双参饮逆转肝纤维化的实验研究

发布时间：2020-07-17 00:47

【摘要】：目的观察双参饮对四氯化碳(CCl4)所诱导的肝纤维化模型大鼠的治疗作用,在此基础上初步探讨双参饮抗肝纤维化的作用,为临床治疗肝纤维化提供实验依据。方法选取健康清洁级SD雄性大鼠65只,体重200±20g。适应性喂养1周后,进行造模实验。将65只实验大鼠随机分为正常对照组(10只),造模组(55只)。造模开始后,除正常对照组外,造模组大鼠均给予腹腔注射40%四氯化碳橄榄油溶液,首次剂量3ml/kg,以后每次剂量为1.5ml/kg,每周2次。造模7周后,随机抽取造模组大鼠3只,以断颈法处死大鼠,沿腹正中线解剖后,分离出肝脏组织,作快速冰冻切片,并观察,结果符合肝纤维化病理改变,提示造模成功。然后随机将造模成功后的大鼠随机分为5组,即模型对照组、秋水仙碱组、双参饮低剂量组、双参饮中剂量组及双参饮高剂量组。从第8周开始停止腹腔注射CCl4,同时给予双参饮各剂量治疗组不同剂量双参饮水煎液3g/kg/d、6g/kg/d、12g/kg/d灌胃,秋水仙碱组给予秋水仙碱0.2mg/kg/d灌胃,模型对照组与正常对照组以等量的生理盐水灌胃,共4周。于实验第11周末次给药后,禁食不禁水24小时,测体重并记录。然后将实验大鼠用1%的戊巴比妥溶液麻醉,对大鼠进行心脏采血,并将之存放于枸橼酸钠抗凝管中,以备实验检测。接着迅速分离出肝脏,处理尽残血后,称重并记录肝脏重量,以备计算肝脏指数。切取各大鼠肝脏组织相同部位约2.0cm×2.0cm×0.3cm大小,存放于10%的甲醛固定液中固定,以备用于肝脏组织学观察。检测大鼠血清生化相关指标:丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB);血清纤维化指标:血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)和Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)等;行HE染色,在光镜下观察肝脏病理学改变,以此评价双参饮对大鼠肝纤维化的保护作用及逆转肝纤维化的药效。结果1、与正常对照组相比较,模型对照组动物肝脏重量和肝脏指数均有明显增加,血清ALT、AST、TBIL及肝纤四项水平均明显升高,ALB水平明显降低,差异均具有统计学意义(P0.05),模型对照组肝纤维化程度及炎症浸润情况明显较正常对照组差,差异具有统计学意义(P0.05)。2、双参饮可明显改善肝纤维化大鼠的精神状态、饮食情况、皮毛色泽、增加其体重,降低肝脏指数。与模型对照组相比较,双参饮各剂量组大鼠体重明显增加,肝脏指数显著降低(P0.05)。3、各组大鼠血清生化检测结果表明:与模型对照组相比,双参饮各剂量组能够显著降低大鼠血清ALT、AST、TBIL水平,提高ALB水平,差异具有统计学意义(P0.05)。与秋水仙碱组相比较,双参饮大剂量组降低大鼠血清生化指标更明显,差异具有统计学意义(P0.05)。4、各组大鼠血清纤维化指标检测结果显示:与模型对照组相比较,双参饮各剂量治疗组血清HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C含量明显降低,模型组与双参饮各剂量组之间存在显著差异(P0.05)。与秋水仙碱组相比,双参饮大剂量组降低大鼠血清HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C指标更为显著,两者差异具有统计学意义(P0.05)。5、各组大鼠羟脯氨酸(Hyp)测定结果显示:与模型对照组相比较,秋水仙碱组及双参饮各剂量组肝脏组织Hyp含量均有明显降低,差异具有统计学意义(P0.05)。6、各组大鼠肝组织病理切片观察结果表明:与模型对照组相比较,双参饮各剂量组肝纤维化程度及炎症浸润情况明显好转,双参饮各剂量组与模型对照组之间存在显著差异(P0.05)。结论1、中药复方双参饮能够明显改善肝纤维化大鼠的精神状态、饮食情况、皮毛色泽、增加其体重,降低肝脏指数。2、双参饮能够有效改善CCl4诱导的肝纤维化模型大鼠的肝功,以高剂量较为明显,对CCl4导致的肝纤维化模型大鼠具有明显的抗炎保肝作用。3、双参饮能够显著降低血清纤维化指标的水平,减少胞外基质的沉积,降低肝脏组织羟脯氨酸的含量,从而达到逆转肝纤维化的作用。4、肝脏组织病理实验结果表明双参饮能够有效减轻CCl4引起的肝细胞变性、坏死、纤维增生,减轻肝纤维化模型大鼠肝脏炎症及纤维化的程度。
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5
【图文】：

正常对照组（HE×100）

模型对照组（HE×100）

秋水仙碱组（HE×100）

【参考文献】

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本文编号：2758741