花旗松素对小鼠子宫巨噬细胞的调节机制

发布时间：2020-06-30 16:12

【摘要】：目的:探讨花旗松素(Tax)抑制小鼠子宫炎症的效应及对炎症部位巨噬细胞及相关细胞因子的调节机制。方法:性成熟小鼠25只随机分为对照组和处理组。处理组又分为LPS处理组、LPS+低浓度Tax(25 mg/kg)处理组、LPS+中浓度Tax(50 mg/kg)处理组及LPS+高浓度Tax(100 mg/kg)处理组。对照组、LPS处理组采取每天上午9点灌胃PBS 0.4 ml,1次/天;其中,对照组于第5天尾部静脉注射PBS 0.2 ml;LPS处理组于第5天尾静脉注射LPS 0.2ml;LPS+Tax 25 mg/kg处理组每天上午9点灌胃25 mg/kg Tax,LPS+Tax 50 mg/kg处理组每天灌胃50 mg/kg Tax,LPS+Tax 100 mg/kg处理组每天灌胃100 mg/kg Tax,LPS+低、中、高Tax处理组均于第5天尾静脉注射LPS 0.2 ml,所有LPS处理小鼠注射至第6天。所有小鼠第8天颈椎脱臼法处死,摘取子宫,观察其外形变化并用于后续检测。免疫组织化学技术检测对照组和处理组小鼠子宫中CD86~+(M1)和CD163~+(M2)型巨噬细胞的数量和分布差异,ELISA法检测各实验组炎性细胞因子TNF-α和抑制炎症性细胞因子IL-10的含量差异,验证Tax的抑制炎症效应。qPCR技术检测各实验组小鼠子宫组织中M2型巨噬细胞趋化因子CXCL12及其受体CXCR4 mRNA表达差异,western blot检测CXCL12及其受体CXCR4蛋白水平的表达差异,判定Tax的抗炎机制。结果:LPS处理小鼠至小鼠子宫致炎后,免疫组化检测结果发现与对照组实验小鼠相比,LPS处理组的小鼠白子宫中M1型巨噬细胞表面标志分子CD86在LPS处理的第4天表达量增加,差异达到了极显著水平。而当用不同浓度Tax处理炎性子宫小鼠时,随着Tax的处理浓度的增加,CD86的表达量呈下降趋势,LPS+Tax 100 mg/kg处理组炎症性子宫中CD86的表达量参照于对照组无明显差异。同样方法检验M2型巨噬细胞表面标志蛋白CD163,发现与对照组相比,LPS处理后,一定时间内小鼠子宫中CD163的表达量下降,且差异达到了极显著水平。随着Tax处理浓度的增加,CD163的表达量呈升高趋势,中浓度Tax处理组参照于对照组差异呈现显著升高变化,LPS+Tax 100 mg/kg处理组与对照组差异则不明显。ELISA实验结果表明LPS处理小鼠致小鼠子宫产生炎症后,小鼠子宫中TNF-α的表达量急剧升高,与对照组差异比较明显,为极显著水平。当用不同浓度的Tax的处理后,小鼠子宫中TNF-α的表达量随Tax处理浓度的增加,表达量下降。同时检测抑炎性细胞因子IL-10表达变化,结果显示为随着Tax处理浓度的增加,IL-10的表达呈现相对应的升高趋势。qPCR和western blot分别用于检测M2型巨噬细胞趋化因子CXCL12及其受体CXCR4 mRNA和蛋白的表达差异,结果显示LPS于尾静脉注射小鼠后,二者在基因和蛋白水平上表达均下降,高浓度Tax处理组小鼠子宫中CXCL12基因和蛋白的表达量与对照组相比差异不显著,CXCR4蛋白的表达量虽已升高,但与对照组相比差异仍比较明显,为显著水平。随着Tax的处理浓度的增加,二者表达水平都显现出相应上升的趋势。结论:(1)由各实验组小鼠子宫外形变化及免疫组化、ELISA实验结果显示,一定浓度的Tax可有效抑制小鼠子宫的炎症反应。(2)Tax对抗小鼠子宫炎症的机制之一可能是Tax通过调节M2型巨噬细胞趋化蛋白CXCL12及其受体CXCR4的表达影响炎性部位巨噬细胞极化方向,并进一步影响不同种类细胞因子的生成。(3)一定浓度的Tax对Th1免疫反应具有抑制作用,对Th2免疫反应具有促进作用。
【学位授予单位】：河南师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5
【图文】：

结构式,心脑

图 1-1 Tax 结构式Fig. 1-1 The structure formula of Tax号通路相关[108]。王秋月等的研究经元具有较好的保护功能，其作用弱了细胞的凋亡的效应[109]。佟苗苗minotransferase ）和天冬氨酸氨肝实质损害指标的检测确定 Tax 有]。Tax 的初步研究证明其具有上述多x 早在 2009 年之前就用于关于心脑文献表明，Tax 具有很好的抗炎、抗关于 Tax 抗衰老和细胞凋亡效应，

巨噬细胞,炎性,差异显著性,大写字母

.1 Tax 对炎性小鼠子宫中巨噬细胞的影响.1.1 Tax 对炎性小鼠子宫 CD86+（M1 型）巨噬细胞的影响表 3-1 不同浓度 Tax 对小鼠子宫组织 CD86+（M1 型）巨噬细胞数目的影响（n=5，x ±SD）Table.3-1 The influence of different concentrations of Tax on mouse uterine tissue CD86+(M1) macrophage number. (n=5, x ±SD)组别Group阳性细胞数Positive cell number差异显著性Significance of differenceα=0.05 α=0.01对照组 214.40±15.24 d CLPS 298.20±11.80 a ALPS+Tax 25mg/kg 265.00±12.48 b BLPS+Tax 50mg/kg 247.80±6.46 c BLPS+Tax100mg/kg 217.20±13.39 d C注：小写字母表示 P<0.05，大写字母表示 P<0.01Note: lowercases mean P<0.05, capitals mean P<0.01

【相似文献】