龙血树叶活性糖的分离纯化及结构解析

发布时间：2020-07-05 16:01

【摘要】：龙血树(Dracaena Vandelli ex Linnaeus)是一种热带特有的珍稀药用植物,也是一种著名的观叶植物。傣族贝叶经记载龙血树叶具有和血竭相似的医疗功效,已有医药公司将龙血树叶开发成傣药摆埋嘎筛并上市销售,市场反馈及前期药理实验显示对糖尿病有显著疗效,但其降血糖机制尚未揭示。为了阐明龙血树叶药效成分的化学本质,以对该药的深入开发提供科学依据,本实验重点就水溶性有效组分进行了系统的研究。本文以柬埔寨龙血树叶为原料,经热水浸提获降血糖总水提物,醇沉后得粗糖,得率为8.59%。采用sevag法除游离蛋白(三氯甲烷和正丁醇最佳体积比5:1),糖保留率98.11%,蛋白脱除率23.83%。最优脱色材料为A-722MP阴离子交换树脂,糖保留率90.92%,脱色率73.03%。通过L6大鼠成肌细胞建立降糖活性追踪模型,指导对活性组分的筛选分离纯化,用GOD-POD法检测培养液糖含量。以DEAE-52纤维素材料柱层析,用去离子水和0.1mol/L、0.3 mol/L、0.6 mol/L、1 mol/L梯度氯化钠溶液作洗脱剂,苯酚-硫酸法跟踪检测绘制洗脱曲线,得四个糖组分QLZI、QLZII、QLZIII、QLZIV,其中降糖活性最强的为主体组分QLZI。再用Sephacryl S-100HR凝胶分纯QLZI,以去离子水为洗脱剂,苯酚-硫酸法和考马斯亮蓝法分别示踪糖和蛋白并绘制洗脱曲线,得糖-蛋白混合物LXS、果聚糖配体LZS、蛋白LSP,三组分均有降糖活性。LZS和LSP质量比1:1混合后活性提高。利用UV、IR、质谱、核磁共振波谱及离子色谱仪对LZS测定分析,鉴定其为聚合糖配体,单糖组成以果糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖为主,含有1.45%质量的柠檬酸。经查阅文献及SciFinder数据库,知LZS为一个新的化合物。SDS-PAGE电泳表明,活性蛋白LSP的分子量约13000Da。本研究确认了糖类与其结合蛋白是龙血树叶的重要降糖活性成分,为认识龙血树叶治疗糖尿病药理机制和药物的研发技术提供了理论依据以及实验基础。
【学位授予单位】：云南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R284.2

【参考文献】

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本文编号：2742819