古法炮制姜炭指纹图谱的建立和药理活性的初步研究

发布时间：2020-08-06 14:51

【摘要】：干姜作为药食同源的一类中药材,具有温中驱寒,回阳通脉之效。2015版《中国药典》收录干姜的炮制品有炮姜与姜炭,其中姜炭具有温中止泻,温经止血之效。古法炮制姜炭是指将干姜封存于特制砂锅内,在外层铺满薄厚均匀的阴土,精准掌握火候烤制而成。其在临床中已有近百年的药用史,但关于其引起功效改变的物质基础与炮制机理还未见系统研究。本课题依据“炒炭存性”理论,通过化学成分研究和体内外药效学研究分析古法炮制姜炭与干姜的异同点,以期为姜炭“炒炭存性”标准的建立及引起功效改变的炮制机理提供理论依据。具体研究方法与结果如下:(1)化学成分研究首先,采用HPLC技术建立古法炮制姜炭与干姜的对照指纹图谱,通过比较姜炭与干姜的色谱信息,发现干姜中含量较高的活性成分在前期出峰,而姜炭中含量较高的成分在后期出峰,表明干姜在炮制过程中活性成分的极性发生了明显变化;通过相似度分析,标定8批干姜的特征峰7个,8批姜炭的特征峰9个,姜炭与干姜的共有峰7个,并推测共有峰可能为姜炭“炒炭存性”的物质基础。其次,选取香草醛作为对照品测定姜炭与干姜中姜酚类物质的含量,结果显示姜炭与干姜中姜酚含量分别为1.705 mg/g和8.456 mg/g,表明在炮制过程中,姜酚类物质的含量显著降低。(2)体外药效学研究干姜经古法炮制为姜炭,表面产生了疏松多孔的炭素结构。本文利用炭素对亚甲基蓝的吸附作用,采用分光光度法测定不同目数姜炭的吸附作用。结果显示随着姜炭目数的增加,吸附力也随之增加。此外,采用连续稀释法评估干姜与姜炭不同提取物及姜炭粉末对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用,发现干姜与姜炭的提取物均具有抑菌活性,除干姜甲醇超声提取液外,其余样品对大肠杆菌的抑制作用均优于金黄色葡萄球菌,且姜炭粉末的抑菌作用优于姜炭的提取物。(3)体内药效学研究鉴于姜炭优良的吸附性能与止泻止血之效,本文考察了姜炭水煎液与姜炭粉末混悬液对番泻叶导致的虚寒性腹泻模型大鼠的干预作用,通过分析粪便含水量,脏器指数、HE染色及凝血时间等指标,评估两种给药方式的治疗效果。结果显示两种给药方式不仅可以改善番泻叶引起的腹泻症状和脏器损伤情况,还可明显缩短凝血时间,且姜炭粉末组止血效果优于姜炭水煎液组。综上,通过对比古法炮制姜炭与干姜的化学成分与药理活性,我们发现姜炭中以极性较大的活性成分为主,而干姜中活性成分的极性较小,姜炭粉末的抗菌活性、止血活性及抗腹泻性能更佳,可能与其较好的吸附作用有关。
【学位授予单位】：西北大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R283;R285.5
【图文】：

姜辣素,结构式,姜烯酚,姜酚

西北大学硕士专业学位论文中姜酚含量的对照品，发现采用无水乙醇作为溶媒时姜酚含量的溶出率最高[66]；于江永等人采用 HPLC 结合主成分分析探究炮制程度对姜炭化学特征的影响，结果发现标炭中姜烯酚与姜酮含量较高，而重炭中几乎不含有姜烯酚类物质[67,68]。

路线图,路线图,研究技术

研究技术路线图

精密度

第二章古法炮制姜炭与干姜化学成分的研究2.2.3 方法学考察2.2.3.1 精密度试验精密吸取同一批次供试品溶液，连续进样 6 次，记录色谱图，如图 2-17 所示使用中药色谱指纹图谱相似度评价系统 A 版（2012 版）进行相似度评价，以 S1 号谱图为参考，时间窗宽度为 0.1 min，中位数法生成对照图谱。S1-S6 号色谱图与对图谱的相似度分别为 0.988，0.996，0.996，0.997，0.995，0.987。全峰匹配后选取面积较大的 10 个共有峰作为特征峰，以保留时间为 43.493 min 的色谱峰作为对照计算相对保留时间和相对峰面积。计算结果如表 2-2 和 2-3 所示，精密度考察中相保留时间的 RSD 值均<1%，相对峰面积的 RSD 值均<3%，即表明该仪器的精密度好，符合指纹图谱的检测要求。

【参考文献】