化浊解毒疏肝方对CUMS诱导的抑郁症模型小鼠海马钙结合蛋白D28K表达的影响

发布时间：2020-07-17 02:06

【摘要】：目的:观察钙结合蛋白D28K(calbindin-D28K)在抑郁症模型小鼠海马CA1区的表达及分布情况,探讨化浊解毒疏肝方对小鼠海马细胞calbindin-D28K表达的影响,为抑郁症的临床治疗,开辟新的思路。方法:雄性ICR小鼠60只,适应性饲养一周后,随机分为6组,每组10只。分别为空白对照组组、模型组、阳性对照组(氟西汀组)、化浊解毒疏肝方组低、中、高剂量组(3.9 g·kg~(-1)·d~(-1)、7.8 g·kg~(-1)·d~(-1)、15.6g·kg~(-1)·d~(-1))。除空白对照组外,其他各组小鼠采取慢性不可预见性温和刺激(CUMS)法复制抑郁症模型。CUMS包括夹尾1 min、日夜颠倒24 h、噪音2 h,摇晃5 min、禁食24 h、异物24 h、异味24 h、潮湿24 h、禁水24 h、倾斜24 h、热刺激2 h、束缚2 h、空笼24 h、冰水游泳5 min。每天随机从其中抽取两种,连续21天。制模的同时,空白对照组、模型组小鼠每天以0.3 mL生理盐水灌胃,化浊解毒疏肝方低、中、高剂量组小鼠分别以3.9 g·kg~(-1)·d~(-1)、7.8 g·kg~(-1)·d~(-1)、15.6 g·kg~(-1)·d~(-1)的生药量灌胃,氟西汀组小鼠以2.5 mg·kg~(-1)·d~(-1)的氟西汀灌胃。制模结束后,分别用糖水偏爱实验、强迫游泳实验、悬尾实验、新奇摄食抑制实验等方法分析动物的抑郁样行为;用免疫组化法分别检测小鼠海马CA1区calbindin-D28K的表达和细胞凋亡。结果:1.行为学测试结果(1)与空白对照组相比,模型组小鼠的糖水偏爱分数显著降低(P0.01);与模型组相比,氟西汀组、化浊解毒疏肝方低、中、高剂量组小鼠糖水偏爱分数显著提高(P0.01);与氟西汀组相比,化浊解毒疏肝方中、高剂量组小鼠的糖水偏爱分数无显著性差异(P0.05)。(2)与空白对照组相比,模型组小鼠悬尾总不动时间显著延长(P0.01);与模型组相比,氟西汀组、化浊解毒疏肝方低中高剂量组小鼠悬尾总不动时间显著延长(P0.01);与氟西汀组相比,化浊解毒疏肝方高剂量组小鼠悬尾总不动时间无显著差异(P0.05)。(3)与空白对照组相比,模型组小鼠新奇抑制摄食量显著减少(P0.01);与模型组相比,化浊解毒疏肝方中、高剂量小鼠新奇抑制摄食量显著增多(P0.05,P0.01);与氟西汀组相比,化浊解毒疏肝方高剂量组小鼠新奇抑制摄食量显著增多(P0.01)。(4)与空白对照组相比,模型组小鼠强迫游泳总不动时间显著延长(P0.01);与模型组相比,氟西汀组、化浊解毒疏肝方低、中、高剂量组小鼠强迫游泳总不动时间显著缩短(P0.01);与氟西汀组相比,化浊解毒疏肝方中、高剂量组小鼠强迫游泳总不动时间相当(P0.05)。2.免疫组织化学检测结果显示与空白对照组相比,模型组小鼠海马CA1区的calbindin-D28K的表达显著减少(P0.01);与模型组相比,氟西汀组、化浊解毒疏肝方低、中、高剂量组小鼠海马CA1区calbindin-D28K的表达显著增多(P0.01);与氟西汀组相比,化浊解毒疏肝方中、高剂量组小鼠海马CA1区calbindin-D28K的表达相当(P0.05)。3.细胞凋亡检测结果显示与空白对照组相比,模型组海马CA1区神经细胞凋亡的数量显著增多(P0.01);与模型组相比,氟西汀组、化浊解毒疏肝方低、中、高剂量组小鼠海马CA1区神经细胞凋亡数量显著减少(P0.01);与氟西汀组相比,化浊解毒疏肝方中、高剂量组小鼠细胞凋亡数量相当(P0.05)。结论:1.化浊解毒疏肝方可以有效地缓解抑郁症模型小鼠的各种抑郁症状,改善其学习记忆能力。2.化浊解毒疏肝方可以促进小鼠海马细胞calbindin-D28K的表达,减少海马神经细胞凋亡数量。3.化浊解毒疏肝方在缓解抑郁症模型小鼠抑郁症状方面存在剂量依赖关系。
【学位授予单位】：河北中医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5
【图文】：

图 1 各组小鼠海马 CA1 区 calbindin-D28K 表达情况（×200，免疫组化染色）Fig.1 Expression of calbindin-D28K in hippocampal CA1 region of eacgroup (×200, immunohistochemical staining)Note: The calbindin-D28K positive cells are indicated by the arrows. A. blacontrol group B. model group C. fluoxetine group D. Huazhuo Jiedu ShugRecipe low dose group E. Huazhuo Jiedu Shugan Recipe middle dose groupHuazhuo Jiedu Shugan Recipe High dose group

图 2 各组小鼠海马 CA1 区细胞凋亡情况（×400，TUNEL 法染色）Fig.2 Apoptosis of hippocampal CA1 region of each group of mice (×400,TUNEL staining)Note: The apoptotic cells are indicated by the arrows. A. blank control groupB. model group C. fluoxetine group D. Huazhuo Jiedu Shugan Recipe lowdose group E. Huazhuo Jiedu Shugan Recipe middle dose group F. HuazhuoJiedu Shugan Recipe High dose group

图 3 各组小鼠糖水偏爱分数Fig.3 Sugar water preference scores in each groupNote：vs blank control group,aP＞0.05,bP＜0.05,cP＜0.01; vs model group,dP＞0.05,＜0.05,fP＜0.01; vs fluoxetine group,gP＞0.05,hP＜0.05,gP＜0.01.

【参考文献】

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本文编号：2758832