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甘肃栽培甘草的化学成分研究

发布时间:2020-07-17 18:55
【摘要】:甘草是临床常用大宗药材之一,来源于豆科甘草属的甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)、光果甘草(G.glabra L.)和胀果甘草(G.inflata Bat.)的干燥根及根茎。甘草主要分布在我国内蒙古、甘肃、宁夏和新疆等省,胀果甘草主要分布在新疆的南疆地区,光果甘草主要分布在新疆西部及中亚丝绸之路国家沿线。目前,已从甘草中分离鉴定出400多种化学成分,主要包括黄酮类、香豆素类、三萜类和二苯乙烯类化合物。现代药理学研究表明,这些化合物具有保肝、抗炎、抗菌、抗病毒、抗氧化、抗癌、免疫调解、降糖、抗肥胖、解毒和抗溃疡等多种生物活性。由于多年来人们对野生甘草的大量采挖,不但造成甘草野生资源逐渐枯竭,而且引起了严重的生态环境问题,为解决甘草的需求量问题和防止生态环境恶化,人工种植甘草势在必行。但是,栽培甘草的质量受到种质资源和栽培环境等因素影响较大,对人工种植甘草的化学成分进行深入研究,分析栽培甘草的药效物质基础,对于甘草的质量控制和临床使用具有重要意义。甘肃省是我国甘草的主要产区之一,我们对甘肃人工栽培甘草的化学成分进行了研究,并对其抗菌、PD-1/PD-L1抑制和抗炎生物活性进行了评价。本实验利用硅胶柱层析、葡聚糖凝胶、重结晶和半制备高效液相等方法,从甘肃栽培甘草的根及根茎中分离得到1个新化合物(1)和27个已知化合物(2~28),通过波谱数据分析和查阅文献分别鉴定为4',3"-dihydroxy-5-methoxy-4",5"-dimethyl-[2,1-b]furano-coumestan(1)、isolicopyranocoumarin(2)、新甘草酚(3)、红花岩黄芪香豆雌酚B(4)、格里西轮(5)、甘草香豆素(6)、7,2′,4′-三羟基-5-甲氧基-3-芳香豆素(7)、甘草素(8)、半甘草异黄酮B(9)、甘草异黄酮B(10)、7-O-甲基羽扇豆异黄酮(11)、isoangustone A(12)、glicoricone(13)、毛蕊异黄酮(14)、甘草异黄酮A(15)、异甘草素(16)、刺甘草查尔酮(17)、甘草查尔酮B(18)、3,3′,4,4′-四羟基-2-甲氧基查尔酮(19)、6-异戊烯基槲皮素-3-甲醚(20)、甘草黄酮醇(21)、山柰酚(22)、粗毛甘草素C(23)、(R)-(-)-驴食草酚(24)、glycyrrhisoflavanone(25)、甘草香豆酮(26)、甘草宁Ⅰ(27)和白桦脂酸(28)。此外,我们对甘草提取物和部分化合物进行了抗农业病原菌筛选,其中根提取物和半甘草异黄酮B对油菜菌核菌、立枯丝核菌、番茄灰霉菌和小麦赤霉菌均具有抗菌活性,尤其对立枯丝核菌抑制活性最好。此外,还对甘草的部分化合物进行了PD-1/PD-L1抑制活性筛选,化合物的抑制率在30%~65%之间,甘草中化合物的PD-1/PD-L1抑制活性是首次报道。本研究还进行了部分化合物抑制巨噬细胞RAW264.7产生一氧化氮的抗炎活性,结果显示均具有较好的抗炎活性,其IC_(50)值的范围在4.7~20.1μM之间。本实验通过对甘肃栽培甘草的化学成分及其生物活性的研究,探讨甘草中的药效物质基础,为开发植物源杀菌剂、免疫抑制剂和抗炎药物提供理论依据,对于促进栽培甘草的综合开发和利用具有重要的意义。
【学位授予单位】:兰州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:R284.1
【图文】:

化合物,结构式


化合物1-28的结构式

二维相关,化合物


图 2 化合物 1 的二维相关图色粉末。通过高分辨质谱得到准分子 385.1282,误差值为 1 ppm),推断其位移为 7.85 处有一个氢而且是一个单.10(1H, d, J = 8.4 Hz)、6.27(1H, dd, J),氢谱还显示有两个甲基信号δH1.24, t, J = 6.8 Hz),一个次甲基信号δH4.0其中δC160.0(C-2)、121.2(C-3)和类化合物,δC156.2 和 157.3 是苯环上被峰,δC66.4 是一个被羟基取代的次甲基从碳谱中还显示出一个甲氧基和两个甲NMR 和13C-NMR 并通过查阅文献[94]和pyranocoumarin。

照片,抑菌,化合物,照片


O2、37℃的细胞培养箱中培养 24 h,弃5 μg/mL+1 μg/mL LPS)的甘草化合物 96 孔板中,并加入 Griess 溶液,混匀 nm 波长处测定吸光度,计算化合物的 重复 3 次。活性、表 7 和表 8),甘草的提取物中,根提且根提取物对立枯丝核菌的抑制率最高性。甘草的单体化合物中,化合物 9 对于 60%,化合物 23 对立枯丝核菌的抑制化合物 9 的抑菌照片。

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