Notch信号通路在天麻素抑制脂多糖诱导小胶质细胞激活中的作用研究
发布时间：2020-07-14 01:23
【摘要】：[目的]体外及体内实验探讨天麻素(Gastrodin,Gas)是否通过调控Notch信号通路抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的BV-2小胶质细胞和新生3天斯泼累格·多雷(SpragueDawley,SD)大鼠胼胝体区小胶质细胞炎性蛋白酶的表达。为临床应用天麻素治疗与神经炎症相关的神经退行性疾病提供理论依据。[方法]体外实验采用LPS诱导BV-2小胶质细胞构建炎症模型,分为空白对照组、LPS(1μg/ml,6h或2h)处理组及不同浓度天麻素(10、20、50和100μmol/L)预处理(1 h)+LPS共同处理组;采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blotting)和细胞免疫荧光染色技术检测BV-2小胶质细胞环氧合酶-2(cyclooxygenase,COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(induced nitric oxide synthase,iNOS)、Notch信号通路受体Notch-1、重组结合蛋白抑制子(recombining binding protein suppressor of hairless,RBP-Jk)、发状分裂相关增强子 1(hairy and enhancer of split-1,Hes-1)mRNA 及 COX-2、iNOS、Notch-1、Notch 受体蛋白胞内段(intracellμlar Notch receptor domain,NICD)、RBP-Jk、Hes-1蛋白表达变化。体内实验采用LPS诱导40只健康新生3天SD大鼠构建炎症模型,随机分为空白对照组、LPS(lmg/kg,6h)处理组、不同剂量天麻素(50、100、200 mg/kg)预处理(2 h)+LPS 共同处理组;采用 RT-PCR、Western blotting及组织免疫荧光染色检测胼胝体区小胶质细胞COX-2、iNOS、Notch-1、RBP-JK、Hes-1 mRNA 及 COX-2、iNOS、Notch-1、NICD、RBP-JK、Hes-1 蛋白表达变化。[结果]体外及体内实验结果均发现,与空白对照组相比LPS处理组COX-2、iNOS、Notch-1、RBP-Jk、Hes-1mRNA、蛋白表达以及 NICD 核转位水平上调(P0.05);与LPS处理组相比天麻素预处理+LPS共同处理组COX-2、iNOS、Notch-1、RBP-Jk、Hes-1mRNA、蛋白表达以及NICD核转位水平下调(P0.05)。[结论]天麻素可通过抑制Notch信号通路抑制LPS诱导的小胶质细胞炎性反应。为临床应用天麻素预防和治疗与神经炎症相关的神经退行性疾病提供理论依据。
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5
【图文】：
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本文编号：2754270
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5
【图文】：
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