丹蛭降糖胶囊治疗肥胖大鼠慢性肾损伤的机制研究

发布时间：2020-07-17 01:34

【摘要】：目的多项研究表明,肥胖、高脂血症以及慢性肾脏疾病(chronic kidney disease,CKD)具有相关性,肥胖和高脂血症主要通过脂质沉积、氧化应激、炎症等方式对肾脏造成损伤,这其中清道夫受体CD36起到关键作用。由于AMP依赖的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)在能量调节及脂类代谢中具有重要的功能,所以本文通过实验探讨丹蛭降糖胶囊(Danzhi Jiangtang Capsule,DJC)基于CD36和AMPK信号通路在保护高脂血症大鼠肾损伤中的作用机制,为该药用于临床治疗肥胖引起的CKD提供实验依据。方法将雄性SD大鼠随机分为基础饲料组(CON)、高脂饲料组(HFD)、高脂饲料+丹蛭降糖胶囊低剂量组(HFD+DJCL,500 mg·kg~(-1)·d~(-1))和高脂饲料+丹蛭降糖胶囊高剂量组(HFD+DJCH,1000 mg·kg~(-1)·d~(-1)),除CON组外均给予高脂饮食12周,治疗组再灌胃治疗8周。分析血清血脂和肾代谢指标,HE、油红O、PAS染色观察肾脏的病理学变化,10%肾匀浆测定肾组织甘油三酯(TG)、总超氧化物歧化酶(TSOD)、CuZn-SOD、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总一氧化氮合酶(TNOS)、丙二醛(MDA)含量,免疫组化法检测CD36的表达变化,RT-PCR分析固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP1c)及脂肪酸合成酶(FASN)的表达,Western blot分析DJC对AMPK、磷酸化AMPK(p-AMPK)、过氧化物酶体增殖剂活化受体α(PPARα)、过氧化物酶体增殖剂活化受体γ(PPARγ)表达的影响。结果⑴与CON组相比,HFD组大鼠体重增加,血清TG、TC、BUN、UA、Scr浓度均升高,HDL-C浓度下降。与HFD组相比,HFD+DJCL、HFD+DJCH组的血清中上述指标均有逆转,并具有一定的剂量效应。⑵与CON组相比,HFD组大鼠肾匀浆TG明显升高。而与HFD组相比,DJC 2个剂量组均可明显降低肾匀浆的TG含量。与CON组相比,HFD组肾匀浆CAT、TNOS、TSOD、Cu Zn-SOD水平明显降低,GSH-Px、MDA水平明显上升。而DJC组肾匀浆中上述指标均有改善,以HFD+DJCH组最为明显,并有一定的剂量效应。⑶与CON组对比,HFD组大鼠肾脏的肾小球体积明显增大,系膜细胞增殖,肾小囊腔变大,肾小球和肾小管脂质沉积明显增多,肾小球系膜基质中有大量糖原沉积。而相对于HFD组,DJC组均具有明显改善,其中HFD+DJCH改善更为明显。⑷与CON组对比,HFD组大鼠肾脏CD36的表达明显增多。DJC治疗组肾脏的CD36的表达明显降低,且随着剂量的增大,CD36的表达进一步降低。⑸与CON组对比,HFD组肾脏组织中SREBP1c、FASN基因的mRNA水平表达明显上调。DJC组上述指标明显降低。⑹与CON组对比,HFD组肾脏组织中的p-AMPK、PPARα蛋白表达明显减少,PPARγ的表达明显增加。而DJC的2个剂量组上述指标均发生逆转。结论DJC可有效降低高脂饮食引起的肾内脂质沉积和氧化应激水平,其机制可能是通过激活AMPK-PPARα通路,抑制CD36和脂肪生成基因PPARγ、SREBP1c、FASN的表达。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5

【参考文献】