内质网应激-凋亡途径在大鼠跟腱腱病中的作用及郑氏一号新伤药干预研究

发布时间：2020-07-02 23:35

【摘要】：目的:观察内质网应激-凋亡途径在大鼠跟腱腱病中的作用,通过检测细胞凋亡指数及内质网应激相关蛋白GRP78、eIF2α、CHOP在大鼠跟腱腱病中的表达,探讨大鼠跟腱腱病发生的可能机制及郑氏一号新伤药对大鼠跟腱腱病的预防效果。方法:将8周龄SPF级SD大鼠96只,随机分为空白对照组(C组)、单纯跳跃组(J组)、单纯敷药组(M组)和跳跃敷药组(JM组),每一组又根据取材时间不同分为4W、6W、8W组,每组8只。将J组与JM组进行电刺激跳跃法造模,M组与JM组第4周开始外敷郑氏一号新伤药干预,观察大鼠生命体征变化,记录大鼠有效跳跃次数。HE染色观察跟腱组织形态学变化,Tunel法检测细胞凋亡指数,Western Blot检测大鼠跟腱组织GRP78、eIF2α、CHOP蛋白表达。结果:(1)有效跳跃次数结果:J组与JM组大鼠有效跳跃次数均呈下降趋势,前5周J组与JM组大鼠有效跳跃次数基本一致,无显著差异(P0.05);第6周开始JM组大鼠有效跳跃次数明显优于J组,存在显著性差异(P0.05)。(2)HE染色结果:C组、M组大鼠在第4、6、8周时跟腱组织形态结构基本一致,胶原纤维未见紊乱,软骨细胞形态结构正常;J组大鼠第4周时可见跟腱胶原纤维排列稍欠规则,结构稍显松散;第6周时出现明显的病理改变,可见部分胶原纤维断裂、炎性细胞浸润及新生毛细血管长入;第8周时腱纤维排列稀疏,出现大面积纤维断裂情况;外敷郑氏一号新伤药干预后,JM组大鼠跟腱组织形态结构与J组存在显著差别,跟腱组织病理变化明显改善。(3)TUNEL细胞凋亡学结果:C组与M组大鼠跟腱组织细胞凋亡指数不同时间段无显著差异,J组细胞凋亡指数明显升高,在第4、6、8周与C组、M组、JM组均存在显著性或非常显著性差异;外敷郑氏一号新伤药干预后,JM组细胞凋亡指数较J组明显降低,与C组、M组间无显著性差异。(4)Western Blot结果:J组大鼠跟腱组织GRP78蛋白的表达在第4周后显著升高,6周时达最高峰,后呈缓慢下降趋势;eIF2α第4周后呈急剧升高趋势,且与C组存在非常显著性差异(P0.01),6周后呈缓慢下降趋势;CHOP蛋白的表达自第4周开始呈持续上升趋势,8周后其表达量与C组存在显著性差异(P0.05);外敷郑氏一号新伤药干预后,JM组大鼠跟腱组织GRP78、eIF2α、CHOP蛋白的表达相应下调,与J组相比各时间段均有所下降,与C组、M组均无显著差异。结论:(1)郑氏一号新伤药干预对大鼠跟腱腱病的形成具有一定的预防作用。(2)内质网应激及其介导的凋亡反应参与了大鼠跟腱腱病的过程,ERS介导了大鼠跟腱腱病的细胞凋亡,可能是跟腱腱病的发病机制之一。(3)外敷郑氏一号新伤药可明显下调大鼠跟腱组织内质网应激相关蛋白GRP78、eIF2α、CHOP的表达,有效调节内质网应激-凋亡反应,抑制腱细胞凋亡,从而发挥了预防跟腱腱病的作用。
【学位授予单位】：成都体育学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5
【图文】：

UPR信号通路介导的ERS［87］

图 2 ERS 诱导的促凋亡途径[101]（1）CHOP 介导的凋亡通路转 录 因 子 CHOP ， 又 被 称 为 生 长 停 滞 及 DNA 损 伤 诱 导 基 因 153（growth-arrest-and DNA-damage-inducibie gene 153，GADD153），是内质网

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