新晶型DL1505抗糖尿病并发肝损伤作用及机制研究

发布时间：2020-06-28 01:59

【摘要】：随着全球糖尿病发病人数的增加,糖尿病肝损伤患者的死亡率在逐年上升。然而目前临床上并没有疗效确切的治疗糖尿病肝损伤的药物,因此研究防治糖尿病肝病的药物具有重要意义。新晶型DL1505是一种具有新晶型状态的异黄酮类化合物,早期研究证明,该化合物具有降血糖、降血脂、抗氧化、抗肝损伤等广泛药理作用。本实验室通过晶型研究,发现了新的晶型,初步研究结果提示新晶型药物DL1505相比于原料药晶型具有给药后吸收快,最大血药浓度高,维持时间长等优点。本文研究了新晶型DL1505对血糖、糖尿病合并肝损伤的作用和机制,并初步探讨其药代动力学特征。第一章新晶型DL1505对1型糖尿病小鼠糖脂代谢和肝功能的作用及机制研究本研究通过对C57/BL6J小鼠腹腔注射130 mg·kg-1链脲佐菌素建立1型糖尿病小鼠模型,连续3周灌胃给予不同剂量新晶型DL1505(100、200、400mg·kg-1)。测定动物体重、进食饮水量、血糖、血脂、口服糖耐量、血浆胰岛素及肝功能,观察胰腺组织病理学变化。实验结果表明,新晶型DL1505能够减少1型糖尿病小鼠的食水摄入量,降低空腹血糖、餐后血糖以及血脂水平,改善糖脂代谢异常,其作用机制可能与改善1型糖尿病小鼠糖耐量和胰岛组织损伤,增加胰岛素分泌有关。同时,新晶型DL1505能够降低1型糖尿病小鼠肝脏MDA的量和ALT、AST水平,增加SOD活力和GSH生成,改善肝功能。结果提示,新晶型DL1505对1型糖尿病肝病具有一定的改善作用,作用机制与改善肝脏氧化应激有关。第二章新晶型DL1505对2型糖尿病大鼠肝损伤的作用及机制研究本研究采用高糖高脂饮食联合腹腔注射45 mg·kg-1链脲佐菌素诱导建立2型糖尿病大鼠模型。2型糖尿病大鼠经新晶型DL1505(100 mg·kg-1)灌胃给药8周,观察体重、进食饮水量、血糖、血脂、肝功能、肝脏组织学及氧化应激反应的变化;免疫组化方法检测肝脏组织CD68,α-SMA和TGF-β1的表达;RT-PCR检测肝组织炎症因子mRNA表达;Western blot检测NF-κB和TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白表达。实验结果表明,新晶型DL1505能够改善2型糖尿病大鼠糖脂代谢异常,增强SOD活力,减少MDA和8-OHdG含量,降低ALT,AST水平。病理组织学结果显示新晶型DL1505能够缓解2型糖尿病大鼠肝脏脂肪变性,改善肝脏炎症和纤维化病变。进一步研究表明,新晶型DL1505能够降低2型糖尿病大鼠肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子的mRNA和蛋白表达水平,抑制肝纤维化相关蛋白TGF-β1、p-Smad2/3、α-SMA的表达。结果提示,新晶型DL1505可减轻2型糖尿病大鼠肝脏炎症和纤维化,作用机制可能与抑制NF-κB和TGF-β1/Smad信号通路的激活有关。第三章新晶型DL1505在恒河猴体内的药代动力学初步研究本研究建立了LC-MS检测血浆样品中新晶型DL1505药物浓度的方法,并初步探讨新晶型DL1505在恒河猴体内的药代动力学特点。结果显示,本研究建立的检测方法能够简单、快速、灵敏地对目标化合物进行测定,且不受血浆杂质干扰。恒河猴口服新晶型DL1505后,2小时可达最大血药浓度,半衰期8.1小时,Cmax为492.981ng·mL-1,AUC(0-t)为3365.58 ng·mL-1*h。综上所述,新晶型DL1505可缓解糖尿病动物多食多饮的症状,调节糖脂代谢异常,改善糖尿病动物氧化应激和肝脏炎症、纤维化病变。作用机制研究表明,新晶型DL1505可通过抑制炎症NF-κB信号通路和纤维化TGF-β1/Smad信号通路的激活改善糖尿病大鼠肝脏炎症和纤维化。本研究提示新晶型DL1505有可能成为防治糖尿病肝病的有效药物。
【学位授予单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5;R284
【图文】：

葛根,药材

主治表证发热，热病口渴，阴虚消渴，热泻热痢，脾虚泄泻，麻疹不透，项背强痛。图1-1 葛根药材Fig.1-1 Puerarialobata (Willd.) OhwiDL1505 原料药是从葛根中一种异黄酮类化合物。葛根中的黄酮类化合物多数具有良好的药理作用，对心血管系统、神经系统，内分泌系统都有很好的保护作用。研究表明， DL1505 原料药还具有保肝、抗炎、抗氧化和抗肿瘤的作用[22]，可降低缺血性脑卒中脑组织炎症因子 IL-1β，IL-6 以及 TNF-α 含量，通过激活 JAK2，SATA3 以及抑制 NF-κB 的激活抑制免疫反应[23]。近年来的研究表明， DL1505 原料药可降低血糖水平

晶型,血糖,1型糖尿病,小鼠

L1505-400 400 299.0±62.4 211.3±28.2##0~12, Data are Mean ±SD. **P<0.01, vs NC group；##P<0.01 vs DM group.型 DL1505 对 1 型糖尿病小鼠血糖的影响晶型 DL1505 对 1 型糖尿病小鼠禁食血糖的影响图 2-1 所示，给药前造模成功的 1 型糖尿病小鼠禁食血糖明显高于正天，二甲双胍、新晶型 DL1505 低、高剂量组禁食血糖明显降低；给药胍降糖作用增强，新晶型 DL1505 治疗组呈现剂量依赖性降糖作用。甲双胍降糖作用维持在较稳定水平；与给药 14 天相比，新晶型 DL1所增强，且呈现剂量依赖性。结果提示，二甲双胍给药初期即表现出，随时间延长逐渐达到稳定水平；而新晶型 DL1505 随着给药时间的随剂量增加而作用增强。

【参考文献】