驯化栽培白屈菜质量评价

发布时间：2020-07-17 01:01

【摘要】：本文研究了白屈菜总生物碱的提取方法,化学成分的动态累积,并探讨了不同干燥方法以及不同土壤类型对白屈菜的品质的影响,以期为白屈菜适时采收,优质高效生产及驯化栽培管理提供参考。基于转录组测序的结果,在生物碱合成途径中找出三个关键酶基因,分析在不同时期的表达水平,为白屈菜基因差异表达研究奠定基础。主要研究内容和结果如下:1、白屈菜的活性成分多为生物碱类化合物,针对生物碱类化合物成分的提取,本文设计比较了三种常用的方法和溶剂的提取效果,并采用正交实验方法确定最佳提取工艺。结果得到:甲醇液中加入0.5%盐酸,料液比1:50,提取时间1h,提取效果最佳。2、白屈菜生长发育过程中有效成分累积动态研究:检测了白屈菜地上、地下部分在整个生长发育过程中有效活性成分即各类生物碱包括原阿片碱、白屈菜碱、黄连碱、小檗碱、血根碱和白屈菜红碱的动态累积变化。结果显示,各个成分在不同的生长期成分动态变化规律均不相同。确定白屈菜适宜采收期:选择与白屈菜质量密切相关的指标,得出地上部分的采收时间为7月份,地下部分为10月份。3、不同干燥方法对白屈菜品质形成的影响研究:比较了阴干、晒干以及不同温度烘干对白屈菜品质的影响。结果显示,不同的干燥方法均能使白屈菜外观性状,水分达到2015版《中国药典》规定,但药材有效成分含量存在差异。以测定的有效成分含量,综合分析,认为60℃烘干可以代替药典中的晒干或阴干。4、不同土壤类型对白屈菜品质的影响研究,比较了药园黄褐土,林下腐殖土,老参地土对白屈菜生物碱类含量的差异,结果得出差异并不明显。所以提出,白屈菜可作为人参种植后土地可轮作种植的药用植物之一。5、基于转录组数据,从白屈菜生物碱类成分生物合成路径中,选出基因表达量差异明显地三个基因,酪氨酸脱羧酶,多酚氧化酶,伯胺氧化酶,通过扩增曲线,溶解曲线的考察,建立白屈菜样本的荧光定量PCR表达方法,得到了酪氨酸脱羧酶,多酚氧化酶,伯胺氧化酶三个基因在不同时期的表达量,为白屈菜生物碱类成分生物合成机制的研究奠定了基础。
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R284.1
【图文】：

白屈菜红碱标准曲线

0.8mg/mL、小檗碱 0.848mg/mL、白屈菜红碱 1.02mg/mL。3.2.2 供试品溶液制备各份样品阴干后，粉碎，过 40 目筛。取粉末 1g , 精密称定，加甲醇 50mL，热流提取 40min, 冷却后过滤，旋转蒸发浓缩，用甲醇溶解蒸发后所得固体，并定容10mL，摇匀，用 0.45μm 微孔滤膜滤过，即得。3.2.3 色谱条件色谱柱为 Shim-pack VP-ODSC18 柱（4.6x250mm,5μm），流动相为乙腈（A）-0乙酸水溶液（B），梯度洗脱，0~5min，10%~15%A；5~10min,15%~20%A；10min~15m20%~30%A ； 15min~20min ， 30%~35%A ； 20min~25min ， 35%~46%A ； 25~30min46%~60%A；30~35min，60%~80%A；35~40min，80%~100%A；40~45min，100%~80%45~50min ， 80%~50%A ； 50min~55min ， 50%~30%A ； 55min~60min ， 30%~10%A60min~65min，10%A。流速 1mL/min；柱温 25℃；进样量 20μL；检测波长 270nm。

3.2.7 线性关系考察精密量取对照母液适量，用甲醇稀释后吸取液体 10μL、20μL、40μL、60μL、80μL100μL，按 2.1 项下色谱条件进行测定，以峰面积为纵坐标（Y），溶液浓度为横坐标（X进行线性回归，得出各个成分的标准曲线回归方程，见表 3-1。表 3-1 白屈菜生物碱类化合物线性回归方程和线性范围Tab. 3-1 Linear regression analysis parameters of six alkaloids in Chelidonium majus L化合物名称 线性回归方程 线性范围/mg·mL-1R2原阿片碱 Y=7000000x-2961.6 0.0108-0.108 0.9992白屈菜碱 Y=3000000x+8589.6 0.0108-0.108 0.9999黄连碱 Y=40000000x-41487 0.0106-0.106 0.9995血根碱 Y=80000000x-95066 0.01-0.08 0.9992小檗碱 Y=50000000x-58179 0.0106-0.0848 0.9990白屈菜红碱 Y=100000000x-119217 0.0102-0.102 0.9990

【参考文献】

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本文编号：2758759