家蚕治疗糖尿病的抗氧化药效成分分析

发布时间：2020-07-26 09:42

【摘要】：目的本文针对家蚕中与治疗糖尿病相关的抗氧化活性成分进行分析与表征。为家蚕治疗糖尿病的临床应用提供化学依据,为其降糖物质基础研究提供新的方法。方法利用抗氧化成分能够使KMnO4褪色的原理,采取分光光度法检测家蚕、家蚕不同提取物及家蚕的含药血清中的抗氧化活性成分的含量;再将TLC、HPLC等色谱及色质谱联用技术与抗氧化活性分析相结合,进一步研究家蚕治疗糖尿病的有效部位、有效成分,来分析确认与治疗糖尿病的家蚕抗氧化药效物质基础。最后对家蚕的质量标准控制进行初步探讨。结果家蚕抗氧化活性成分的含量测定结果:不同产地的家蚕样品中抗氧化活性成分含量依次为:福建江西浙江;相同产地的同一品种家蚕各部位抗氧化活性成分含量依次为:70%乙醇部位正丁醇部位乙酸乙酯部位石油醚部位。家蚕中抗氧化活性成分随着入血时间的增加含量逐渐增大。家蚕中的抗氧化活性成分与KMn04发生反应,在硅胶G版上呈现褪色斑点。以此为依据,分别借助HPLC图谱的对比及LC-MS的定性分析,发现蚕体内代谢物的特征性色谱峰。对家蚕降血糖成分的GC-MS表征结果表明:家蚕70%部位的化合物有288个,已鉴定的化合物有64个。家蚕乙醇总提物的化合物有277个,已鉴定的化合物有61个。分别利用TLC、UV等方法,初步建立相关的家蚕质量标准控制方法。结论通过本实验,证实家蚕中具有潜在的抗氧化活性成分。在此过程中,建立薄层色谱法分析其抗氧化成分,利用HPLC、LC/MS-QTOF技术对其中潜在的抗氧化活性成分进行了初步分析与鉴定,并初步建立相关的家蚕质量标准控制方法。本论文的研究结果为家蚕的应用开发奠定基础,为家蚕治疗糖尿病的临床应用提供科学依据。
【学位授予单位】：福建中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R284.1
【图文】：

蚕体,桑叶,代谢物,蚕沙

图１－９桑叶、蚕体内代谢物、蚕沙的薄层色谱图逡逑１．芦丁邋２．槲皮素３．山奈素４．桑叶５．蚕体内代谢物６．香沙逡逑从图１－９可以看出桑叶、蚕体内代谢物、蚕沙各样品在石油醚－丙酮（１０：４）、逡逑氯仿－甲醇（１０：１）、甲苯－乙酸乙酯－甲酸（５：２：１）三种不同展开系统中均可以得逡逑到良好的分离，在经过ＫＭｎ０４显色后可以看到在各硅胶Ｇ版上蚕体内代谢物均出逡逑现褪色斑点；在展开系统石油醚－丙酮（１０：４）的条件下尤为明显。另外从图中逡逑可以看出Ａ、Ｂ两个斑点只有在蚕体内代谢物的样品中才有显现，可用来区别桑逡逑叶与蚕沙，且随着展开系统极性的增大而往上展开。当用１０％硫酸乙醇显色时，逡逑褪色斑点呈现紫红色斑点，与三萜类或留体类化合物的薄层显色行为一致。接着逡逑采用上述的薄层条件对不同年份产地的家蚕、僵蚕、桑叶、蚕沙、蚕蛹进行测定。逡逑如图１－１０。逡逑１９逡逑

蚕体,精密度试验,代谢物,精密度

逡逑从图１－１０可以看出家蚕、桑叶、蚕沙、蚕蛹各样品在石油醚－丙酮（１０：４）、逡逑氯仿－甲醇（１０：１）、甲苯－乙酸乙酯－甲酸（５：２：１）三种不同展开系统中均可以得逡逑到很好的区分，各样品自身的分离度也很好，在经过ＫＭｎ０４显色后可以看到家逡逑蚕具有很好的抗氧化活性效果。展开系统石油醚－丙酮（１０：４）可以非常清晰的逡逑显现出抗氧化活性斑点。逡逑３讨论逡逑本节采用硅胶Ｇ为固定相，以石油醚－丙酮（１０：４）、甲苯－乙酸乙酯－甲酸逡逑（５：２：１）、氯仿－甲醇（１０：１）为展开剂为展开系统，其中前两个展开系统展开前逡逑用盐酸饱和，后一展开系统以所用展开剂饱和，桑叶、蚕体内代谢物、蚕沙供试逡逑品斑点在有盐酸饱的条件下，斑点更清晰，在桑叶、蚕体内代谢物、蚕沙样品在逡逑所优化的展开系统中均得到很好的分离；氯仿－甲醇（１０：１）不可用盐酸饱和，逡逑因为氯仿可与盐酸反应，致使供试品斑点模糊、产生明显的拖尾。逡逑在采用ＫＭｎ0４为显色剂时

中医药大学,硕士学位论文,蚕沙,蚕体

桑叶、蚕体内代谢物、蚕沙280nm的HPLC图

【参考文献】