蛇伤胶囊对竹叶青蛇伤血管内皮细胞AMPK、NF-κB、ICAM-1和MCP-1表达的影响

发布时间：2020-07-12 19:58

【摘要】：目的观察竹叶青蛇伤血管内皮细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、核转录因子-κB(NF-κB)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达以及蛇伤胶囊对其的影响,以期基于AMPK/NF-κB信号通路探讨竹叶青蛇伤血管内皮细胞炎症反应机制及蛇伤胶囊针对此过程的调控作用,为蛇伤胶囊的临床应用和推广提供实验依据。方法制备蛇伤胶囊兔含药血清及复制竹叶青蛇伤的细胞模型。设置空白组(KB)、模型组(MX)和蛇伤胶囊含药血清低、中、高浓度组(DY、ZY、GY)5组,每组分别10个样本。在细胞实验中,KB组加入10%正常兔血清培养,MX组在KB组的基础上加入5ug/ml竹叶青蛇毒液培养,DY、ZY和GY组在MX组基础上培养6小时后分别加入5%、10%和15%的含中药兔血清继续培养。各组分别培养72小时后,收集细胞上清液,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养液中的AMPK、ICAM-1和MCP-1含量;收集细胞,提取总蛋白,以蛋白免疫印迹法(Western Blot)测定各组血管内皮细胞AMPK、NF-κBP65的蛋白表达。结果 1.ELISA检测ICAM-1和MCP-1表达情况:MX组ICAM-1和MCP-1的表达水平相对KB组均出现了显著的升高,差异具有统计学意义(P0.01);给予蛇伤胶囊干预治疗后,与MX组比较,ZY组ICAM-1和MCP-1明显下调,差异均具有统计学意义(P0.01)。2.ELISA检测AMPK表达情况:MX组的AMPK表达水平相对KB组显著降低,差异具有统计学意义(P0.01);予蛇伤胶囊干预治疗后,治疗组AMPK水平相对MX组出现不同程度升高,其中以ZY组与GY差异有统计学意义(分别为P0.05和P＜0.01)。3.Western Blot检测AMPK和NF-κB p65蛋白表达情况:与KB组相比,MX组AMPK的表达下调而NF-κB p65的表达上调,差异均具统计学意义(分别为P0.05和P0.01);给予蛇伤胶囊干预治疗后,与MX组相比,治疗组AMPK的表达呈不同程度升高,其中以GY组差异具有统计学意义(P0.01),治疗组NF-κBP65的表达下调,以ZY组差异具有统计学意义(P0.05)。结论竹叶青蛇毒能够诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)产生炎症反应;通过对AMPK、NF-κB以及其下游介质ICAM-1和MCP-1的调控可能是蛇伤胶囊治疗竹叶青蛇伤血管内皮细胞炎症反应的机制之一。
【学位授予单位】：福建中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285
【图文】：

蛋白表达,情况

bAMPK和IVF-rzBp65蛋白表达情况

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