葛根素对缺氧型肺动脉高压大鼠细胞增殖的影响

发布时间：2020-06-24 15:33

【摘要】：目的:通过观察葛根素对缺氧型肺动脉高压大鼠在体模型中缺氧指标和细胞模型中细胞增殖的影响,探讨其可能的作用机制,为临床的应用提供理论依据。方法:采用实验室自行组装的常压低氧培养箱培养大鼠建立大鼠的缺氧模型:选取清洁级大鼠60只,随机分成三组,即正常对照组、缺氧模型组、葛根素治疗组,在实验室正常环境下进行正常组培养,于缺氧环境下进行缺氧组培养,按计划培养3 d、7 d、14 d、21 d后进行相关的检测。测定的项目包括:肺动脉平均压力(mPAP)、右心室肥厚指数(RVHI)、肺组织中超氧化物歧化酶活性(SOD)、丙二醛(MDA)含量等。采用胶原酶消化法培养大鼠原代肺动脉平滑肌细胞(PASMC),培养成功后建立大鼠肺动脉平滑肌细胞的高C02低02缺氧模型。实验分组为模型组和葛根素不同浓度(50μ mol/L、100 μ mol/L、200 μ mol/L)干预组,分别放置于缺氧环境进行培养,培养24h后进行数据检测。数据监测采用倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测PASMC活性,观察对缺氧导致的细胞增殖的作用。结果:1.肺动脉平均压力结果比较:缺氧模型组大鼠随着缺氧时间的增加mPAP明显升高,14 d、21 d时mPAP高于正常对照组明显,差异具有显著性(P0.05);与缺氧模型组比较,14d、21d时葛根素组的mPAP明显升高(P0.05)。2.右心室肥厚指数结果比较:缺氧模型组大鼠的右心肥厚指数随着缺氧时间的增加明显增高,差异具有显著性(P0.05);葛根素组大鼠的右心肥厚指数也有一定的升高,14 d时与缺氧组比较,差异具有显著性(P0.05);葛根素组21 d数值的升高开始均匀的减缓,与缺氧组比较具有显著性差异(P0.01)。3.超氧化物歧化酶活性数值比较:缺氧模型组大鼠中SOD活性会随着缺氧时间的增加而明显降低,从14 d开始分析发现数据差异具有显著性(P0.05);葛根素治疗组大鼠的超氧化物歧化酶活性也有一定程度上的降低,14d时的数值与缺氧组比较,差异具有显著性(P0.05);葛根素组21 d的数值的降低开始均匀减缓,与缺氧模型组比较具有显著性差异(P0.01)。4.丙二醛含量的结果比较:缺氧模型组大鼠中丙二醛含量会随着缺氧时间的增加而明显升高,14d开始测定数值与正常对照组相比,差异具有显著性(P0.05);葛根素治疗组大鼠的丙二醛含量也有一定程度的升高,14d的数值与缺氧组分析比较,差异具有显著性(P0.05);葛根素治疗组21 d的数值升高开始均匀减慢,与缺氧模型组数值统计比较,具有显著性差异(P0.01)。5.PASMCs的培养和形态观察:采用胶原酶消化法培养肺动脉平滑肌细胞成功率,可行性很强。采用倒置显微镜进行显微观察:细胞贴壁生长良好,细胞呈不规则的三角形或长梭形,符合肺动脉平滑肌细胞的生理特点,呈并行排列或簇状生长(表1A),生长繁殖达到90%融合时,表现出典型血管平滑肌细胞"峰、谷"状生长的特点(表1B)。6.葛根素对缺氧诱导的PASMC增殖的作用比较:葛根素干预的最佳浓度为100μg/mL。葛根素可以显著的抑制缺氧导致的PASMC的增殖,从而减轻缺氧导致的肺血管重构,对缺氧性肺动脉高压的治疗有指导作用。结论:葛根素能有效抑制缺氧导致的肺动脉平均压力增加及氧自由基增加,减轻其肺血管重构的程度,对缺氧性肺动脉高压有良好的治疗作用和预防保护作用。葛根素对肺动脉平滑肌细胞有保护作用,对于缺氧导致的PASMC增殖和肺血管的重构,葛根素有明显的抑制和减轻效果,证明其对缺氧性肺动脉高压有良好的保护和治疗效果。
【学位授予单位】：黑龙江中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【参考文献】