【摘要】：淋巴瘤是一种淋巴造血系统的恶性肿瘤,患者全身各组织器官均可受损,并伴随着发热、盗汗、消瘦等全身的症状。目前淋巴瘤发病的主要原因包括自身免疫因素、物理因素等,但淋巴瘤的发病机理尚不清楚。本实验通过研究U937淋巴细胞初步探索槐耳清膏的免疫调节作用,通过CD4~+CD25~+Treg细胞深入研究淋巴瘤发展过程,为淋巴瘤治疗提供理论依据。首先本实验采用U937淋巴细胞诱导小鼠淋巴瘤模型,通过对小鼠肺、肝脏和肾检测以及对小鼠体内细胞因子的分析来探究槐耳清膏的初步免疫作用,结果表明槐耳清膏预处理能减轻淋巴瘤小鼠的肺、肝脏和肾组织损伤,减少淋巴瘤小鼠体内T_H1型和T_H2型细胞因子分泌,且槐耳清膏预处理对淋巴瘤小鼠的治疗效果比醋酸波尼松片更显著。其次,为了探究槐耳清膏对淋巴细胞U937的免疫调节作用,我们研究了槐耳清膏对淋巴细胞活力的影响,发现槐耳清膏对淋巴细胞增殖有抑制作用。同时从转录水平对IFN-γ和IL-10进行分析,结果表明两种细胞因子的表达水平与槐耳清膏的浓度呈正相关。此外我们也用ELISA方法对胞内蛋白进行分析,发现U937细胞能表达高水平的IFN-γ和低水平IL-10。同时线粒体作为调节干扰素的控制中心,随着槐耳清膏浓度的不断增加,线粒体膜电位下降,线粒体的完整性遭到了破坏。最后,为了进一步探究淋巴瘤具体的发病机制,我们使用A20细胞诱导移植肿瘤模型,重点探究槐耳清膏对CD4~+CD25~+Treg细胞的免疫调节作用。在模型组中,IL-6和IL-10表达水平显著提高,意味着CD4~+CD25~+Treg细胞可能对IL-10和IL-6进行上调。作为CD4~+CD25~+Treg细胞的辅助标记物Foxp3蛋白,我们发现了模型组中Foxp3的表达量在胸腺内显著增加。同时通过磁珠筛选得到淋巴瘤小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞的含量在胸腺和肝脏内增加,外周血和脾脏内减少,这表明CD4~+CD25~+Treg细胞在外周血和脾脏内的减少可能导致淋巴瘤。以上结果表明,槐耳清膏预处理对淋巴瘤小鼠的治疗效果比醋酸波尼松片更显著,槐耳清膏能抑制淋巴细胞的增殖,增加外周血和脾的CD4~+CD25~+Treg细胞的数量,减少肝脏和胸腺的CD4~+CD25~+Treg细胞的数量,表明CD4~+CD25~+Treg细胞与淋巴瘤的生长和增殖密切相关。这些结果表明了槐耳清膏能抑制淋巴瘤的发生和发展,为淋巴瘤的治疗提供更好的依据。
【学位授予单位】：大连理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5
【参考文献】
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本文编号：
2772874
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