玉屏风散对寒热交替刺激模型大鼠肺及皮肤免疫功能影响的实验研究

发布时间：2020-08-08 07:10

【摘要】：目的:探讨寒热交替刺激对大鼠肺及皮肤免疫功能的影响,以及玉屏风散对大鼠卫外功能的干预作用,为提高机体免疫防御功能提供实验依据。方法:1、分组:SPF级健康雄性Wistar大鼠108只,体重180-220g,按照随机数字表法分为6组,每组18只,分别为:正常组(A组)、寒热交替组(B组)、寒热交替加中药干预组(C组)、低免常温组(D组)、低免寒热交替组(E组)、低免寒热交替加中药干预组(F组)。2、造模及给药:(1)免疫低下大鼠模型的制备:除正常组外,免疫低下组大鼠均皮下注射免疫抑制剂氢化可的松注射液20mg/(kg.d),连续注射5d。(2)寒热交替刺激大鼠模型的制备:首先对大鼠进行寒刺激,设定人工气候箱RH(%)(50±4),T℃(0±2),每天刺激40分钟;寒刺激结束后,紧接着对大鼠进行热刺激,设定人工气候箱RH(%)(50±4),T℃(33±2),每天刺激20分钟。(3)药物干预:每天定时将大鼠置于人工气候箱接受寒热交替刺激后,按照中药给药剂量等效换算方法计算,将玉屏风散成人每日所需药量换算成大鼠所需药量为25g/kg,连续灌胃用药,每天1次;同时,其余组大鼠灌以相应剂量的蒸馏水。3、检测:(1)一般情况观察:每日定时观察并记录各组大鼠的精神、活动、毛色、关节、大便以及进食饮水量、体重等一般情况。(2)形态学观察:分别于实验第7d、14d、28d,采用HE染色,于光镜下观察不同时期各组大鼠肺及皮肤组织的病理形态学改变。(3)免疫指标测定:分别于实验第7d、14d、28d,检测大鼠气管肺灌洗液(简称气道液)中免疫球蛋白IgG含量;检测大鼠肺及皮肤组织中T细胞亚群CD4~+、CD8~+以及细胞因子IL-1α、TNF-α含量。(4)检测大鼠左肺湿/干重比(W/D)。结果:1、一般情况:与正常组相比,各模型组大鼠的精神、活动、毛色、关节、大便、进食饮水量以及体重等,分别在第7天、14天、28天不同时间段均发生了不同程度的改变,表现出一系列的病理症状。实验期间,大鼠在接受寒热交替刺激后表现出了诸如精神萎靡、活动度减少、身体蜷缩、扎堆、鼻部分泌物增多、背毛竖立凌乱、稀便、进食饮水量减少、体重增长缓慢,部分大鼠出现足背水肿伴糜烂破溃,关节肿大等病理征。随着干预时间的延长,动物的行为学病理表现逐渐加重。2、形态学观察:通过HE染色,经电镜下观察大鼠肺及皮肤组织病理学变化可见,与正常组相比,寒热交替组和低免寒热交替组大鼠肺组织存在慢性炎细胞浸润、淋巴细胞浸润、纤维组织增生、肺泡萎缩等不同程度的损伤;而皮肤组织的病变程度则不明显,或仅表现为低免模型组皮肤组织现少量淋巴细胞浸润,结果证实寒热交替刺激对于肺组织所造成的的病理损伤较皮肤组织更为明显。3、免疫指标T细胞亚群CD4~+、CD8~+:与正常组相比,寒热交替组、低免常温组、低免寒热交替组大鼠肺及皮肤中CD4~+、CD8~+含量均明显降低(P0.01),且以低免模型组肺及皮肤组织中指标含量的降低最为显著。与寒热交替组相比,低免寒热交替组大鼠肺及皮肤中CD4~+、CD8~+含量均降低(P0.01),寒热交替加中药干预组大鼠肺及皮肤中CD4~+、CD8~+含量均升高;与低免寒热交替组相比,低免寒热交替加中药干预组大鼠肺及皮肤中CD4~+、CD8~+含量均升高(P0.01)。分别于第7天、14天、28天三个不同时间段,大鼠肺及皮肤组织中CD4~+、CD8~+的含量变化趋势呈现一致性。4、免疫指标细胞因子IL-1α、TNF-α:与正常组相比,寒热交替组、低免常温组、低免寒热交替组大鼠肺及皮肤中IL-1α、TNF-α含量降低,且以低免模型组肺及皮肤组织中指标含量的降低最为显著(P0.01)。与寒热交替组相比,低免寒热交替组大鼠肺及皮肤中IL-1α、TNF-α含量均降低(P0.01),寒热交替加中药干预组大鼠肺及皮肤中IL-1α、TNF-α含量均明显升高(P0.05或P0.01);与低免寒热交替组相比,低免寒热交替加中药干预组大鼠肺及皮肤中IL-1α、TNF-α含量均明显升高(P0.01)。分别于第7天、14天、28天三个不同时间段,大鼠肺及皮肤组织中IL-1α、TNF-α的含量变化趋势呈现一致性。5、免疫指标大鼠气管肺灌洗液(简称气道液)中免疫球蛋白IgG:与正常组相比,寒热交替组、低免常温组、低免寒热交替组大鼠气道液IgG含量均明显降低,经统计学处理,具有显著性差异(P0.01);与低免常温组相比,低免寒热交替组大鼠气道液IgG含量明显降低,具有统计学意义(P0.01);与寒热交替组相比,低免寒热交替组大鼠气道液IgG含量明显降低,具有显著性差异(P0.01);与寒热交替组相比,寒热交替加中药干预组大鼠气道液IgG含量均有不同程度的升高,具有统计学意义(P0.05或P0.01);与低免寒热交替组相比,低免寒热交替加中药干预组大鼠气道液IgG含量也明显升高,具有显著性差异(P0.01)。6、左肺湿干重比(W/D):第7天时,与正常组相比,寒热交替组、低免常温组、低免寒热交替组大鼠左肺湿干重比(W/D)均明显升高,经统计学处理,具有显著性差异(P0.01);第14天时,低免寒热交替组与正常组相比,大鼠左肺湿干重比(W/D)有所升高,具有统计学意义(P0.05)。结论:1、氢化可的松可导致大鼠免疫功能降低。2、寒热交替刺激对大鼠的一般情况(精神活动、皮肤毛色、关节、鼻部分泌物、粪便、进食饮水量、体重)、免疫指标(肺及皮肤中CD4~+、CD8~+、IL-1α、TNF-α含量,气道液免疫球蛋白IgG含量)、左肺湿干重比(W/D)以及组织形态学均有明显影响。其中,寒热交替刺激对免疫低下组大鼠的影响比正常组更为明显。3、玉屏风散对大鼠的一般情况(精神活动、皮肤毛色、关节、鼻部分泌物、粪便、进食饮水量、体重)、免疫指标(肺及皮肤中CD4~+、CD8~+、IL-1α、TNF-α含量,气道液免疫球蛋白IgG含量)、左肺湿干重比(W/D)以及组织形态学均有明显的改善及免疫调节作用。其中,玉屏风散对正常组大鼠的免疫调节和改善作用优于免疫低下组。4、分别于第7天、14天、28天不同时间段,大鼠肺组织与皮肤组织中免疫指标(CD4~+、CD8~+、IL-1α、TNF-α)的含量变化趋势呈现一致性,可见在寒热交替刺激条件下,大鼠肺与皮肤在病理变化方面具有很大的相关性,这与“肺外合皮毛”的经典阐述具有一致性。
【学位授予单位】：山西中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5;R-332
【图文】：

寒热,玉屏风散,进食量,模型大鼠

1 玉屏风散对寒热交替刺激模型大鼠进食量的 2 玉屏风散对寒热交替刺激模型大鼠饮水量的图 1、图 2 显示，分别于第 7 天、14 天、28 、低免常温组、低免寒热交替组大鼠进食量及饮低免常温组相比，低免寒热交替组分别于第 7

寒热,饮水量,模型大鼠,玉屏风散

玉屏风散对寒热交替刺激模型大鼠饮水量的的影响

寒热,体重,玉屏风散,常温

**P＜0.01；与低免常温组相比，△△P＜0.01；与寒热交替交替组相比，★★P＜0.01。体重（g）7 天 14 天 283.50±17.28 338.83±12.40 245.33±6.19**299.17±6.65**269.17±7.33##323.33±10.88#279.67±7.15 291.00±22.95**226.33±23.83**△△#267.50±16.68**△△##266.83±3.60★★278.00±17.92

【参考文献】