五苓散对水负荷大鼠尿量影响及与肾脏AQP2相关性的研究

发布时间：2020-07-29 23:49

【摘要】：目的本实验通过建立水负荷大鼠模型,以尿量为指标,并通过免疫组化技术、RT-PCR、Western Blot方法对大鼠肾脏AQP2蛋白及mRNA的表达情况进行检测和定位、定量分析,以呋塞米为对照药物,观察五苓散低剂量组、五苓散中剂量组、五苓散高剂量组对水负荷模型大鼠水液代谢的影响作用,从而探究其机制,为临床治疗水液代谢类疾病,在中药复方制剂的应用方面提供有效的理论基础和实验依据。方法取水负荷实验合格的大鼠40只,随机分为5组(n=5),即正常组(NG组)、呋塞米组(F组)、五苓散低剂量组(WLS-L组)、五苓散中剂量组(WLS-M组)、五苓散高剂量组(WLS-H组)。水负荷实验结束后,立即将大鼠放入代谢笼内(每笼一只)。正式实验前,大鼠禁食不禁水,第二天各组大鼠分别按20ml·kg-1的灌胃体积灌服,后分别于灌胃后的第1、2、4、6、8、24h收集并测量大鼠尿量每天按时喂食,期间大鼠正常喂食。连续灌胃7d。实验结束后,立即处死大鼠,迅速摘除肾脏。一只肾脏放入甲醛中以备免疫组化实验使用,另一只用锡箔纸包好放入液氮中冷冻,后放入零下80℃的超低温冰箱中以备Western Blot实验及RT-PCR实验使用。结果用药后,通过对大鼠24h总尿液量的测量,发现与正常组相比,五苓散低剂量组和五苓散高剂量组24h总尿量变化无统计学意义(P0.05),而五苓散中剂量组及呋塞米组24h尿量变化存在明显差异(P0.05);与呋塞米组比较,五苓散中剂量组24h尿量变化无差异性(P0.05)。与正常对照组相比,呋塞米组、五苓散中剂量组肾脏AQP2表达显著降低,经统计学分析,有统计学意义(P0.05),五苓散低剂量组以及五苓散高剂量组肾脏AQP2表达的改变无意义(P0.05)。与正常对照组相比,呋塞米组、五苓散中剂量组肾脏AQP2mRNA表达显著降低,经统计学分析,有统计学意义(P0.05),五苓散低剂量组以及五苓散高剂量组肾脏AQP2mRNA表达的改变无意义(P0.05)。结论1.本实验通过建立水负荷大鼠模型,观察传统利尿药五苓散与常用西药速尿的区别,结果表现为五苓散有明显的利尿作用,且具有长时性。2.呋塞米组及五苓散中剂量组(0.26g/kg),对水负荷模型大鼠有较好的利尿作用,且能有效降低大鼠肾脏组织中AQP2和AQP2mRNA的表达。3.五苓散低剂量组(0.13g/kg)、五苓散高剂量组(0.52g/kg)对水负荷模型大鼠利尿作用不明显。
【学位授予单位】：黑龙江中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5
【图文】：

黑龙江中医药大学硕士学位论文Ｉ逦逡逑表１各组大鼠连续给药后第７ｄ的２４ｈ尿量（ｍｌ）变化（＾±八ｎ二８）逡逑分组逦组数逦２４ｈ总尿量逡逑ＮＧ逦８逦１２．７９±０．５８逡逑ＷＬＳ－Ｌ逦８逦１３．８８±０．邋３７＊逡逑ＷＬＳ－Ｍ逦８逦１９．０６±０．７０ａ逡逑ＷＬＳ－Ｈ逦８逦１４．邋０１邋±０．５９＊逡逑Ｆ逦８逦１９．４１±０．７６ａ逡逑ｂ邋ＮＧ邋组比较，＊Ｐ＞０．０５，ＡＰｃＯ．ＯＳ，▲Ｐ＜０．０５；丨ｉＦ邋比较，ＡＰ＞０．０５逡逑

——■［逡逑图１大鼠第７ｄ的２４ｈ尿量逡逑逦表２各组大鼠给药Ｉｄ各时间点尿最（ｍｌ邋）变化（，邋ｎ邋＝邋８）逦逡逑分组逦ｌｈ逦２ｈ逦４ｈ逦６ｈ逦８ｈ逡逑ＮＧ逦２．０４±０．３７逦３．３５±０．５６逦４．１１邋±０．５７逦５．９８±０．４８逦６．８５±０．９Ｉ逡逑ＷＬＳ－Ｌ逦２．６１邋±０．４４邋‘逦４．１３±０．３８＊逦５．２１邋土邋０．３９＊逦６．７３±０．５８’逦８．３８±０．５３‘逡逑ＷＬＳ－Ｍ逦３．５３±０．３７ａ逦６．１３±０．４８ａ逦８．６８±０．５５ａ逦１Ｉ．２６±０．９１ａ逦１３．２３邋±０．７８＇＇逡逑ＷＬＳ－Ｈ逦２．２１±０．３６‘逦４．０９±０．５１＊逦５．１５±０．３８＊逦７．０８邋士邋０．７５＊逦８．５邋丨土邋０．７８＊逡逑Ｆ逦４．２０±０．７５Ａ逦６．１９±０＿６４＆逦８．７６±０＿７１Ａ逦１２．Ｉ６±０．８９Ａ逦Ｉ４＿２５±０．６Ａ逡逑ｂ＇ＮＧａｉ邋比较，ａＰ＜０．０５，邋▲ＰＣ０．０５，邋＊Ｐ＞０．０５；邋ＳＦ邋比较，ａＰ＞０．０５．逡逑３３逡逑

图５邋ＡＱＰ２ｍＲＮＡ的表达逡逑

【参考文献】

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本文编号：2774670