1-2b 提示：给药后三组大鼠 ABR 阈值出现差距，C 组最低，其次是 T 组，最后是 M 组。C 组C 组 T 组 M 组

10表 1-3 大鼠 ABR 阈值（dBSPL）注：与空白组相比▲P＜0.01，与模型组相比＃P＜0.05。用药前比较：C 组与 M 组相比，大鼠 ABR 阈值无明显差距（P＞0.05）；T 组与组别 动物数（只） 给药前 给药后空白组（C）模型组（M）中药组（T）1515159.375 2.997 8.750 2.1658.750 3.307▲37.500 5.590▲9.375 3.903＃22.500 4.330＃T 组C 组M 组图 1-2b 提示：给药后三组大鼠 ABR 阈值出现差距，C 组最低，其次是 T 组，最后是 M 组。

【参考文献】

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本文编号：2725410