淫羊藿苷和宝藿苷I对气管切开大鼠早期肺部炎症及免疫指标的影响

发布时间：2020-06-24 21:41

【摘要】：目的:观察淫羊藿苷和宝藿苷I干预气管切开模型大鼠,在早期不同时间点(24 h、72 h、168 h)肺组织病理形态学、肺组织中?防御素-2(rBD2)mRNA相对表达量,肺泡灌洗液中IL-6、TNF-?和sIgA,外周血T细胞亚群和IL-6以及肺泡灌洗液和外周血中rBD2含量的变化。探讨淫羊藿苷和宝藿苷I对气管切开大鼠早期肺部炎症的干预效果。方法:将72只SPF级雄性SD大鼠随机分成空白对照组(A)、模型非用药组(B)、模型+宝藿苷I组(C)和模型+淫羊藿苷组(D),每组18只。参照经典文献制备大鼠气管切开模型。成功造模约6 h后,C组灌胃宝藿苷I、D组灌胃淫羊藿苷,A、B组灌胃等量生理盐水。观察并记录实验大鼠一般情况。每组分别在第24 h、72 h、168 h采集6只大鼠外周血、肺泡灌洗液及肺组织。应用流式细胞技术检测外周血T细胞亚群(CD3~+,CD4~+,CD8~+),并计算CD4~+/CD8~+值;实时荧光定量PCR(qPCR)检测肺组织中rBD2 mRNA相对表达量;ELISA检测肺泡灌洗液中rBD2、sIgA、IL-6、TNF-?及血清中rBD2、IL-6含量;HE染色肺组织切片,光镜下观察肺组织病理形态学变化,并进行肺组织病理评分。结果:(1)实验大鼠一般情况A组大鼠一般情况良好。B组大鼠开始阶段活动量增加、精神状态明显较A组活跃且易激惹,但随着时间延长,活动量减少、精神状态逐渐倦怠,气管导管内以及口鼻可见黄色粘稠分泌物,呼吸急促,伴有痰鸣,进食、饮水量减少,皮毛干燥、无光泽。C、D组开始易激惹,随着用药时间延长,精神状态、进食饮水逐渐恢复,导管及口鼻分泌物较少,呼吸逐渐均匀,皮毛可见光泽。(2)肺组织病理形态学变化及病理评分B组肺组织损伤随时间延长逐渐加重,病理评分均明显高于A组正常大鼠(均P(27)0.05),呈升高趋势;C组损伤程度较B组轻,随着时间延长,肺泡融合数目减少,间隔变窄,肺泡腔、支气管管腔及周围炎性细胞逐渐减少,病理评分在168 h明显低于B组(P(27)0.05);D组肺组织病理损伤程度轻于B、C组,且随着时间延长,肺组织结构逐渐恢复至正常组水平,在72 h、168 h病理评分明显低于B组(均P(27)0.05),且D组在24 h、168 h病理评分明显低于C组(均P(27)0.05)。(3)肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α含量B组肺泡灌洗液中IL-6和TNF-?含量在三个时段均明显高于A组(均P(27)0.05)。C、D两组在72 h、168 h均明显低于B组同时段水平(均P(27)0.05);且C、D组组内IL-6和TNF-?含量在72 h、168 h均明显低于24 h(均P(27)0.05);且D组TNF-α在72 h、168 h均明显低于C组(均P(27)0.05)。(4)肺泡灌洗液中sIgA含量B组肺泡灌洗液中sIgA含量在第24 h明显高于A组(P(27)0.01),随后逐渐降低;C、D两组sIgA含量在72 h、168h明显高于B组(P(27)0.05);且D组在168 h明显高于C组(P(27)0.01)。(5)肺组织中rBD2 mRNA表达B组气切大鼠第24 h rBD2 mRNA表达明显升高(P(27)0.01),随后逐渐降低,72 h、168 h明显低于A组(P(27)0.05);C组在168 h明显高于B组(P(27)0.05);D组在第72 h、168 h明显高于B、C组(均P(27)0.05)。(6)肺泡灌洗液和外周血中rBD2含量B组肺泡灌洗液rBD2含量在168 h明显低于A组(P(27)0.05),而血清中rBD2与A无明显统计学差异;C、D两组BALF中rBD2含量在72 h、168 h明显高于B组(P(27)0.05);且D组rBD2含量在168 h明显高于C组(P(27)0.01)。血清中rBD2,C组在168 h明显高于B组(P(27)0.01),D在72 h、168 h均明显高于B组(P(27)0.05),且D组三个时段均明显高于C组(P(27)0.05)。(7)外周血血清中IL-6含量B组在72h明显降低(P(27)0.01),C、D两组IL-6含量在三个时段均明显低于A、B组(P(27)0.05)。且D组在168h明显低于C组(P(27)0.05)。C、D两组组内各时段IL-6含量无明显变化。(8)外周血中T细胞亚群B组外周血T细胞亚群CD3~+在24 h明显降低(P(27)0.05),但是CD4~+、CD8~+与A组无明显统计学差异(P(29)0.05)。C组CD3~+在24 h明显高于B组(P(27)0.05),D组CD3~+在24 h、168 h明显高于B组(P(27)0.01),C组CD4~+在168 h明显高于B组(P(27)0.05),D组CD4~+在72 h、168 h明显高于B组(均P(27)0.05);且D组CD3~+、CD4~+在168 h均明显高于C组(P(27)0.05)。C组CD8~+在72 h、168 h明显低于B组(均P(27)0.05);D组与B组无显著性差异(P(29)0.05);C组CD4~+/CD8~+值与B组无显著性差异(P(29)0.05);D组CD4~+/CD8~+值在168 h明显高于A、B、C三组(均P(27)0.05)。结论:淫羊藿苷和宝藿苷I对气管切开大鼠早期肺部炎症具有一定的治疗作用。该作用可能与降低肺泡灌洗液中IL-6、TNF-?及外周血IL-6含量,减轻肺组织病理损伤,提高肺泡灌洗液中sIgA含量,肺部和外周血中rBD2表达,降低外周血CD8~+百分比,提高CD4~+、CD4~+/CD8~+比值有关。从各指标结果综合来看,淫羊藿苷效果优于宝藿苷I。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5
【图文】：

病理变化,HE染色,淫羊藿苷,肺泡灌洗液

组大鼠肺组织病理变化（HE 染色, 100）athological changes of lung tissue in each group of rats (HE staining, 100)常对照组，B：模型非用药组，C：模型+宝藿苷 I 组，D：模型+淫羊藿苷组。ormal control group, B : Model non-medication group, C: Model+baohuoside I group, D:riin group.灌洗液中 IL-6、TNF-α含量组大鼠气管切开插管后肺泡灌洗液中 IL-6 和 TNF- 含量在三个时高于 A 组，且有显著性差异（P = 0.003、0.000、0.003；0.004、0.0C、D 两组分别用宝藿苷 I 和淫羊藿苷干预后， IL-6、TNF-α 含、168 h 均明显低于 B 组，差异有显著性（P 0.05）；且 C、D 组和 TNF- 含量在 72 h、168 h 均明显低于 24 h，有显著性差异（D 组与 C 组相比，IL-6 含量差异无显著性（P 0.05）。D 组 TN

淫羊藿苷,模型,外周血T细胞亚群,外周血

43图 5-2 各组外周血 T 细胞亚群A：正常对照组，B：模型非用药组，C：模型+宝藿苷 I 组，D：模型+淫羊藿苷组Figure 5-2 Peripheral blood T cell subsets of each groupA: Normal control group, B: Model non-drug group, C: Model + Baohuoside I treatment group,D: Model + Icariin treatment group

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