枣仁安神方在失眠模型大鼠体内的药动学研究

发布时间：2020-07-11 03:32

【摘要】：失眠是一种常见的心理生理性疾病,长期失眠会严重影响人们的正常生活和工作。目前失眠症的临床治疗主要以BZD类镇静催眠药物为主,但是长时间服用会出现药物依赖及停药反弹现象。枣仁安神方是中医临床上常用的治疗失眠方剂,该方由酸枣仁(炒)、丹参、五味子(醋炙)三味药组成。为了探索其在失眠模型大鼠体内的吸收、分布、代谢、排泄的动态变化过程,本研究建立了腹腔注射PCPA结合慢性夹尾刺激致大鼠失眠模型,采用LC-MS/MS方法对枣仁安神方灌胃给药后失眠模型大鼠血浆中斯皮诺素、丹参素、原儿茶醛、6’”-阿魏酰斯皮诺素、丹酚酸B、五味子醇甲和五味子甲素进行药动学研究,为枣仁安神方的临床用药提供参考。主要内容和结果包括:1、建立了同时测定大鼠血浆中去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸4种单胺类神经递质含量的HPLC方法,根据各指标成分的含量变化以及各组大鼠的行为形态变化来判断腹腔注射PCPA结合慢性夹尾刺激的失眠模型是否建立成功。结果显示,与正常组相比,模型组大鼠食量减小、体重下降、活动量减少、入睡困难且容易受外界环境干扰而被吵醒,血浆中去甲肾上腺素与多巴胺含量显著增加,5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸含量显著降低,说明失眠模型制作成功。2、建立了同时测定枣仁安神方中7种指标成分含量的HPLC方法,方法学考察结果表明,7种指标成分在一定范围内线性关系良好,加样回收率均大于93.47%,精密度、重复性和稳定性的RSD值均小于3%,符合中药化学成分含量测定要求。3、建立了同时测定失眠模型大鼠血浆中7种指标成分含量的HPLC-MS方法,结果表明,该方法能将大鼠血浆中7种指标成分彻底分离,且无内源性物质干扰,各指标成分精密度RSD值均小于13.7%,提取回收率在78.3-94.0%之间,基质效应在92.2-106.1%内,结果均符合生物样品检测要求。为枣仁安神方中7个指标成分在失眠模型大鼠血浆中的药代动力学研究提供了灵敏度高、选择性强的分析方法。4、采用所建立的同时检测失眠模型大鼠血浆中7种指标成分含量的HPLC-MS方法,研究了高、中、低不同给药剂量的枣仁安神方提取液中7种代表性成分在失眠模型大鼠血浆中药代动力学的影响。结果显示,高剂量与中剂量之间,药动学行为基本呈线性关系。所有指标成分均在1h内吸收入血。斯皮诺素药时曲线下面积较大,在大鼠体内清除较慢。丹酚酸B在复方药材中含量最高,但达峰后血药浓度迅速下降,据文献报道可能是由于丹酚酸B在大鼠体内通过酯键水解代谢为丹参素。药时曲线结果显示五味子醇甲、五味子甲素呈现双峰,可能是因为这两种联苯环辛烯类木脂素类成分在药动学过程中存在肝-肠循环。
【学位授予单位】：西北大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5;R-332
【图文】：

色谱图,色谱图,枣仁,单胺类神经递质

精密吸取３．２．２项下的对照品溶液适量，用甲醇配制成混合对照品供试液，再吸取逡逑３．２．３项下正常组、模型组、治疗组（枣仁安神方高剂量）血浆样品供试液，分别按照逡逑３．２．１项下色谱条件进样，得到４种单胺类神经递质的ＨＰＬＣ色谱图见图２－１、２－２、２－３逡逑和邋２－４0逡逑２０．０ｋ－，逡逑１５．０ｋ－逡逑４逡逑１邋１00ｋ－丨逦３逡逑５．０ｋ－逡逑０．０－＾—邋邋Ｗ＾逦丨邋逡逑■逦Ｉ逦＿逦Ｉ逦■逦Ｉ逦１逦Ｉ逦？逦Ｉ逦Ｉ逡逑０逦５逦１０逦１５逦２０逦２５逦３０逡逑Ｔ（ｍｉｎ）逡逑图２－１混标供试品的ＨＰＬＣ色谱图逡逑２０．０ｋ邋－｜逡逑１５．０ｋ－逡逑＾逦１０．０ｋ－逡逑＜逡逑ｇ逡逑１逡逑５．０ｋ－逡逑４逡逑｜邋Ｉ２邋｜逦３逦Ｉ逡逑00逦ｙ逦逦ａ，逦逦逦ａ逦逦逦ｕ逦

色谱图,色谱图,枣仁,单胺类神经递质

色谱图,色谱图,枣仁,血浆

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【参考文献】