佛手物质基础及质量评价研究

发布时间：2020-06-22 09:25

【摘要】：佛手为芸香科植物佛手Citrus medica L.var.sarcodactylis Swingle.的干燥果实,是岭南地区的道地药材,具有疏肝理气、和胃止痛、燥湿化痰的功效。本研究拟建立佛手药材HPLC指纹图谱,将指纹图谱结合模式识别方法分析不同产地佛手药材,对佛手药材的化学物质基础进行系统研究,并探讨不同产地佛手药材的特征成分,并从含量测定角度完善佛手的质量评价标准,结合近红外建立质量快速评价方法,实现佛手药材的快速质量评价。1.本章建立佛手HPLC指纹图谱,并首次将佛手指纹图谱结合模式识别方法分析不同产地佛手,结果表明同一产地佛手相似度较高,不同产地佛手具有差异。其中广东、广西相似度较为相近,四川佛手与两广佛手略有差异,浙江金佛手与两广、四川佛手均具有明显差异。2.本章运用LC-MS,建立了佛手快速定性的方法,最终共鉴定出24个化学成分,其中12个黄酮类成分、10个香豆素类成分和2个柠檬苦素类。采用GC-MS分析广东、广西、江西、四川、浙江的挥发性成分,总的挥发油含量分别达到93.91%、74.79%、85.06%、99.15%和91.96%。从其成分上分析,其中含氧单萜是主要的共有成分。单萜类,倍半萜,含氧倍半萜是导致不同产地佛手产生差异的主要成分。将非靶向代谢组学的方法用于不同产地佛手的研究,通过LC-Q TOF MS获得大量的数据,经过一系列的统计筛选方法,最终筛选得到28个化合物,并确认东莨菪亭是区别不同产地佛手的特征成分之一。PCA结合28个化合物实现佛手的产地判别。PLSDA基于28个化合物建立了一个良好的预测模型,实现佛手的产地识别。3.通过对63批佛手水分及浸出物的含量测定,可按国家药典委员会的要求初步拟定,佛手药材的含水量不得过15%和醇溶性热浸出物不得少于15%;采用紫外分光光度法测定总黄酮和多糖含量,比较四个产地佛手药材中总黄酮和多糖含量,结果表明浙江佛手总黄酮含量的整体水平最高,四川佛手总黄酮含量次之;市售不同产地佛手多糖含量存在差异,广东佛手的多糖量最高,广西次之,四川和浙江的多糖量较为接近,但四川佛手含量波动较大,浙江佛手的波动范围最小,相对稳定;建立了HPLC-DAD同时测定佛手中的6个化学成分的方法,该方法简单,线性关系良好,并对六个化学成分含量进行分析,结果表明圣草次苷,橙皮苷,异莨菪亭,滨蒿内酯在四川佛手中含量最高,但是四川佛手中的化学成分的含量差异较大,可能与其本地环境等因素有关。广东佛手的整体化学成分含量均一,波动较小。浙江佛手的野漆树苷的含量最大,而甲氧基香豆素在四个产地的佛手中的含量无显著性差异。综合以上考虑,佛手的含量均接近或大于平均值,且含量分布稳定,表明广东佛手的质量较佳。4.本章将近红外光谱通过光预处理及波段选择之后,结合佛手中的水分、浸出物、总黄酮、多糖含量建立快速含量测定模型。所建模型实现预测值与真实值有较小的偏差,并且能够实现快速无损测定,对佛手质量的快速评价具有现实意义。本课题较为系统的研究了佛手的物质基础,对佛手进行佛手全面定性分析,筛选得到了不同产地佛手的特征成分,并对其化学成分进行定量分析并建立近红外含量测定模型为佛手质量评价及其应用提供依据。
【学位授予单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R284.1
【图文】：

图 2-2 佛手 HPLC 对照指纹图谱及共有峰表 2-3 25 佛手相似度评价结果编号 产品名称 相似度 序号 产品名称 相似度S1 GD01 0.963 S14 GX03 0.938S2 GD02 0.968 S15 GX04 0.970S3 GD03 0.942 S16 GX05 0.959S4 GD04 0.846 S17 GX06 0.959S5 GD05 0.959 S18 SC01 0.924S6 GD06 0.878 S19 SC02 0.934S7 GD07 0.920 S20 SC03 0.926S8 GD08 0.968 S21 SC04 0.811S9 GD09 0.966 S22 SC05 0.945S10 GD10 0.978 S23 ZJ01 0.739S11 GD11 0.957 S24 ZJ02 0.822S12 GX01 0.861 S25 ZJ03 0.857S13 GX02 0.917

图 2-3 25 批佛手聚类分析结果2.6.2 主成分分析（principal components analysis，PCA）将 25 批佛手样品所得峰面积导入 SIMCA-P+13.0（Demo），采用 PCA 方行分析，25 批样品的得分图见图 2-4。表明样品间的聚类情况，25 批样品可 4 组，其中浙江与广东、广西、四川偏离较远，四川与广东、广西有略微差异西、广东聚类程度较高，GD05 和 GD08 为广东产地的离群点，此结果与 CA一致。

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本文编号：2725530