健脾益智法对MCAO大鼠脑水肿的作用及机制研究

发布时间：2020-08-06 06:08

【摘要】：本文基于“脾主运化水湿”是津液代谢重要内在机制的角度,从理论和实验两个方面,探讨健脾益智法对缺血性中风后脑水肿的改善作用,从而完善“脾脑相关”理论,丰富“脾主运化”理论的科学内涵,为中医药临床防治缺血性中风的作用机制研究提供新的思路和方法。理论研究部分,本文首先从现代医学角度,探讨对缺血性中风脑水肿的认识;其次,从中医对缺血性中风脑水肿的认识,提出从津液代谢角度降低脑水肿的思路,并进一步提出“脾主运化水湿”是津液代谢的重要内在机制,脾胃升清降浊,清升浊降是人体内部气化过程中升降运动的一般规律,而这一生理活动的进行,主要以脾胃为枢纽;最后,基于津液代谢探讨健脾益智法对缺血性中风脑水肿的防治作用。实验部分,具体研究如下:1.目的:探讨健脾益智法对缺血性中风大鼠脑水肿的作用机制,及其对Na~+K~+-ATP酶、Ca~(2+)-ATP酶活性变化和对MDA、SOD、CAT、GSH-Px等自由基损害的影响。2.方法:将180只13周龄,体重280-300g的SPF级健康雄性SD大鼠,适应性饲养6天后,随机分为正常组、模型组、中药组,每组各60只。模型组、中药组用线栓法制备大脑中动脉栓塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,并进行神经功能缺损评分,选取2-3分的大鼠。造模24h后,各组开始给药,正常组、模型组给与生理盐水,中药组给与健脾益智混悬液,均按1.44ml/100g,1次/日进行喂药。再按存活时间分为以下5个亚组:6h、12h、1d、3d、7d,每个亚组各12只。测定脑含水量;采用TTC染色法测定脑梗死体积;蛋白浓度的测定用BCA法,以牛血清白蛋白(BSA)作为标准品;MDA含量的测定,采用TBA比色法;SOD活性的测定,采用黄嘌呤氧化酶法;CAT活性的测定,CAT在一定条件下能直接分解其底物H_2O_2,使其浓度下降,则吸光度下降;GSH-Px活性的测定,以催化GSH氧化的反应速度即单位时间内GSH减少量来表示。3.结果:中药组梗死体积较模型组显著缩小,模型组术后1d的梗死面积最大(P0.05)。模型组中,脑缺血6h后,大鼠脑含水量开始升高,术后1d达到高峰,之后逐渐下降,趋于正常,与正常组相比,差异有统计学意义(P0.05);中药组术后3d、7d脑组织含水量低于模型组,与模型组相比,差异具有统计学意义(P0.05),并在中药治疗第7d时达到最低。术后6h、12h、1d、3d,与正常组相比,模型组Na~+K~+-ATP酶活性显著降低(P0.05);术后6h、12h、7d,与模型组相比,中药组Na~+K~+-ATP酶活性显著增加(P0.05)。术后6h、12h、3d,与正常组相比,模型组Ca~(2+)-ATP酶活性显著降低(P0.05);术后6h、12h、3d、7d,与模型组相比,中药组Ca~(2+)-ATP酶活性显著增加(P0.05)。与模型组比较,中药组的MDA含量除了术后1d外均显著低于模型组(P0.05):而SOD活性除了术后6h、1d外,均显著高于模型组(P0.05);CAT含量在术后3d、7d时与模型组差异有显著性;GSH-Px含量除了术后6h外均显著高于模型组。4.结论:(1)脾胃主升清降浊是津液气化的内在动力,脾胃又为气机之枢,是津液运行输布的内在动力,故“脾主运化”是津液代谢的重要内在机制。(2)健脾益智法可减少MCAO大鼠脑含水量,与其能增加Na~+K~+-ATP酶、Ca~(2+)-ATP酶活性有关,考虑健脾益智法能通过降低脑水肿程度来改善缺血性中风引起的脑功能障碍。(3)健脾益智法可促进MCAO大鼠脑组织SOD、GSH-Px、CAT表达增加,减少MDA的产生,抑制脂质过氧化反应,缩小脑梗死面积,保护细胞膜结构的通透性和完整性,降低脑水肿程度,对缺血性中风大鼠脑组织有明显的保护作用。
【学位授予单位】：福建中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

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